药敏实验.doc

。药敏实验检验原理：含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。样本要求:鉴定后的致病微生物纯菌落检验方法： 1、 菌液制备：挑选鉴定后的致病微生物纯菌落34个菌落置于灭菌0.9%氯化钠液中，制成均匀悬液。经与浊度管（0.5麦氏单位比浊管）比较，浊度一致。2、 接种平板：用灭菌的棉拭子蘸取制备好的接种菌液，在管壁上旋转挤压几次，去掉过多的菌液，再用试子涂布整个培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60，最后沿平皿周边绕两圈，用镊子压平。？每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。3、 孵育：贴好纸片后在15min内放到35孵箱，将平板倒置培养。平板孵育1618h后取出。4、 结果判定：培养后取出平板，测量抑菌环的直径，抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。【检测结果的解释】用毫米尺量取抑菌环直径，参照下表判读结果，按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报告。纸片法药敏试验抑菌环直径判断标准（非苛养菌）抗生素菌名纸片含药量抑菌环直径判断标准RIS苯唑西林 葡萄球菌1g1011-1213青霉素G葡萄球菌肠球菌其他链球菌10g2814192027291516红霉素葡萄球菌肺炎链球菌其他链球菌15g131515142216201620232121大观霉素淋病奈瑟菌100g14151718克拉霉素其他链球菌15g16172021万古霉素葡萄球菌肠球菌肺炎链球菌其他链球菌30g14151615171717克林霉素葡萄球菌肺炎链球菌其他链球菌2g141515152016181618211919氯霉素葡萄球菌肠球菌肺炎链球菌其他链球菌30g1212201713171317182018182121四环素葡萄球菌肠球菌肺炎链球菌其他链球菌30g14141818151815181922192219192323米诺环素葡萄球菌30g14151819诺佛沙星葡萄球菌肠球菌10g1212131613161717环丙沙星葡萄球菌肠球菌5g1515162016202121左氟沙星葡萄球菌肠球菌肺炎链球菌其他链球菌5g13131313141614161416141617171717多粘菌粘B30g891112复方新诺明SMZ/TMP23.75gSMZ/1.25gTMP10111512呋喃妥因葡萄球菌肠球菌300g1414151615161617氨苄西林肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌嗜血杆菌10g131118141612141921171522氨曲南30g15162122头孢唑啉肠杆菌30g14151718头孢噻吩肠杆菌30g14151718头孢呋辛肠杆菌嗜血杆菌30g1416151717191820头孢哌酮肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌75g1515162016202121头孢噻肟肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌嗜血杆菌30g141415221522232326头孢曲松肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌30g1313142014202121头孢吡肟30g14151718头孢他啶肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌嗜血杆菌30g141415171517181826头孢西叮肠杆菌30g14151718氧氟沙星肠杆菌铜绿假单胞菌和不动杆菌5g1212131513161616链霉素肠杆菌10g11121415妥布霉素肠杆菌10g12131415卡那霉素肠杆菌30g13141718哌啦西啉肠杆菌铜绿假单胞菌不动杆菌100g17171718201820211821庆大霉素肠杆