人教版选修1微生物的实验室培养 作业.docx

微生物的实验室培养一、单选题1通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是a. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温，高压灭菌后倒平板b. 取104、105的土壤稀释液01ml , 分别涂布于各组平板上c. 将培养皿倒置，37恒温培养1224小时d. 选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数【答案】d【解析】试题分析：培养基的灭菌方法是高温、高压灭菌，a正确；取10-4、10-5的土壤稀释液01ml，分别涂布于各组平板上，是设置了一系列对照实验，b正确；细菌培养时，要将培养皿倒置培养，并在370c恒温培养1224小时，c正确；选择菌落数在30-300个的一组平板为代表进行计数，而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数，d错误。考点：微生物的分离和培养2关于ms培养基与微生物培养基的配方相比不同之处，说法错误的是（ ）ams培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要bms培养基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培养基中的碳源和能源主要是葡萄糖cms培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素dms培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素作生长因子【答案】d【解析】ms培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要，a正确；ms培养基中的碳源和能源是蔗糖，b正确；ms培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素，c正确；ms培养基中需加维生素，有的微生物培养基中也要加维生素等微生物必需的营养物质，d错误【考点定位】组织培养基的成分及作用；微生物的分离和培养【名师点睛】s培养基含大量元素、微量元素、有机物，有机物包括甘氨酸、维生素b1、维生素b2、烟酸、肌醇、蔗糖、琼脂等，特别包括植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不合植物激素ms培养基含氨基酸如甘氨酸，有碳源如蔗糖，含维生素b1和维生素b6，微生物培养基中并不是所有氨基酸都加，有些微生物在生长发育过程中可自行合成，可以不加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加。3下表是某同学设计的三组培养基：组别培养基a矿质元素、蔗糖、维生素、甘氨酸、水、琼脂b葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、血清、水、琼脂c牛肉膏、蛋白胨、水、氯化钠、琼脂（1）其中a组培养基可能用于培养_，但在分化阶段必须添加有关的_ 。（2）用b组培养基可培养_，但不需要添加_。（3）用c组培养基可检验硬币上是否有细菌，培养一段时间后，可在此固体平板培养基上形成很多不同的_，从中选择不同的类型分别接种到固体培养基的试管斜面上，可用于分离细菌。（4）以上三种不同的培养基在用于培养之前都必须进行_操作，而且不同的培养基都必须有相应的适宜_。【答案】（1）植物离体组织 植物激素（2）动物细胞 琼脂（3）菌落（4）灭菌 ph【解析】（1）a组含有蔗糖、矿质元素等可以用来进行植物组织培养；在分化阶段需要加入生长素和细胞分裂素等植物激素，并控制好相互比例。（2）b组含动物血清、葡萄糖等可以用来培养动物细胞；由于动物细胞培养时用的是液体培养基，不需要加入凝固剂琼脂。（3）细菌在固体培养基上培养时会繁殖形成很多不同的菌落。（4）以上三种不同的培养基在用于培养之前都必须进行灭菌操作；而且不同的培养基都必须有相应的适宜ph，以适应不同生物细胞的生长需要。【考点定位】植物组织培养、动物细胞培养、细菌培养41957年，日本人率先利用微生物发酵技术，成功生产谷氨酸。下列关于谷氨酸的叙述中，正确的是（ ）a谷氨酸在人体细胞内的最终代谢产物通过外排的方式进入血液，该过程需要消耗能量b谷氨酸在微生物细胞内大量积累的时期是稳定期，谷氨酸属于它的次级代谢产物c发酵工程中，常用的谷氨酸产生菌有谷氨酸棒状杆菌和黄色短杆菌。当培养基中的碳源和氮源的比例由3:1调整为4：1的时候，谷氨酸的合成量会下降d人体内，可由谷氨酸生成赖氨酸，但该过程只改变氨基酸的种类，不能增加氨基酸的数量【答案】c【解析】本题考查的是微生物发酵的有关内容。谷氨酸在人体细胞内的最终代谢产物有co2、h2o和尿素，它们均是通过自由扩散的方式进入血液，该过程不需要消耗能量，a错；谷氨酸在微生物细胞内大量积累的时期是稳定期，谷氨酸属于它的初级代谢产物，b错；赖氨酸属于必需氨基酸，只能从食物中获得，不能在体内转化形成，d错。c正确。故本题选c。5下列叙述中正确的是（ ）a快速繁殖抗虫棉最好的技术方法是花药组织培养b谷氨酸发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸或琥珀酸c只有改变微生物遗传特性才能改变微生物的代谢活动d利用发酵工程生产谷氨酸，在扩大培养阶段，培养基的碳氮比为3:1【答案】b【解析】6用培养液培养三种细菌，让它们在三支不同的试管中生长，如图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是表中的选项号试管号试管号试管a加快减慢不变b减慢加快加快c加快减慢减慢d减慢加快减慢【答案】b【解析】试题分析：据图分析可知，第种细菌处于试管底部，属于厌氧细菌，第种细菌与培养液相融合，属于兼性细菌，第种细菌处于培养液上部与空气相通，属于好氧细菌。若此时通入氧气，试管的细菌只进行无氧呼吸，有氧气时无氧呼吸受抑制，细菌繁殖速度减慢；试管中的细菌既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，通入氧气后无氧呼吸转化为有氧呼吸，有氧呼吸加快，细菌的繁殖速度加快；试管中的细菌进行有氧呼吸，通入氧气后有氧呼吸加快，细菌繁殖速度加快。因此，b项正确，a、c、d项错误。考点：细胞呼吸的类型7关于青霉素生产的叙述，正确的是a用紫外线、激光、化学诱变剂处理青霉菌再经筛选的方法可选育高产菌种b青霉素是青霉菌生长代谢中重要的初级代谢产物 c发酵罐接种后必须进行灭菌处理d在青霉菌生长的稳定期，活菌数不再增加，青霉菌产量下降【答案】a【解析】试题分析：可以用物理、化学等诱导因素诱导青霉菌产生基因突变，再经筛选的方法可选育高产菌种，a正确；青霉素是次级代谢产物，b错误；发酵罐接种后不能灭菌，灭菌会把菌种杀死，c错误；稳定期，细胞内大量积累代谢产物，特别是次级代谢产物，d错误。考点：本题考查了微生物的代谢和培养的相关知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。8下列有关硝化细菌和固氮菌的叙述中，正确的是a调控硝化细菌氧化氨的基因在质粒上b圆褐固氮菌合成的生长素属于初级代谢产物c硝化细菌和根瘤菌都是需氧型生物d豆科植物中共生固氮菌大量增殖直接形成根瘤【答案】c 【解析】调控硝化细菌氧化氨的基因位于拟核；圆褐固氮菌合成的生长素属于次级代谢产物；硝化细菌是需氧型生物，而根瘤菌生活在豆科植物根部，是厌氧型生物；豆科植物中共生固氮菌大量增殖，刺激豆科植物根部薄壁细胞分裂，形成根瘤。9稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中,取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术?（ ）a灭菌、灭菌 b消毒、消毒c灭菌、消毒 d消毒、灭菌【答案】d【解析】在稀释涂布平板法中，将涂布器保存在体积分数为70%的酒精中的目的是为了消毒；涂布器灭菌时，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却810s再用，目的是为了灭菌，故选d。【考点定位】消毒与灭菌【名师点睛】常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，目的是让聚集在一起的微生物分散成单个细胞，然后得到由这个细胞繁殖而来的肉眼可见的单个群落。稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。10关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（ ）a. 在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液b. 在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养zxxkc. 检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功d. 检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带）【答案】a【解析】在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液，a正确；在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基放在恒温箱中培养一段时间，b错误；在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，这是对分离的菌种作进一步鉴定的步骤，c错误；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的扩散速度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带），d错误。考点：本题考查生物技术的相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。11下图是某种微生物体内合成氨基酸的途径。在发酵工程中利用该种微生物来生产大量氨基酸甲，可以采取的措施是（ ）a增加酶浓度b在高温高压下发酵c对该种微生物进行诱变选育出不能合成酶的菌种d对该种微生物进行诱变，选育出不能合成酶的菌种【答案】d【解析】12培养自养生物和培养异养生物在培养过程中的主要区别是（）a. 培养过程是否需要氧气 b. 培养基中碳源不同c. 培养基中氮源不同 d. 培养基中无机盐不同【答案】b【解析】自养微生物可以把无机物合成为有机物，在培养过程中不需要添加有机碳化合物，异养微生物需要利用现成的有机物，在培养过程中需要添加有机碳化合物。13如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为（）a. 2 b. 4 c. 5 d. 6【答案】d【解析】在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序（12345），一共划了5次线，所以整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为6次，故选d。【点睛】本题的知识点是平板划线操作划线前后的灭菌及目的，平板划线法接种的结果预期，主要考查学生对平板划线法的掌握程度。14在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酣红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂将变成 a红色 b蓝色 c黑色 d棕色【答案】a【解析】试题分析：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则ph升高，说明该种细菌能分解尿素；选a。考点：鉴定分解尿素的细菌的实验15选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，通过缺氮培养基、含青霉素培养基、含氨的无机培养基，可从土壤中分离出的微生物依次是（ ）a硝化细菌、放线菌、根瘤菌 b根瘤菌、青霉菌、圆褐固氮菌来源:学&科&网c圆褐固氮菌、放线菌、硝化细菌 d圆褐固氮菌、酵母菌、硝化细菌【答案】d【解析】本题考查的是选择培养基的作用。缺氮培养基可从土壤中分离出能自行固定氮的圆褐固氮菌，含青霉素培养基可从土壤中分离出非细菌的酵母菌，含氨的无机培养基可从土壤中分离出硝化细菌。d正确。故本题选d。二、非选择题16由南京农业大学的李顺鹏教授领导的团队经过多年研究，首创了农药残留微生物降解技术，其原理是通过筛选高效农药残留降解菌株，来清除土壤、水体、农产品中的有机污染物，解决了物理、化学处理修复难度大，成本高及二次污染的问题，其中有机磷降解菌专一降解甲基对硫磷(一种含氮有机农药)，并依赖降解产物生存，且降解效果达100%，目前使用该项技术生产的无公害大米经中国绿色食品测试中心检测，无农药残留达到出口标准，获得绿色食品证书。下图是研究人员筛选有机磷降解菌的主要步骤，请分析回答问题：(1)培养过程中需振荡培养，由此推测该“目的菌”的细胞进行的细胞呼吸方式为 型。在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为氮源的固体培养基上。(2)对培养基选用的灭菌方法一般是 。(3)筛选出的纯净的有机磷降解菌菌种，需要长期保存，最好采用 的方法。(4)如果该种细菌在蛋白质合成过程中，携带天冬氨酸rna为cug，则转录成该天冬氨酸密码子的基因的碱基组成为 。(5)研究人员在筛选有机磷降解菌时，发酵液不慎发生污染，菌群几乎全部死亡，但却侥幸的从中获得了少数可抵抗污染的新菌种，细菌这种新性状的产生来自于 。(6)为了得到单个菌落，比较简便的接种方法是 ，但该方法不宜对菌落计数，而利于对菌落计数的方法是 。【答案】(1)有氧呼吸 甲基对硫磷(2)高压蒸汽灭菌(3)甘油管藏(4)(5)基因突变(6)平板划线法 稀释涂布平板法【解析】试题分析：(1)由培养过程中需振荡培养，推测该“目的菌”为需氧型。选择培养时，应将土壤样品稀释液接种于以甲基对硫磷为氮源的固体培养基上。(2)对培养基选用的灭菌方法一般是高压蒸汽灭菌法。(3)菌种的长期保存，最好采用甘油管藏的方法。(4)天冬氨酸rna为cug，对应的基因的模板链的碱基组成为gac，则转录成该天冬氨酸密码子的基因片段的碱基组成为。(5)研究人员在筛选有机磷降解菌时，发酵液不慎发生污染，菌群几乎全部死亡，但却侥幸的从中获得了少数可抵抗污染的新菌种，细菌这种新性状的产生来自于基因突变。(6)分离纯化微生物，得到单个菌落，比较简便的接种方法是平板划线法，对菌落计数的方法是稀释涂布平板法。考点：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。17（14分）下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：（1）完成图1中的实验流程。（2）冲洗的主要目的是_，冲洗应特别注意不能_，以防止菌种的流失。（3）图2装置中的充气口在_时关闭，在_时连接充气泵，并不断向内泵入空气。（4）排气口在果酒发酵时排出的气体是_，为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？_。（5）在用玻璃瓶发酵生产时，必须对玻璃瓶用 进行消毒，然后在玻璃瓶中加入葡萄汁，加入的葡萄汁不应超过玻璃瓶体积的 。（6）若在果汁中混含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。_（7）右下图所示为醋酸发酵过程中，酒精和醋酸的含量变化的示意图，请写出醋酸菌利用酒精产生醋酸的反应式_，若增加酒精浓度是否可以提高醋酸的产量?为什么? _。【答案】（1）醋酸发酵 （2）洗去浮尘 反复冲洗 （3）果酒发酵 果醋发酵 （4）二氧化碳 防止空气中微生物的污染 （5）70%的酒精溶液 2/3 （6）不能。因为果酒发酵时缺氧能抑制醋酸菌的生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足 （7） c2h5oh+o2 ch3cooh +h20+能量 不能，酒精浓度过高会杀死醋酸菌【解析】18自然界中有许许多多的微生物，若能进行合理的筛选、培养和运用，则这些微生物能给人类带来一定的经济效益。回答下列相关问题：（1）实验室中培养微生物要用到培养基。在液体培养基中加入常用凝固剂_后，制成_培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。下表是1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的菅养配方；其中分别表示_。培养基组成成分提供的主要营养牛肉膏(5g)碳源、氮源、磷酸盐和蛋白胨（10g)碳源、和维生素nac1(5g)h2o(定容至1000ml)氢元素、氧元素（2）实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是_。（3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板