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乳酸脱氢酶同工酶的分离 作业一、单选题1下列实验流程中,错误的是( )a鲜玫瑰花+清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰油b胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素c石灰水浸泡漂洗压榨萃取浓缩过滤橘皮油d挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵(果酒)醋酸发酵(果醋)【答案】c【解析】试题分析:橘皮精油的提取过程是:石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油,c错误。考点:本题考查实验的相关操作。2在利用凝胶电泳法分离蛋白质时,一定要加入缓冲溶液,起到的作用是( )。a使酶的活性最高b使蛋白质的活性最高c维持蛋白质所带电荷d使蛋白质带上电荷【答案】c【解析】加缓冲液的目的是维持蛋白质所带电荷不发生改变而不是使蛋白质带上电荷。3在血红蛋白的提取和分离实验中,将经处理破裂后的红细胞混合液以2000rmin的速度离心10min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是a血红蛋白、甲苯层、脂类物质层、沉淀层b甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层c脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层d甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层【答案】d【解析】血红蛋白溶液离心后分为4层,从上到下,第1层为无色透明的甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液,第4层是其他杂质的暗红色沉淀物,故本题正确答案为d。 【考点定位】血红蛋白的提取和分离4从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取dna难度大,其原因不是( )a. 蛋白质对温度、盐浓度、ph等条件更敏感,更易失活b. 蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法c. 提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序d. 提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步【答案】d【解析】试题分析:蛋白质对温度、盐浓度、ph等条件更敏感,更易失活,而dna分子相对来讲比较稳定,这些区别是提取某种特定的蛋白质比提取dna难度大的原因之一,a项不符合题意;蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法,而且还需要依据蛋白质的特性摸索提取的程序,这些也是提取蛋白质的难度较大的原因,b、c项不符合题意;提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步,这是提取蛋白质的步骤,不是提取蛋白质难度大的原因,d项符合题意。考点:本题考查提取某种特定蛋白质和提取dna的方法比较的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力。5红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是a.血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理粗分离纯化纯度鉴定”的顺序进行b.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液c.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质d.可经sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定【答案】b【解析】试题分析:凝胶应用蒸馏水充分溶胀来配制凝胶悬浮液,b错误。考点:本题考查蛋白质的提取和分离。6在蛋白质的提取和分离中,对于样品的处理过程的分析正确的是a. 洗涤时离心速度过高、时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果b. 洗涤红细胞的目的是除去血浆中的葡萄糖、无机盐c. 洗涤过程中用0.1%的生理盐水d. 透析的目的是去除样品中相对分子质量较大的杂质【答案】a【解析】洗涤红细胞时,采用低速短时间离心法,否则达不到离心的效果,a正确;洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,b错误;洗涤过程中要用0.9%的生理盐水,c错误;透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质,d错误。7在蛋白质的提取和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是( )a. 洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐b. 洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果c. 洗涤过程选用0.1%的生理盐水d. 透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质【答案】d【解析】透析的原理是渗透,其目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。8下列关于红细胞和血红蛋白的叙述,不正确的是a. 哺乳动物成熟的红细胞可用于制备细胞膜和提取血红蛋白的生物材料b. 血红蛋白属于细胞外液的成分,其组成元素有c、h、o、n、fec. 血红蛋白的纯化可用凝胶色谱法,其原理是根据相对分子质量大小分离蛋白质d. 蛙的红细胞可进行无丝分裂,其特征是没有出现纺锤丝和染色体的变化【答案】b【解析】试题分析:哺乳动物成熟的红细胞没有核膜和众多的细胞器,易吸水涨破,可用于制备细胞膜和提取血红蛋白的材料,a正确。血红蛋白是红细胞内的结构蛋白,其组成元素有c、h、o、n、fe,b错误。凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法,c正确。无丝分裂过程中不出现纺锤丝和染色体的变化,d正确。考点:本题考查红细胞的相关知识,意在考查考生识记能力、理解所学知识要点,把握知识间内在联系,构建知识网络结构的能力。9下列对胡萝卜素的提取过程的分析,正确的是a. 把新鲜的胡萝卜粉碎,置于烘箱中烘干时,温度越高、干燥时间越长,烘干效果越好b. 在萃取过程中在瓶口安装冷凝回流装置,是为了防止加热时有机溶剂的发挥c. 在浓缩前,没有必要进行过滤d. 滤液用蒸馏装置进行蒸馏,蒸发出去的是胡萝卜素,留下的是有机溶剂【答案】b【解析】试题分析:在把新鲜的胡萝卜置于烘箱中烘干时,温度越高、干燥时间越长,胡萝卜素会分解,故a错误;在萃取过程中,为了防止加热时有机溶剂挥发需要在瓶中安装冷凝回流装置,故b正确;在浓缩干燥前,需要进行过滤出去萃取液中的不溶物,故c错误;将滤液用蒸馏装置进行蒸馏,要收集蒸发出去的液体,蒸发出去的是有机溶液,留下的是胡萝卜素,故d错误。考点:本题考查植物有效成分的提取的有关知识,意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。10以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是a. 洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂b. 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少c. 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测d. 在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢【答案】d【解析】试题分析:洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化,加入的生理盐水能维持细胞稳定形态,防止红细胞破裂,a项正确;猪成熟红细胞中无细胞核,缺少细胞器,提纯时杂蛋白质较少,b项正确;血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液(如果操作都正确),c 项正确;在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白的分子量比杂蛋白大,质量越大的蛋白质,通过凝胶色谱柱的速度越快,d项错误。考点:本题考查蛋白质的提取和分离的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。11下列关于胡萝卜素的说法不正确的是a胡萝卜素存在于叶绿体类囊体薄膜上b胡萝卜素可划分为三类,-胡萝卜素是其中最主要的组成成分c胡萝卜素可以用来预防癌症的发生d-胡萝卜素只存在于蔬菜中【答案】d【解析】胡萝卜素大多存在于蔬菜中,d错误。【考点定位】胡萝卜素12下列关于胡萝卜素的说法不正确的是( )a胡萝卜素存在于叶绿体类囊体薄膜上b胡萝卜素可划分为、三类,胡萝卜素是其中最主要的组成成分c胡萝卜素只存在于蔬菜中d胡萝卜素可以用来预防癌症的发生【答案】c【解析】试题分析:a、蔬菜、岩藻和微生物的发酵产物中都含有-胡萝卜素,a错误;b、萃取法提取胡萝卜素时,萃取前要将胡萝卜粉碎、干燥,b正确;c、胡萝卜素可划分为、三类,其中-胡萝卜素是最主要的组成成分,c正确;d、研究发现,天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复正常细胞的作用,胡萝卜素可用来预防肿瘤、癌症和心脑血管疾病等,d正确。考点:本题主要考查胡萝卜素的提取相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。13胡萝卜素被认定为a类优秀营养色素,关于胡萝卜素说法不正确的是( )a胡萝卜素属脂溶性维生素a的一种,可治疗因缺乏维生素a而引起的骨质疏松,佝偻病等b胡萝卜素是一种抗氧化剂,可清除体内自由基,抑制自由基生成,具有抗衰老作用c胡萝卜素具有促进免疫细胞增殖,增强免疫细胞功能的作用,故可防治肿瘤、癌症、心脏病等疾病d胡萝卜素摄入量大时,在体内可积累又不会引起中毒,故可作为食品添加剂和营养补充剂【答案】a【解析】试题分析:胡萝卜素属脂溶性维生素a的一种,可治疗因缺乏维生素a而引起夜盲症等,a错误。考点:本题考查胡萝卜素的作用等知识。14在蛋白质的提取和分离中,下对样品处理过程的分析正确的是( )。a洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐b洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的结果c洗涤过程选用质量分数0.1%的nacl溶液(生理盐水)d透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质【答案】d【解析】洗涤红细胞的目的是去除血浆中除血红蛋白以外的杂蛋白;洗涤时离心速度过大,时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程选用质量分数为0.9%的生理盐水。15通常情况下,下列各选项所描述的变化趋势与图中曲线相符合的有横坐标纵坐标曲线a群落的物种丰富度生态系统稳定性大小抵抗力稳定性b凝胶色谱分离时间样品中相对分子质量大分子蛋白质caa豌豆自交代数基因频率大小a或ad氧的浓度有氧呼吸的强度酵母菌【答案】ad【解析】试题分析:生物的种类越多,营养结构越复杂,生态系统的抵抗力稳定性越高,故a正确;小分子蛋白质容易析出,因此时间越长小分子蛋白质的含量越多,故b错误;aa连续自交,若没有人工选择过程,则a和a的基因频率不变,故c错误;酵母菌能进行有氧呼吸,在一定范围内随氧气浓度的增加,酵母菌有氧呼吸不断增强,最后达到稳定,故d正确。考点:本题主要考查生物学的基本内容,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系和识图、图文转化的能力。16下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。下列相关叙述正确的是( )a血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质具有调节功能b甲装置中a是蒸馏水,乙装置中c溶液的作用是洗脱血红蛋白c甲装置的目的是去除样品中分子量较大的杂质d乙装置分离时,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液【答案】d【解析】血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质的运输功能,a错误;甲装置中的a应该是磷酸缓冲溶液,不能是蒸馏水,b错误;甲装置是去除样品中分子量较小的杂质,c错误;乙装置中,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,d正确。【考点定位】蛋白质的提取和分离【名师点睛】蛋白质的提取和分离试验应该注意的事项有:1、红细胞的洗涤:如果分层不明显,可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外,离心速度过高和时间过长,会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,也得不到纯净的红细胞,影响后续血红蛋白的提取纯度。2、如何检测凝胶色谱柱的装填是否成功:由于凝胶是一种半透明的介质,因此可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯,检查凝胶是否装填得均匀。此外,还可以加入大分子的有色物质,观察色带移动的情况。如果色带均匀、狭窄、平整,说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡,轻轻敲打柱体以消除气泡,消除不了时要重新装柱。3、为什么凝胶的装填要紧密、均匀: 如果凝胶装填得不够紧密、均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,影响分离的效果。3、加入柠檬酸钠有何目的?为什么要低速、短时离心?为什么要缓慢搅拌? 防止血液凝固;防止白细胞沉淀;防止红细胞破裂释放出血红蛋白。4、如何检测血红蛋白的分离是否成功:如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话,能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓慢流出;如果红色区带歪曲、散乱、变宽,说明分离的效果不好,这与凝胶色谱柱的装填有关。17将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下顺序依次是a. 血红蛋白、甲苯层、其他杂质的暗红色沉淀物、脂溶性物质的沉淀层b. 甲苯层、脂溶性物质的沉淀层、血红蛋白、其他杂质的暗红色沉淀物c. 其他杂质的暗红色沉淀物、血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质的沉淀层d. 甲苯层、其他杂质的暗红色沉淀物、血红蛋白、脂溶性物质的沉淀层【答案】b【解析】分离血红蛋白时,将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,可以明显看到试管中的溶液分为4层:第1层为无色透明的甲苯层;第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层;第3层是红色透明液体,是血红蛋白的水溶液;第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。综上所述,b正确,a、c、d均错误。18下列关于物质提取、纯化原理的叙述中,不正确的是( )a采用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度不同b电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程c不能选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白d将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质【答案】c【解析】凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度不同,a正确;电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,b正确;由于哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核和众多的细胞器,所以常常选用猪、牛、羊等哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白,c错误;透析的原理是小分子能够通过半透膜,因此,利用透析法可以去除样品中相对分子量较小的杂质,d正确。【考点定位】凝胶色谱法、电泳法、透析法等物质分离、提取、纯化19已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其相对分子质量大小、电荷的性质和数量情况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是a. 分子甲与分子乙所带电荷性质不同b. 若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最慢c. 若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,分子丁存在于沉淀中,则分子甲也一定存在于沉淀中d. 将样品装入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋内,则分子乙也一定保留在袋内【答案】b【解析】在当场的作用下,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动,据此分析图示可知:甲与乙所带电荷性质相同,a错误;凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小分离蛋白质,相对分子质量较大的蛋白质在凝胶颗粒外部移动,路程短、移动速度较快,甲的相对分子质量最小,移动速度最慢,b正确;与甲相比分子丁的分子量较大,如果将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,分子丁存在于沉淀中,则分子甲不会存在于沉淀中,c错误;与乙相比丙的分子量较大,如果将样品装入透析袋中透析12 h,若分子丙保留在袋内,分子乙不一定保留在袋内,d错误。20下列有关提取和分离血红蛋白的叙述,错误的是( )a样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液b通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取c可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化d可通过sds聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度【答案】b【解析】试题分析:样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液,所以a正确;通过透析可以去除样品中分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取,b错误;可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化,c正确;sds聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋白质纯化鉴定使用最多的方法,所以d正确。考点:本题考查提取和分离血红蛋白的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理判断或得出正确结论的能力。二、非选择题21(选修一模块)柠檬油是植物芳香油中的一种,它是一种广谱性的杀虫剂,它可杀死蚊子、苍蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫,以及危害粮食、蔬菜的常见害虫,包括幼虫、蛹等,被称为一种绿色杀虫剂。必经步骤为如下图。请根据实验流程图回答下列问题:a(1)新鲜的橘皮中含有大量的_和水分,如果直接压榨,出油率较低。(2)压榨是个机械加压过程,要求是既要将原料压紧,防止原料滑脱,又要将 挤压出来。(3)a是 ,目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高 。b过程一般加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠,其目的是使柠檬油易与水分离,并调节ph至_。(4)c过程为用 过滤,目的是除去固体物和残渣。(5)柠檬油是食品、化妆品和香水配料的优质原料,具有很高的经济价值,提取柠檬油不采取水中蒸馏的原因是:水中蒸馏会导致 的问题。柠檬果皮精油的提取适宜采用 法。【答案】(1)果蜡、果胶 (2)油分 (3)石灰水 出油率 78(4)普通布袋 (5)原料焦糊和有效成分水解 压榨【解析】试题分析:植物芳香油的提取,例如柠檬油不用蒸馏,因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解,为此通常采用压榨的方法,但不直接压榨,因为新鲜的橘皮中含有大量的果蜡和果胶以及大量的水分,出油率不高,一般先进过水洗,然后再浸泡,浸泡的过程中加入石灰水,目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率,浸泡之后进行清洗、装料,接着加入相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠后进行压榨和喷淋,其目的是使柠檬油易与水分离,并调节ph至78,压榨出来的浆糊液经过普通布袋过滤,除去固体物和残渣

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