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文档简介

凋亡细胞的荧光标记形态观察 目的 观察细胞核形态 判别凋亡细胞 原理 DNA荧光染料Hoechst33258能透过完好细胞膜进入核内 凋亡细胞染色质致密 常呈月牙形斑块或碎裂 并可见凋亡小体 非凋亡细胞核染色较均匀 荧光较淡 死亡细胞不染色 用品 培养肺癌细胞 95D 荧光染料Hoechst33258PBS 无Ca Mg PH7 24 福尔马林 PBS配荧光显微镜 步骤1 单层培养细胞 用PBS洗2次 2 4 福尔马林固定10分钟后 用PBS洗1次3 以5 10ug mIHoechst33258染色5 10分钟水冲洗4 荧光显微镜观察 结果凋亡细胞核呈强亮的兰色荧光及明显核形态 正常细胞仅呈弱荧光 死细胞不被Hoechst332染色 正常细胞凋亡细胞 细胞胞核Hoechst33258荧光染色 克隆形成率计数 Giemas染色法 适用细胞染色和染色体染色 用品 原液的配置 Giemsa0 25g甘油25ml甲醇25ml缓冲液的配置 1 15molKH2PO4 1 15molNa2HPO4 4 6pH 6 9染色液配置 1份原液 9份缓冲液 步骤 1 单层培养细胞 PBS洗二次 2 甲醇固定10分钟 3 用滴管将配好的染色液布满整孔 4 染10
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