人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计 数 作业.docx

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、单选题1某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是（ ）a. 利用平板划线法对细菌进行计数b. 以石油为唯一碳源的培养基筛选c. 采用稀释涂布平板法分离菌种d. 称取和稀释土壤时应在火焰旁【答案】a【解析】分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板对微生物法，但对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法，a错误；由题干可知，实验目的是筛选出能分解石油的细菌，配制培养基时应以石油为唯一碳源，b正确；对微生物进行分离和计数，应该用稀释涂布平板法，c正确；微生物的分离和培养的关键技术是无菌技术，称取和稀释土壤时应在火焰旁进行，d正确。2可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是a含碳有机物、氨、光 b含碳无机物、氮、氮c含碳有机物、氨、氨 d含碳无机物、氨、氨【答案】d【解析】硝化细菌可以进行化能合成作用，属于自养型微生物，所以其碳源是含碳无机物；硝化细菌可以将氨气氧化形成硝酸盐，并释放能量，所以其氮源和能源都是氨气，故选d。【考点定位】微生物的营养物质3某同学在、三种条件下培养大肠杆菌，这三种条件是：以葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物； 以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物；以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物；根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：假设三种培养基中初始总糖量相等，则、三种条件依次对应的趋势图是（ ）a甲、乙、丙 b乙、丙、甲c丙、甲、乙 d丙、乙、甲【答案】c【解析】试题分析：葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物，该条件可以认为是一种理想条件，菌体的种群数量将呈“j”型曲线增长，对应曲线丙；以葡糖糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物，会导致培养基中营养物质越来越少，同时代谢废物的积累会导致菌体种群数量上升到一定程度后可能会有减少的趋势，对应图象甲；在用葡萄糖和乳糖作碳源的培养基上培养大肠杆菌，开始时，大肠杆菌只利用葡萄糖而不利用乳糖，只有当葡萄糖被消耗完毕后，大肠杆菌才开始利用乳糖，所以在条件下，大肠杆菌的数量开始时会增多，当葡萄糖被消耗完毕后，大肠杆菌由于没有碳源而使得数量暂不变化，当其开始利用乳糖时，其数量又开始增多，当乳糖消耗完毕后，大肠杆菌的数量将开始减少，对应图乙。故c正确考点：种群数量变化曲线4下图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是a. 培养基都应以尿素为唯一氮源b. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌c. -过程是梯度稀释，稀释溶剂是无菌水d. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈【答案】c【解析】尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，其它微生物不能，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，a正确；对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，b正确；-过程是梯度稀释，该过程用来选择培养尿素分解菌，因此稀释溶剂应该是含有尿素为唯一氮源的培养基，而不是无菌水，c错误；分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，ph升高，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈来鉴定，d正确。5农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其它细菌分开，对培养的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱培养 28 -30温度下培养a. b. c. d. 【答案】c【解析】试题分析：自生固氮菌是异养菌，生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖；自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是2830；自生固氮菌对抗生素敏感，培养基中不能加抗生素。所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830恒温箱中培养。考点：微生物的分离和培养6用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为104的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（ ）a涂布了1个平板，统计的菌落数是230b涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238c涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163d涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233【答案】d【解析】试题分析：检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数解：用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数故选：d考点：测定某种微生物的数量7在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出 （ ）a乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌b分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌c分解尿素的细菌、霉菌、放线菌d固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌【答案】c【解析】在以尿素作为唯一氮源的培养基上分解尿素的细菌可以生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，但不会抑制霉菌生长；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，但不会抑制放线菌生长。【考点定位】本题主要考查微生物的分离。8下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（ ）a以尿素作为唯一碳源b能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶c环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性d以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红【答案】d【解析】试题分析：由于只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以分离分解尿素的细菌时以尿素作为唯一氮源，a项错误；分解尿素的细菌能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，b项错误；该细菌产生脲酶是受基因控制的，而不是环境中的尿素诱导的，c项错误；细菌合成的脲酶将尿素分解成的氨会使培养基的碱性增强，ph升高，所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养该细菌后会使酚红指示剂变红，但如果培养基中添加了酸碱缓冲剂，则不会使酚红指示剂变红，d项正确。考点：本题考查分解尿素的细菌的分离的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。9下表是不同筛选的方法或结果，完全正确的一组是（ ）a. b. c. d. 【答案】b【解析】筛选耐盐的杨树品种，用不同浓度的nacl液处理不同品种杨树幼苗，应以幼苗成活率为观察测量的指标，a项错误；培养基应以尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的细菌能存活，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，ph升高。酚红指示剂在ph升高后将变红，这样可以准确鉴定该种细菌能够分解尿素，b项正确；抗生素抗性基因只是基因工程中用作载体的质粒应含有的标记基因的一种，c项错误；筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞，通常是将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞板上进行筛选，d项错误。【点睛】本题考查筛选方法的相关知识，解题的关键是要求考生对平时所学知识进行归纳和总结，并结合题意进行灵活运用。10鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色，加入刚果红的操作可在（ ）制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时培养基上长出菌落时a. b. c. d. 【答案】c【解析】加入刚果红的操作有两种：先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应，正确；在倒平板时就加入刚果红，正确。11在实验室里，从土壤里分离出自生固氮菌所需的培养基属于a天然培养基 b鉴别培养基c液体培养基 d选择培养基【答案】d【解析】试题分析：天然培养基也称复合培养基，是含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物，a错误；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物鉴别培养基是用于鉴别不同类型微生物的培养基，b错误；液体培养基与固体培养基是按培养基的物理状态分类的，液体培养基不一定都具有选择作用，c错误； 选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的，d正确。考点：微生物培养基的分类及作用。12“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是（ ）a在全营养的lb培养基中，筛选大肠杆菌b在以尿素为唯一氮源的固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物c用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物d在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物【答案】a【解析】试题分析：在全营养的lb培养基中，几乎所有细菌都能生长，不能筛选大肠杆菌；a错误在尿素固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物；b正确用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素 的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的微生物；c正确在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物；d正确考点：本题的知识点是尿素固体培养基、纤维素为唯一碳源的培养基、加入氯化钠的高盐培养基的选择作用，主要考查 学生对选择培养基的理解与运用13以下关于分解尿素的细菌的说法，正确的是a能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶b以尿素作为唯一的碳源c环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性d以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌不会使酚红指示剂变红【答案】d【解析】能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，a错误；分离分解尿素的细菌时用尿素作为唯一氮源，b错误；该细菌产生脲酶是受基因控制的，可以对环境中含有的大量的尿素进行分解，c错误；分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，d正确【考点定位】 以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量【名师点睛】培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物14在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有（ ）土样不同培养基污染操作失误没有设置对照a. b. c. d. 【答案】a【解析】土样不同可能导致计数偏差，正确；培养基污染，会导致菌落增多，正确；操作失误可能增加微生物的数量和种类，菌落会增多，正确；没有设置对照不会影响菌落数目，错误。15下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是a. 分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气b. 将实验组和对照组平板倒置，25恒温培养2448小时c. 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数d. 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红【答案】d【解析】分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，a错误；将实验组和对照组平板倒置，3037恒温培养2448小时，b错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300间的平板进行计数，求其平均值，c错误；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，d正确。二、非选择题16在肉牛产业中，常在饲料中加入一定量的尿素，因其有瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。(1)图中弧线箭头上“?”的具体操作是_。(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节ph的先后顺序是_；纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是_。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_。培养后,若出现_色,说明其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中,当菌落数目稳定时，应选取_方法计数；研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止_。【答案】 挑出菌落 先调节ph,后灭菌 平板划线法、稀释涂布平板法 酚红指示剂 红 平板计数 因培养时间不足导致遗漏细菌菌落数目【解析】据图分析：过程是从瘤胃菌液中筛选分解尿素的细菌，过程是扩大培养，过程是稀释涂布平板法接种，图中“？”目的是挑出符合要求的单菌落。根据号培养基中菌落基本呈均匀分布，说明是采用的是稀释涂布平板法接种；从功能上说，由于要尽量淘汰不能分解尿素的细菌，所以属于选择培养基；根据号培养基中菌落分布呈线型，所以采用的接种方法是平板划线法。（1）根据前面的分析可知，图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落。（2）进行培养基配制和灭菌时，为了防止灭菌后在调节ph时被杂菌污染的可能，所以应采取先调节ph，后灭菌。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。（3）鉴定分离纯化的菌种为尿素分解菌，根据尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解产生的氨与酚红指示剂显红色的原理，所以可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。（4）在实验中,当菌落数目稳定时，应选取平板计数方法计数；在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。【点睛】解决本题关键：一是读懂题图流程，根据两种平板培养基上分布的菌落推断接种方法；二是理解鉴定尿素分解菌的原理。17脲酶是催化尿素分解的特异性水解酶。该酶主要从刀豆等豆科植物提取，现被广泛应用于尿素废水的净化过程。请分析回答以下问题：(1)脲酶可以催化尿素分解为_，其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为_。(2)为了提高脲酶的利用效率，可以釆用固定化酶技术将其固定。酶的固定化方法有：吸附法、共价偶联法、包埋法和_。(3)实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱，让尿素废水过柱前，先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱，目的是_。(4)脲酶除了从植物获取外，还可以来源于土壤中的微生物。为了从土壤中分离得到队尿素为氮源的微生物,采用的分离方法操作最简便的是_。下列有关该分离方法的操作叙述错误的是_。a.必须使用固体培养基 b.必须在酒精灯火焰旁接种c.必须将接种后的培养皿倒置培养d.必须将接种前的培养皿、培养基、土壤悬浮液等进行灭菌处理【答案】 nh3和co2 红色 交联法 除去未吸附的游离尿酶 划线分离法 d【解析】试题分析：选择培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。（1）脲酶可以催化尿素分解为nh3和c02，其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为红色。（2）酶的固定化方法有：吸附法、共价偶联法、包埋法和交联法。（3）实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱，让尿素废水过柱前，先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱，目的是除去未吸附的游离脲酶。（4）分离微生物常用稀释涂布平板法和平板划线法，其中平板划线法是从土壤中分离得到以尿素为氮源的微生物的最简便的方法。采用平板划线法时，必须使用固体培养基，a正确；为了防止杂菌污染，必须在酒精灯火焰旁接种，b正确；配置培养基时，必须将接种后的培养皿倒置培养，防止皿盖上的水珠滴入培养基污染培养基，c正确；必须将接种前的培养皿、培养基等进行灭菌处理，而对土壤悬浮液不能进行灭菌处理，否则会杀死目的菌，d错误。18尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如右图所示。请分析回答问题：kh2po41.4gna2hpo42.1gmgso4.7h2o0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g将上述物质溶解后,用自来水定容到1000ml（1）此培养基能否用于植物组织培养？ ，理由是 。（2）