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浙大微生物99年研究生入学试卷 一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”）自然界存在的个体最大的微生物属于真菌界。大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物。因为碱性染料能与细胞中带正电的组成成分结合，所以，常将其用于细菌染色。在碳源和氮源充足的条件下，PHB生产菌的细胞内会有大量的乙酰辅酶A缩合形成PHB。因为细菌个体没有性的分化，所以，只能进行无性繁殖。而大多数酵母菌细胞有性的分化，所以，可以进行有性繁殖。 根据细胞壁中肽聚糖层的厚薄，可利用革兰氏染色法将细菌分成二大类。但是，放线菌细胞壁中不含肽聚糖，所以，无法采用革兰氏染色法将其分类。一般认为与细菌所有性状相关的遗传信息都储存在细菌染色体上。细菌进行细胞呼吸的主要部位是在线粒体内膜形成的嵴上。 一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶（SOD）。一般认为各种抗性突变是通过适应而发生的，即由其所处的环境诱发出来的。二 填充题（20分）整个肽聚糖合成过程的步骤很多，反应的部位分别发生在细胞的a、b和c ，因而可分成三阶段。青霉素对细菌的抑制作用发生在d阶段。染色体内畸变包括a、b、c和d四种类型。 以单链DNA为遗传物质的微生物有_ a_ 等；以单链RNA为遗传物质的微生物有_ b_ 等。细菌产生抗药性的三条途径分别是a、b和c。目前，可在基因工程中担当外来基因载体的只能是微生物或其某一组分，它们主要有a和b等。噬菌体的繁殖一般可分为五个阶段，即a、b、c、d和e。 获得细菌同步生长的方法主要a和b两类。单细胞微生物间歇发酵的典型生长曲线可分为a、b、c和d等四个时期。微生物的六大营养要素分别是a、b、c、d、e和f。最常用的固体培养基的凝固剂是a 。三 简述下列概念的区别（40分）：1 类病毒与病毒 2 蜗牛酶与溶菌酶3 包含体与伴孢晶体4 菌丝体与子实体5 协同反馈抑制与合作反馈抑制 6 定向培育与诱变育种7 真核生物和原核生物8 光复活作用与暗修复9 野生型与营养缺陷型 10 有性杂交与准性杂交四 问答题（30分）以EMB（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。某突变菌株在基本培养基上无法生长，而在添加了0.1%碱水解酵母核酸后，该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。连续培养和连续发酵有何优点？但为什么连续的时间总是有限的？在微生物培养过程中，引起pH改变的原因有哪些？在实践中如何保证微生物处于较稳定和合适的pH环境中？99年答案一 是非题 1 对2 错3 错4 错5 错6 错7 错8 错9 对10 错二 填充题1a 细胞质中；1b细胞膜中；1c细胞膜外；1d第三2a重复； 2b易位或倒位； 2c缺失； 2 d插入3aF X174，M13,fd,f1,细小DNA病毒等； 3b细小RNA病毒（脊髓灰质炎病毒，口蹄疫病毒）弹状病毒（狂犬病病毒）劳氏肉瘤病毒，烟草花叶病毒，MS2,f2R,17等。4a即基因突变; 4b抗药性质粒(R因子）的转移; 4c生理上的适应。5a 细菌质粒； 5b噬菌体。6a吸附;6b侵入; 6c增殖（复制与生物合成）; 6d成熟（装配）; 6f裂解（释放）。7a诱导法 7b筛选法8a 延迟期； 8b对数期； 8c稳定期； 8d衰亡期。9a碳源; 9b氮源; 9c能源; 9d生长因子; 9e无机盐; 9f水.10a琼脂三 简述下列概念的区别类病毒是当今所知道的最小、只含有RNA一种成分、专性细胞内寄生的分子生物。病毒也是一类超显微的非细胞生物。病毒比前者大，同时含有核酸和蛋白质等，一般不能通过种子传播。蜗牛酶是玛瑙螺胃液制成的，内含纤维素酶、甘露聚糖酶、葡糖酸酶、几丁质酶和脂酶等，它对酵母等真菌的细胞壁有良好的消化作用。而溶菌酶广泛存在于卵清、人的眼泪和鼻涕、部分细菌和噬菌体内的一种酶，它能有效地水解细菌的肽聚糖，从而消化细菌的细胞壁。包含体是某些感染了病毒的宿主细胞内出现的光学显微镜下可见，形态和数量不等的小体。而伴孢晶体是某些芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，在芽孢旁形成的一颗菱形或双锥形的碱溶性的蛋白晶体。两者都能作为生物农药。菌丝体是丝状微生物相互缠绕、交织形成的结构。子实体是由气生菌丝体特化形成的，有一定形态的结构，在其里面或上面可产生孢子。协同反馈抑制指分支代谢途径中的几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径的第一酶的反馈调节方式。而合作反馈抑制是指两种末端代谢产物同时存在时，可以起到比一种末端产物大得多的抑制作用。定向培育是用某一特定的因素长期处理某微生物群体，同时不断地对它进行移种传代，以达到累积并选择相应自发突变株的目的。而诱变是指利用物理或化学诱变剂处理微生物群体，促进其突变率，从中挑选少数符合要求的突变株的育种方法。真核生物是指其细胞具有细胞核，有核膜、核仁，有多条染色体，细胞质中有线粒体、高尔基体、内质网等细胞器，核糖体为80S；原核生物指其细胞没有真正意义的核，没有核膜、核仁，只有一条裸露的DNA，没有线粒体、高尔基体、内质网等细胞器，核糖体为70S。把经紫外线照射后的微生物立即放在可见光下，可明显降低其死亡率的现象称光复活作用。经紫外线照射形成的胸腺嘧啶二聚体在黑暗下会被以种光复活酶结合，当这复合物暴露在可见光下，此酶会因获得能量而产生解离作用，将二聚体从新分解成单体。在活细胞中，还存在一种修复被紫外线等诱变剂损伤的DNA的机制。该修复作用与光无关。它涉及四种酶的参与。野生型是从自然界分离到的任何微生物在其发生营养缺陷突变前的原始菌株。它能在相应的基本培养基上生长；营养缺陷型是野生型经诱变处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变形成的菌株。它只能在加入该酶合成产物的培养基中生长。有性杂交指性细胞间的接合和随之发生的染色体重组，并产生新遗传型后代的一种育种方法；准性杂交类似于有性杂交，但比它更原始。它可使同种生物两个不同菌株的体细胞发生融合，且不以减数分裂的方式而导致低频率的基因重组并产生重组子。四 问答题1. 鉴别性培养基是在培养基中加入能与某菌的五色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能将其与其他外形相似的菌落区分。EMB培养基中大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+,故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，使菌落呈深紫色。从菌落表面反光还可看到绿色金属闪光。而产酸弱的菌株的菌落呈棕色。不发酵乳酸的菌落无色透明。2. 首先，它是核酸营养缺陷型。可采用生长谱法，分别配制缺A、G、C、T和U其中一物的混合液，添加到该菌的基本培养基中，将该菌株分别接入到不同的培养基中，即可判断是哪种或哪几种核苷酸缺陷型。3. 微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率。可简化装料、灭菌、出料和清洗发酵罐等单元操作，从而减少了非生产时间和提高设备利用率；便于自控。产品质量稳定。节约大量的人力、动力、水和蒸汽，且使水、汽、电的负荷均匀合理。恒浊法中的微生物以最高速度生长，生产中可获得大量菌体或与菌体生长相平行的代谢产物。恒化法可用于与生长速率相关的各种理论的研究。其缺点主要使菌种易退化，其次是易染菌，且染菌的危害会较大。这也是连续时间总是有限的根本原因。4. 微生物的生命活动会引起环境pH 改变。它们将糖类发酵形成有机酸，将脂肪水解成有机酸，选择性吸收无机盐的正电部分，则会引起培养基pH下降；而蛋白质的脱羧反应形成胺类，选择性吸收无机盐的酸根，都会引起pH上升。治标的方法是通过加酸或碱进行中和反应。治本的方法有，过酸时，加适量的氮源，提高发酵的通气量；过碱时，适当增加碳源，降低通气量。98年研究生入学试卷 一. 是非题（共10分。只需注明“对”或“错”）大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。初生F菌株和次生F菌株都属于部分二倍体。分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。渗透酶( permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则会出现TMV型病灶。若在感染前，用TMV抗体处理，则会钝化病毒，不出现TMV型病灶。霉菌的基因重组常发生于准性生殖时，较少出现在有性生殖过程中。营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。 二 填充题（30分）1 突变率10-10表示_ _ _ _ a_ _ _ 。2 我们常采用_ _ a_ _ _ 浓度的NaCl 或0.1M_ _ _ b_ _ _ 来稀释菌液或清洗菌体细胞。因为_ _ c_ _ _ 。3 在有机物为基质的生物氧化反应中，以氧为电子传递最终受体的方式称_ _ _ _ a_ _ _ _ ；以无机氧化物为最终电子受体的称_ _ b_ _ ；以有机物为最终电子受体的称_ _ _ _ c_ _ _ _ 。 4 常见的菌种保藏方法有_ _ _ _ a_ _ _ _ 、_ _ _ b_ _ _ 和_ _ _ c_ _ _ 等，其中_ _ _ d_ _ 方法保藏菌种的时间最长久。5 对细菌简单染色法的一般步骤是_ _ _ a_ _ _ 。常用的染料有_ _ b_ _ 和_ _ c_ _ _ 等。 6 在混合菌样中获得纯菌株的方法主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ b_ _ 等。 7 在微生物培养过程中，引起培养基pH值改变的原因主要有_ _ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 等。 8 实验室常用的有机氮源有_ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 等，无机氮源有_ _ c_ _ _ 和_ _ _ d_ _ 等。为节约成本，工厂中常用_ _ _ e_ _ _ _ 等做有机氮源。 9 霉菌细胞壁化学组成是 a ；酵母菌细胞壁化学组成是 b 和 c 等；细菌细胞壁化学组成主要是 d ； 10 在微生物学奠基时代（生理学期）公认的代表人物为_ _ _ a_ _ _ 和_ _ _ b_ _ _ 。前者的主要业绩有_ _ c_ _ 等，后者的主要业绩有_ _ _ d_ _ _ 等。 三 简述下列概念的区别（15分）：fed-batch culture ;continuous culture colony ;cloningcomplete medium ;minimal medium species ;strainCOD ; BOD四 问答题（30分）将色氨酸（T）营养缺陷型菌株与组氨酸（H）营养缺陷型菌株进行遗传重组后，在基本培养基上长出的菌落数8个，而在含T的基本培养基上能长出72个菌落，在含H的基本培养基上能长出68个菌落。如果互补的重组类型数相等，试计算T与H间的重组频率。为什么有些突变菌株对末端代谢产物的结构类似物具有抗性？试举例说明这些菌株对工业菌种选育的重要性。何谓分解代谢物阻遏？在含乳糖和葡萄糖的培养基中，E.coli生长周期中会出现什么现象？请从操纵子模型来解释这现象。用图示法表示酿酒酵母的生活史。五 推导题（15分）在细胞的指数增长阶段细胞的传代时间tg可由下式计算：式中：t为时间，xt为t时刻的细胞数，x0为初始细胞数98答案一 是非题：每题1分 1 对2 错3 对4 错5 错6 错7 错8 错9 错10 错二 填充题（30分）1a: 1010个细胞分裂成21010个细胞时，平均发生1次突变。2 a：0.85%; 2b: 磷酸盐； 3c：与细胞等渗，防止细胞损伤。3a：有氧呼吸； 3b：无氧呼吸； 3c：发酵4 a：斜面冰箱保藏法 4b：冷冻干燥保藏法 4c：石蜡油封藏法 4d：冷冻干燥保藏法5a：涂片、干燥、固定、染色、水洗、（镜检） 5b：美蓝； 5c：结晶紫。6a：稀释涂布平板法； 6b：划线平板法。7a：F X174； 7b：烟草花叶病毒。8a：蛋白胨； 8b：牛肉膏； 8c：(NH4)2SO4； 8d：Na2NO3; 8e：豆饼粉9a:几丁质 9b：甘露聚糖； 9c：葡聚糖； 9d：肽聚糖10a：巴斯德； 10b：柯赫； 10c：巴斯德消毒法； 10d：微生物纯培养法三 简述下列概念的区别：（每题5分）连续培养是按特定的控制方式以一定的速度加入新鲜培养基和放出培养物的培养方法。其中微生物的生长速度稳定；补料分批培养是一种介于分批培养和连续培养之间的培养方式。它是在分批培养的过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。其中微生物的生长速度并不一定稳定。菌落指单个细胞在有限空间中发展成肉眼可见的细胞堆。cloning指从同一祖先产生同一DNA（目的基因）分子群体或细胞群体的过程。或指将外源基因引入到宿主菌体内，并使其大量扩增的过程。完全培养基是能满足一切营养缺陷型菌株营养要求的培养基。是天然或半合成的培养基。基本培养基仅能满足某野生型菌株生长需要的最低成分培养基。是由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其后代。一种菌的每一不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。所以，属于同一菌种的菌株是无数的。菌种是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其相近、与同属内其实种有明显差异的菌株的总称。化学耗氧量反映有机物进入水体后，在一般情况下氧化分解所需的氧量。反映水体总的污染程度。生物耗氧量水体中有机物经生物氧化至简单终产物是所需的氧量。反映水中有机物含量的间接指标。COD数值一般高于BOD。四 问答题（30 分）28/（68+72）=11.4%解除了末端代谢产物反馈抑制或和阻遏。A调节亚基发生变异。B操纵子的控制基因发生变异，产生的调节蛋白对类似物不敏感。 结构类似物会与调节酶的调节亚基或和阻遏酶的原阻遏物结合，从而发生反馈抑制或和阻遏。结构类似物不能参与正常代谢，所以会使未突变细胞饥饿而死。而解除了反馈调节的菌株对结构类似物就具有“抗性”。以此为筛子可筛选到大量积累末端代谢产物的菌株。分解代谢物阻遏指细胞内同时存在两种分解底物时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶的合成的现象。会出现二次生长现象。 浙江大学工业微生物92-971992年攻读硕士学位研究生入学考试试题一 填空（共15分）细菌一般进行 a 繁殖，即 b 。酵母的繁殖方式分为有性和无性两类，无性繁殖又可分为 c ， d 两种形式，有性繁殖时形成 e ；霉菌在有性繁殖中产生的有性孢子种类有 f ， g ， h ；在无性繁殖中产生的无性孢子种类有 i ， j ， k ；放线菌以 l 方式繁殖，主要形成 m ，也可以通过 n 繁殖。一摩尔葡萄糖通过EMP途径和TCA循环彻底氧化，在原核微生物中产生 a 摩尔ATP，在真核微生物中产生 b 摩尔ATP，这是因为在真核微生物中， c 不能通过线粒体膜，只能借助于 d 将EMP途径产生的磷酸二羟丙酮还原成 e ，后者可进入线粒体，将氢转移给 f ，形成 g ，自身又回复到磷酸二羟丙酮。这一过程称为“穿梭”，每次穿梭实际损失 h 个ATP。微生物基因突变的机制包括 a 、 b 及 c 。诱发突变的方法分为物理方法和化学方法，物理方法主要是 d ， e ， f 和 g ；化学诱变剂包括 h ， i 和 j 。二 是非题（叙述正确的在括号写T，错误的写F，共10分）自养型、专性厌氧型微生物不是真菌（ ）在酵母细胞融合时，用溶菌酶破壁（ ）从形态上看，毛霉属细菌都有假根（ ）营养缺陷型菌株不能在基本培养基上正常生长（ ）产黄青霉在工业生产上只用于生产青霉素（ ）分子氧对专性厌氧微生物的抑制和制死作用是因为这些微生物内缺乏过氧化氢酶（ ）同工酶是指能催化同一个反应，有相同控制特征的一组酶（ ）基因位移是借助于酶或定向酶系统实现的主动输送，因此不需要消耗能量（ ）培养基中加入一定量NaCl的作用是降低渗透压（ ）噬菌体的RNA必须利用寄主的蛋白质合成体系翻译，因此只能在寄主体内繁殖（ ）三. 名词解释（共15分）抗代谢物温和噬菌体阻遏酶转化活性污泥四 在恒化器中培养微生物，在稳态操作时，=D，D为稀释率，可用Monod公式描述：求：a. 恒化器出口底物浓度S0和微生物浓度X0b. 当稀释率D增加到一定程度后会产生“清洗”现象，求发生清洗现象的最小稀释率Dcritc. 单位体积细胞产率可以用细胞出口浓度X0与稀释率的乘积DX0表示。求当DX0达到最大值时的稀释率Dmax五. 简要叙述工业微生物研究和实验中的微生物培养基必须具备的要素和对于大规模生产时对培养基的基本要求。（15分）六. 以肌苷酸生产菌为例，说明营养缺陷型菌株筛选的机理及筛选的方法。（15分）七. 试述革兰氏阳性菌和阴性菌在细胞壁组成上的差别，并判断下述几种微生物的染色结果是什么。a. 枯草芽孢杆菌 b. 金黄葡萄球菌 c. 大肠杆菌 d. 乳链球菌 e.假单孢菌1993年攻读硕士学位研究生入学考试试题一 填空（共15分，每格0.5分）连续培养的一个重要特征是使微生物的 a 和 b 处于某种稳定状态。连续培养的方法可分为两类，即 c 法，和 d 法。放线菌是一种 a 生物，以 b 繁殖，是生产 c 的主要微生物。赖氨酸生产菌常用 a 缺陷、 b 缺陷；苏氨酸生产菌常用 c 缺陷、 d 缺陷菌株。在好氧污水处理中，有机物氧化时氧是最终的 a ，生物氧化的结果是产生 b ，新细胞利用这种 c 进行合成。细胞膜位于细胞壁 a ，具有从培养基中 b ，防止 c 中低分子量化合物的泄漏及排泄 d 的作用，所以它是一层 e 。纯种分离的方法常用的有三种，即 a ， b 和 c 。只有 a 和 b 中发现有专性厌氧菌。以细菌中，专性厌氧菌属于 c 菌属、 d 菌属等。基因重组也称 a ，即指 b 从一个细胞向另一个细胞 c ，达到基因改变的目的的过程。遗传物质成分和结构的改变，可以由基因的 d 引起，也可以由基因重组引起。二 选择题（共10分）噬菌体是一种感染 A 的病毒，缺乏 B 。Aa. 酵母 b. 霉菌 c. 放线菌 d. 担子菌Ba. 增殖能力 b. 独立代谢的酶体系 c. 核酸 d. 蛋白质微生物分批培养时，在延迟期 a. 微生物的代谢机能非常不活跃 b. 菌体体积增大 c. 菌体体积不变 d. 菌体体积减小3发酵作用是 的生物氧化作用a. 氧气参与下 b. 无机氧化物参与下 c. 有外源电子最终受体 d. 无外源电子最终受体原核生物 。a. 有细胞核 b. 有有丝分裂 c. 有线粒体 d. 有细胞壁营养缺陷型菌株是指 的菌株a. 有营养不良症的菌株 b. 在完全培养基上也不能生长良好的菌株c. 培养基中营养成分缺少时获得的菌株 d. 丧失了合成某种营养成分能力的菌株营养物质的促进扩散 a. 需要消耗代谢能 b. 服从Fick扩散定律 c. 当胞内浓度高于胞外浓度时能进行 d. 当胞内浓度低于胞外浓度时能进行细胞内部的pH值 。a. 与外部环境的pH值相同 b. 近酸性 c. 近碱性 d. 近中性一摩尔葡萄糖径EMP途径-TCA循环完全氧化，可以产生 摩尔ATPa. 34 b. 37 c. 38 d. 39在低能荷下， 被激活a. 异柠檬酸脱氢酶 b. 丙酮酸羧化酶 c. 乙酰辅酶A羧化酶 d. 天门冬酸激酶三. 名词解释（共20分，每题5分）双倍体选择性培养基自由组合定律COD四 问答题（共40分，每题10分）生长氨基酸的高产菌株保藏有什么特殊要求？为什么？微生物的能量代谢是怎样实现的？与化学反应相比有什么特点？有四种细菌，分别属于假单孢菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌。由于保存菌种时标签失落，需要重新鉴别，简要叙述这四种细菌的判别方法。在分批培养中产物生成有哪几种类型？这些类型各有什么特点？五 证明题（15分）当考虑微生物增长时用于维持能的底物消耗时，在细胞的表观得率系数Yx/s与真实得率系数Yx/s之间存在着如下关系：式中，为比增长速率，X为细胞浓度，m为细胞运转维持常数。证明：对于稳定状态下的恒化器操作，当加料为灭菌培养基时，在细胞浓度X与底物浓度S之间存在着如下的关系：式中，D为稀释度，S0为加料中底物浓度。若实验中已经获得了一组不同稀释率D下的表观得率系数Yx/s的数据，怎样用作图法求得真实得率系数Yx/s和细胞维持常数m?1994年攻读硕士学位研究生入学考试试题一 填空（共15分，每格0.5分）微生物通过HMP途径，把葡萄糖降解成丙酮酸可以产生合成 a 和 b 的前体及用于生物合成的还原剂 c 。芽孢是某些细菌在生活史的一定阶段形成的没有 a 活性的休眠体，对 b ， c 和 d 具有抗性。霉菌的繁殖方式有两种，即为 a 和 b ，而细菌则以 c 为主要方式。消毒和灭菌的区别在于前者是杀死或除去 a ，而后者则指杀死 b 。工业上，用发酵法生产酒精的菌种是 a ，在整个代谢途径中，生成 b 个ATP。微生物生长和产物形成的关系通常可分为 a ， b 和 c 三种动力学形式。诱导酶指存在 a 或 b 时才能产生的酶，它是 c 水平上调节酶浓度的一种方式。操纵子是由 a ， b ， c 和 d 基因组成。紫外线照射能使DNA产生 a ，从而导致DNA复制产生错误；用紫外线诱变微生物应在 b 条件下进行，以防止 c 现象的产生。微生物在 a 上发生电子传递而实现磷酸化作用称为 b ，通过这种作用把释放的能量转移至 c 。二 是非题（共10分，每题1分，如正确写T，错误写F）细菌的芽孢和营养细胞中存在DPA（ ）藻状菌的菌丝是典型的无隔多核菌丝，而子囊菌的菌丝则是多隔多核细胞（ ）在细菌的糖代谢过程中，可以同时存在EMP和HMP途径（ ）受体细胞实现DNA的转化，必须先出现感受态（ ）菌种退化主要由培养或菌种保藏条件引起的（ ）同功酶是行使同一功能、结构不同的一组酶（ ）5-溴尿嘧啶是以碱基颠换的方式引起基因突变（ ）微生物生长量的大小取决于限制性底物的浓度（ ）原噬菌体是整合在寄主DNA上的DNA片段落，不能进行繁殖、传代（ ）发酵的作用是厌氧微生物取得能量的唯一方式（ ）三. 名词解释（共20分，每题4分）溶源性细胞巴斯德效应准性生殖辅阻遏物化能有机异养型四 问答题（共40分，每题8分）试述细菌革兰氏染色的原理和结果。微生物生长需要哪些基本条件？微生物菌种保藏的原理是什么，基于这些原理菌种保藏可分为哪些方法？什么叫分批操作和流加操作，各有什么特点？下列代谢途径中，要得到目的产物F的大量积累，在育种过程中需选择什么样的遗传标记？五 证明题（15分）在含有细胞再循环的连续培养中（如图），是再循环的体积流速比，C是浓度因子。假定微生物生长符合Monod方程，且Yx/s为常数。设X0=0，证明在稳态下：（3） 上述再循环反应器需在什么条件下进行操作？1995年攻读硕士学位研究生入学考试试题一 填空（共15分，每格0.5分）微生物从三羧酸循环中的 a 和 b 分别合成谷氨酸和天门冬氨酸，而丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸均是从 c 合成的。线毛常出现在革兰氏 a 菌上，性线毛仅 b 具有，它在接合时转移 c 。DNA由于含有 a ，故带有很高的负电荷，在原核生物细胞中，负电荷被 b 和 c 中和；在真核生物中，则被 d 所中和。放线菌革兰氏染色呈 a ，菌体分为 b 和 c 。产生抗生素最多的放线菌是 d 属，庆大霉素是 e 属产生的。在微生物蛋白中，研究最多的是 a 蛋白，其中以 b 菌和 c 菌最为常用。巴斯德效应的本质是 a ，通氧使细胞中ATP上升， b 酶受ATP负调节，导致 c 的累积，它和ATP对 d 酶产生负调节，引起 e 浓度上升，表现为呼吸抑制发酵。真核微生物的电子传递链存在于 a 和 b 上，原核生物的电子传递链存在于 c 上，电子传递链上最重要的电子传递体是 d 微生物能量代谢归根结蒂是 a 生成和利用问题，有氧呼吸作用以 b 作为最终电子受体，而发酵作用的最终电子转移给 c 。二 选择题（共20分）酵母菌的细胞壁主要含 。a. 肽聚糖和甘露聚糖 b. 葡聚糖和脂多糖 c. 几丁质和纤维素 d. 葡聚糖和甘露聚糖溶源菌遇到同一种噬菌体或与之密切相关的噬菌体时表现为 a. 抗性 b. 免疫性 c. 再次溶源化 d. 裂解3在简单主动输送的离子载体中， 是动态载体a. 缬霉素 b. 尼日利亚素 c. 短杆菌肽 d. 2,4 -二磷酸分批发酵动力学间于生长联动型和非生长联动型的发酵是 。 a. 乳酸发酵 b. 酒精发酵 c. 氨基酸发酵 d. 青霉素发酵霉菌中的 分别是具有假根和足细胞 a. 米根霉和桔青霉 b. 米根霉和黄曲霉 c. 高大毛霉和黑曲霉 d. 黑根霉和红曲霉对于青霉菌，每摩尔葡萄糖通EMP和TCA环彻底氧化化共产生 摩尔ATP a. 34 b. 36 c. 38 d. 39谷氨酸棒杆菌合成天冬氨酸族氨基酸时，天冬氨酸激酶受赖氨酸和苏氨酸的 抑制 a. 协同反馈 b. 累积反馈 c. 顺序反馈 d. 合作反馈当 ，会发生基因重组，并使F-菌株变化F+菌株 a. F-菌株和F+菌株接合 b. F-菌株和Hfr菌株接合c. F-菌株和F菌株接合 d. F-菌株和F-菌株接合在化学消毒剂中，通过凝固蛋白作用杀菌的是 a. 新洁尔灭 b. 乙醇 c. 甲醛 d. 拮抗阿拉伯乳杆菌和粪链球菌之间的关系是 现象 a. 中性同生 b. 竞争 c. 互惠同生 d. 拮抗三. 名词解释（共20分，每题4分）生长因素条件致死突变局限性转导有性生殖反馈阻遏四 问答题（共30分）怎样筛选一株苏氨酸缺陷、高丝氨酸缺陷的赖氨酸产生双缺菌株？（10分）现有四支斜面，分别是大肠杆菌、北京棒杆菌、假单胞菌、枯草芽孢杆菌，试鉴别确定。（8分）a. 图示并简述五种典型的分支代谢途径调节。（8分）b. 在发酵工业中，如何实现代谢的人工控制？简单阐述。（4分）五 推导题如图示，在一个体积为V的恒化器中，以流速F进行大肠杆菌连续培养，细胞生长动力学表述为其中：Ks -反应速率常数，Kd -死亡速率常数且菌体对底物得率系数为Yx/s，试求：达到稳定状态时，细胞浓度X和衡释率D的关系式现生产率P定义为P=DX，当D为何值时，P值达到最大。1996年攻读硕士学位研究生入学考试试题一 填空（共15分）放线菌以 a 繁殖，主要是形成 b ，也可以通过 c 繁殖。由 d 产生的抗生素占放线菌产生的抗生素的90%以上。生长因素包括 a 、 b 、 c 、嘧啶及其衍生物、 d 及其它膜成分。缺乏合成生长因素能力的微生物称为 a 微生物。酵母菌的繁殖分为 a 及 b 繁殖两大类。能产生 c 的酵母细胞必须是双倍体。噬菌体是一种感染 a 或 b 的病毒，主要化学成分是 c 和蛋白质，它在 d 内能大量迅速地繁殖，也能 e 存活。紫外线的波长范围为 a nm，多种微生物敏感的波长是 b nm。紫外线诱变的机理是使 c 的结构变化，其中起主要作用的是 d 的产生。BOD是指在 a 时每升废水在 b 天内能被微生物 c 的有机物 d 所消耗的 e 量。厌氧微生物通常缺乏把电子传递给 a 的终端 b ，在进行电子传递磷酸化时，不能以 c 作为 d 。二 选择题（共10分）组织分离法是纯种分离方法之一，适用于 。a. 细菌 b. 放线菌 c. 高等真菌 d. 酵母菌生长圈法可用于筛选 A 生产菌株的筛选，使用的工具菌是对应的 B 菌株A. a. 抗生素 b. 核酸 c. 有机酸 d. 乙醇B a. 营养缺陷型 b. 野生型 c. 基因重组 d. 原生质体融合3a. F-细胞之间彼此能杂交重组b. F-细胞必须与F+细胞杂交重组c. F因子是蛋白质分子d. F因子不能自我复制霉菌是一类形成菌丝体的 的俗称。a. 原核生物 b. 细菌 c. 放线菌 d. 真菌内质网膜是合成 的中心a. 核苷酸 b. DNA c. RNA d. 蛋白质Photoorganoheterotroph微生物是指 a. 光能为能源，CO2为碳源 b. 光能为能源，有机物为碳源c. 光能为能源，无机化合物为供氢体 d. 有机化合物为能源，有机化合物为碳源无氧呼吸作用 a. 生成的能量与有氧呼吸一样多 b. 不存在磷酸化作用c. 部分能量转移到最终电子受体中 d. 产生的ATP比有氧呼吸多真核微生物中， a. TCA环反应在胞质中进行，EMP途径在线粒体内进行b. TCA环反应在线粒体中进行，EMP途径在胞质中进行c. TCA环反应及EMP途径都在胞质中进行d. TCA环反应用EMP途径都在线粒体中进行原核生物代谢的主要调节部位为 a. 细胞膜、酶及酶与底物间隔状况 b. 细胞核、细胞膜及酶c. 细胞膜、酶及酶与底物的相对位置 d. 细胞器膜、细胞膜及酶三. 名词解释（共18分）等渗溶液诱导抑制剂法减数分裂恒化器革兰氏阴性菌拮抗现象四 问答题（共40分）在微生物育种时，出发菌株应该怎样进行选择？简单叙述原生质体融合的特点及操作步骤。根据你掌握的实验方法，在由葡萄球菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、北京棒杆菌及假单胞菌组成的混合菌悬浮中，将上述菌进行分离、鉴别。为了防治发酵系统受到噬菌体的污染，应该采取哪些措施。五 推导题流加培养是单细胞蛋白生产、抗生素生产中常用的培养方法，一般当细胞间歇培养在指数生长期后期时补充培养基。如图所示，若开始流加时反应器内细胞密度为X0，底物浓度为S0，细胞增长符合Monod动力学：底物消耗公式为：培养基中底物浓度为Si，流加速度为F，流加开始进反应器中培养液体积为V0.写出反应器中细胞密度X、底物浓度S及培养液体积V随时间改变的公式（）若流加速率F保持恒定，并设流加的底物被全部消耗，即dS/dt=0,求细胞密度X随时间的变化规律。1997年攻读硕士学位研究生入学考试试题一、填空（共20分，每格0.5