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集中空调微生物检测技术及质量控制 2015 集中空调通风系统微生物检测项目及相关检测方法质量控制及检测过程中相关问题 集中空调微生物检验项目 集中空调送风中细菌总数检验集中空调送风中真菌总数检验集中空调送风中 溶血性链球菌检验集中空调送风中嗜肺军团菌检验 不作为许可的必检项目 集中空调风管内表面微生物检验集中空调系统冷却水 冷凝水中嗜肺军团菌检验 集中空调送风中细菌总数检验 检验依据 WS394 2012附录D采样仪器 六级筛孔撞击式微生物采样器采样方法 每套系统3 5个检测点 流量28 3L min5 15min培养基 营养琼脂培养 35 37 培养48h 集中空调送风中细菌总数检验 结果报告1 单位 CFU m32 计算公式 平皿菌落数之和 1000测定值 CFU m3 流量 L min 采样时间 min 注意 平皿菌落数之和即为一个检测点6个平皿的菌落数的总和 送风中的其他项目的平皿菌落数之和的计算均与此相同 3 报告值 一个系统送风中细菌总数的测定结果按该系统全部检测的送风口细菌总数测定值中的最大值给出 集中空调送风中真菌总数检验 检验依据 WS394 2012附录E采样仪器 六级筛孔撞击式微生物采样器采样方法 每套系统3 5个检测点 流量28 3L min5 15min培养基 沙氏琼脂培养 28 培养5d 集中空调送风中真菌总数检验 结果报告1 单位 CFU m32 计算公式 平皿菌落数之和 1000测定值 CFU m3 流量 L min 采样时间 min 3 报告值 一个系统送风中真菌总数的测定结果按该系统全部检测的送风口真菌总数测定值中的最大值给出 集中空调送风中 溶血性链球菌检验 检验依据 WS394 2012附录F采样仪器 六级筛孔撞击式微生物采样器采样方法 每套系统3 5个检测点 流量28 3L min5 15min培养基 血琼脂平板培养 35 37 培养24 48h 集中空调送风中 溶血性链球菌检验 菌落特征 灰白色 表面突起 直径0 5 0 7mm 透明或半透明 菌落周围有明显的2 4mm界限分明完全透明的无色溶血环革兰氏染色镜检 革兰氏阳性无芽孢球菌 圆形或卵圆形 链状排列 集中空调送风中 溶血性链球菌检验 集中空调送风中 溶血性链球菌检验 集中空调送风中 溶血性链球菌检验 结果报告1 单位 CFU m32 计算公式 平皿菌落数之和 1000测定值 CFU m3 流量 L min 采样时间 min 3 报告值 一个系统送风中 溶血性链球菌的测定结果按该系统全部检测的送风口 溶血性链球菌测定值中的最大值给出 集中空调送风中嗜肺军团菌检验 检验依据 WS394 2012附录G采样仪器 液体冲击式微生物气溶胶采样器采样方法 每套系统3 5个检测点采样吸收液1 采样吸收液1 GVPC液体培养基2 采样吸收液2 酵母提取液 集中空调送风中嗜肺军团菌检验 培养基 GVPC琼脂BCYE琼脂BCYE CYE琼脂培养 35 37 5 CO2培养箱菌型确定 生化试验 血清学试验采样点测定结果 任一吸收液培养出嗜肺军团菌即判定为阳性结果结果报告 检出 未检出 一套系统中任意一个采样点检出 即报告该套空调送风中嗜肺军团菌检测结果为检出 2020 3 16 15 可编辑 集中空调风管内表面微生物检验 检验依据 WS394 2012附录I采样方法 1 刮拭法 表面积尘较多时采用该方法2 擦拭法 积尘较少时采用该方法3 采样面积 50cm2或100cm24 采样仪器 采样机器人或采样规格板 集中空调风管内表面微生物检验 检验项目 细菌总数 真菌总数培养基 营养琼脂 沙氏琼脂采样液及稀释液 0 1 吐温80水溶液检验步骤 1 刮拭法 称取1g加入9mL吐温80水溶液中制成1 10样液 做10倍梯级稀释 取适宜稀释度接种平皿 倾注琼脂 2 擦拭法 擦拭物加入10mL吐温80水溶液中 此即为1 10样液 做10倍梯级稀释 取适宜稀释度接种平皿 倾注琼脂 集中空调风管内表面微生物检验 培养1 细菌总数 35 37 培养48h2 真菌总数 28 培养5d结果计算1 刮拭法平均菌落数测定值 CFU cm2 积尘总重量 稀释倍数采样面积2 擦拭法平均菌落数测定值 CFU cm2 稀释倍数采样面积注意 此处为平均菌落数 即适宜稀释度的两个平皿的菌落数平均值 集中空调风管内表面微生物检验 结果报告1 单位 CFU cm22 报告值 一个系统风管内表面细菌总数 真菌总数的测定结果按该系统全部检测的风管内表面细菌总数 真菌总数测定值中的最大值给出 集中空调系统冷却水 冷凝水中嗜肺军团菌检验 检验依据 WS394 2012附录B采样容器 灭菌500mL玻璃或聚乙烯材料磨口瓶 瓶中加有硫代硫酸钠溶液以中和样品中的氧化物 培养基 GVPC琼脂BCYE琼脂BCYE CYE琼脂培养 35 37 5 CO2培养箱菌型确定 生化试验 血清学试验结果报告 检出 未检出嗜肺军团菌 质量控制及检测过程中相关问题 采样物品的准备 灭菌实验室环境 1000级洁净室 生物安全实验室各采样平皿质量1 对平皿的要求 直径90mm 厚度18mm2 平皿中培养基均匀性3 平皿中培养基厚度 加入20 25mL相应培养基 以保证采样时喷孔与琼脂表面之间达到最佳撞击距离4 已加入培养基的采样平皿至少提前两天配制 经无菌试验合格后方可用于采样 质量控制及检测过程中相关问题 真菌总数培养结果观察 从培养48h开始观察计数细菌总数及真菌总数结果计数 检测细菌总数的营养琼脂平板中有真菌生长时不对其进行计数 反之亦然风管内表面微生物计数结果适宜稀释度的选择 编写作业指导书 1 细菌总数 参照GB T18204 2 200030 300CFU2 真菌总数 参照GB T18204 8 200030 100CFU 质量控制及检测过程中相关问题 结果报告 编写作业指导书 1 集中空调送风中细菌总数 真菌总数 所有检测点都无菌生长测定值均为0时 则报告 1 1000 流量 采样时间 CFU m3 如采样时间为5min 则报告为 7CFU m3 测定值不为0时 即直接以所有检测点中最大值为报告值 小数点后四舍五入 取整数报告 例如 某检测点采样流量28 3L min采样5min 平皿菌落数之和为14CFU 测定值为98 9CFU m3 若该点测定值为所有检测点中最大值 则结果报告为99CFU m3 质量控制及检测过程中相关问题 2 集中空调送风中 溶血性链球菌 所有检测点都无菌生长测定值均为0时 报告未检出 测定值不为0时 即直接以所有检测点中最大值为报告值 小数点后四舍五入 取整数报告 例如 某检测点采样流量28 3L min采样5min 平皿菌落数之和为14CFU 测定值为98 9CFU m3 若该点测定值为所有检测点中最大值 则结果报告为99CFU m3 质量控制及检测过程中相关问题 2 风管内表面微生物中细菌总数 真菌总数 所有检测点都无菌生长测定值均为0时 则报告 1CFU cm2 所有测定值均 1CFU cm2时 则报告 1CFU cm2 最大测定值 1CFU cm2时 即直接以所有检测点中最大值为报告值 小数点后四舍五入 取整数报告 补充说明 风管内表面微生物检测原始记录中公式里平皿平均数改为平均菌落数 送风中 溶血性链球菌检测原始记录的计算公式中平皿菌落数改为平皿菌落数之和 对结果报告为什么不取2位有效数的解释 方法结果报告中规定每套系统以所有检测点中最大的检测值报告 依据这规定 检测值是依