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2 2 2动物细胞融合与单克隆抗体 1 举例说出动物细胞融合技术的原理和应用 2 举例说出单克隆抗体技术的原理和应用 一 二 一 动物细胞融合1 概念动物细胞融合也称细胞杂交 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞 称为杂交细胞 2 动物细胞融合的基本原理和方法 1 原理 细胞膜的流动性 2 方法 与植物原生质体融合的方法类似 常用的诱导因素有聚乙二醇 灭活的病毒 电激等 3 意义 1 突破了有性杂交方法的局限 使远缘杂交成为可能 2 为制备单克隆抗体开辟了新途径 一 二 二 单克隆抗体1 原理每一个b淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 b淋巴细胞在体外不能无限增殖 而肿瘤细胞具有无限增殖的特点 将单个b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 可以使杂交细胞具有两个亲本的遗传特性 既能无限增殖又能产生单一抗体 一 二 2 单克隆抗体的制备 1 过程 2 杂交瘤细胞的特点 既能迅速大量繁殖 又能产生专一的抗体 3 单克隆抗体的特点 特异性强 灵敏度高 产量大 一 二 3 单克隆抗体的应用 1 作为诊断试剂 能准确识别各种抗原物质的细微差异 并与一定抗原发生特异性结合 2 用于治疗疾病和运载药物 制成 生物导弹 在单克隆抗体制备过程中 为什么要对小鼠注射抗原 提示 以获得能产生相应抗体的b淋巴细胞 浆细胞 一 二 三 四 一 植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别 一 二 三 四 二 受精作用与动物细胞融合的区别1 受精作用是在同种生物之间进行的 精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂 就能形成受精卵 受精卵内具有同种生物的两个亲本的遗传物质 2 动物细胞融合是在同种或不同物种间进行的细胞融合 自然条件下不能融合成杂交细胞 必须在诱导剂作用下才能融合 形成的杂交细胞具有两个亲本细胞的遗传物质 从而体现两个亲本的遗传特性 一 二 三 四 三 制备单克隆抗体时 选用b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原因哺乳动物感染抗原后 其体内会形成相应的b淋巴细胞 b淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原 动物在免疫反应的过程中 每一个b淋巴细胞能分泌一种特异性抗体 要想获得大量的特异性抗体 必须使能分泌该单一抗体的b淋巴细胞大量增殖 b淋巴细胞具有产生单一抗体的能力 但不能在体外培养条件下无限增殖 骨髓瘤细胞是一种癌细胞 它能在体外培养条件下无限增殖 但不能产生抗体 因此 把一种b淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合 产生杂交瘤细胞 它会兼有两个亲本细胞的特性 在体外培养条件下能不断增殖 同时能产生出某种特异性的抗体 一 二 三 四 四 动物细胞融合 单克隆抗体制备与动物细胞培养的区别与联系动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 也叫细胞杂交 杂交细胞是具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞 杂交细胞的形成需要人工诱导 常用的诱导因素有聚乙二醇 peg 灭活的病毒 电激等 融合的细胞要繁殖就要进行动物细胞的培养 通过动物细胞的培养 杂交细胞表现出两个或多个亲本的特点 单克隆抗体的制备 首先应获得杂交瘤细胞 其过程是用已免疫的b淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交获得多种杂交细胞 然后用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞 杂交瘤细胞要发挥其繁殖快 产生特异性抗体的优点 应通过动物细胞培养才能实现 所以无论是动物细胞融合还是单克隆抗体的制备 都是以动物细胞培养为基础的 题型一 题型二 题型一动物细胞融合技术 例1 下列关于动物细胞融合的说法 不正确的是 a 动物细胞融合也称细胞杂交 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程b 动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞c 常用于诱导动物细胞融合的手段有 聚乙二醇 灭活的病毒 电激 紫外线照射d 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限 使远缘杂交成为可能解析 紫外线照射不能诱导动物细胞融合 物理诱导方法还有离心 振动等 答案 c 题型一 题型二 题型二单克隆抗体的制备 例2 下图是单克隆抗体制备流程示意图 结合图示完成下列问题 题型一 题型二 1 技术是单克隆抗体技术的基础 2 在图中hat培养基上 未融合的和融合的都会死亡 只有融合的杂种细胞才能生长 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外 还可以采用作为诱导因素 3 单克隆抗体与常规的血清抗体相比 最主要的优点是 4 选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速的特点 又具备淋巴细胞的的特点 经过选择性培养的杂交瘤细胞 还需进行和 经多次筛选 就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞 最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养 或在小鼠腹腔内增殖 从或中 就可以提取出大量的单克隆抗体了 5 淋巴细胞是由动物体中的细胞分化 发育而来的 题型一 题型二 解析 动物细胞融合技术最主要的应用就是制备单克隆抗体 动物细胞融合和植物体细胞杂交的不同点之一在于动物细胞融合可以使用灭活的病毒进行诱导 灭活是指使病毒失去感染能
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