中国海洋大学生物化学B真题00-09答案.doc

2007年一、填空1、醇 多羟基酸 类甾醇 2、磷酸戊糖途径 3、双缩尿反应 4、10.925、40 60 6、肌球蛋白 肌动蛋白 7、3.6 0.54 氢键 折叠片 转角（凸起） 8、磷酸化 9、四氢叶酸（与氨基苯甲酸PABA竞争性结合二氢叶酸合成酶） 10、亚麻酸 11、糖异生作用 12、低 高 13、32 106 14、DNA聚合酶 引物15、DNA RNA 蛋白质二、判断1、肽链中CN、CC可以自由旋转，其他键均不可以2、20种氨基酸与茚三酮反应除Pro为黄色，其余呈紫色3、一般来说，蛋白质的一级结构决定空间构象5、胰蛋白酶专一的水解Lys，Arg等碱性氨基酸羰基侧链肽，胰凝乳蛋白酶专一的水解Phe，Tyr等芳香氨基酸羰基侧链6、血红蛋白对氧的结合具有协同效应，使其再氧分压很低时能有效的释放氧，氧分压高时能快速的结合氧7、乙烯的作用是降低植物生长速度，催促果实早熟8、维生素B1即硫胺素，常以硫胺素焦磷酸辅酶形式存在，常是脱羧酶的辅酶9、人体必须的氨基酸主要有Val Trp Thr Ile Met Phe Lys等10、蔗糖由葡萄糖和果糖构成，麦芽糖由葡萄糖构成，乳糖由半乳糖和葡萄糖构成（）11、别构酶一般都是寡聚酶，通过次级键由多个亚基构成（所有别构酶都是寡聚酶）12、米氏常数是酶的特征常数，每个酶都有以个特定的Km值，随测定的底物、反应的温度、pH及离子强度而改变13、竞争性抑制Km变大，Vmax不变；非竞争性抑制Km不变，Vmax变小；反竞争性抑制Km、Vmax都变小14、核酶是一类具有催化活性的核酸，他的动力学方程符合米氏方程15、DNA分子变性时其紫外吸收迅速增加（对于纯样品，只要读出260nm处的A值就可以算出含量。通常以A值为1相当于50ug/mL双链DNA或40ug/mL单链DNA或RNA）16、核酸中的稀有碱基（大多都是甲基化碱基）大多出现于tRNA中17、生物膜上的脂质主要是磷脂（还有胆固醇和糖脂）18、膜蛋白（膜内在蛋白和膜周边蛋白不跨膜）跨膜区的二级结构一般是螺旋（以单一螺旋跨膜、以多段螺旋跨膜、以蛋白质分子末端片段插膜、通过共价键结合的脂插膜锚定在膜上）19、糖异生途径不是糖酵解途径的简单逆反应过程，其中有3步迂回措施：（1）丙酮酸【丙酮酸羧化酶、ATP】草酰乙酸【磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶、GTP】磷酸烯醇式丙酮酸；（2）果糖1，6二磷酸【果糖1，6二磷酸酶】果糖6磷酸；（3）葡萄糖6磷酸【葡萄糖6磷酸酶】葡萄糖。生成一分子葡萄糖，消耗4ATP和2GTP。20、葡萄糖激酶对葡萄糖专一性强，己糖激酶专一性不强21、辅酶NADH主要是通过呼吸链提供ATP分子，而NADPH在还原性生物合成中提供还原力（提供氢离子）22、解偶联剂（2，4二硝基苯酚【DNP】、三氟甲氧基苯腙羰基氰化物【FCCP】）可以破坏氧化磷酸化的偶联，电子传递产生的能量将以热量的形式释放;氧化磷酸化抑制剂：抑制氧的利用和抑制ATP的形成，寡霉素对利用氧的抑制可以被解偶联剂解除;离子载体抑制剂（除氢离子）：增加线粒体内膜对一价阳离子的通透性破坏氧化磷酸23、线粒体内膜对氢离子、氯离子、钾离子、氢氧根离子都是不通透的24、脂肪酸的氧化降解是从分子的羧基端开始的，氧化使中、长链脂肪酸末端甲基氧化转变为二羧基酸，加速了脂肪酸的氧化，氧化即脂肪酸羟化酶催化位羟基化，主要在于植烷酸的分解，缺少氧化会造成植烷酸的积聚25、层析系统的理论塔板数越高，系统的分离能力越好26、原核生物肽链合成时首先由甲酰蛋氨酰tRNA（tRNAfMeti）进入核糖体P位点识别启动密码子AUG27、中心法则即遗传信息从DNA传到RNA，再传到蛋白质，一旦传给蛋白质就不再转移29、在原核生物中，转录和翻译是同时进行的30、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶三、选择1、Pro 2、尿素或盐酸胍（巯基乙醇能打开二硫键） 3、D：20种氨基酸，除组氨酸外，在生理PH（7左右）下都没有明显的缓冲容量 4、色氨酸：碱水解多数氨基酸都遭到破坏，但色氨酸是稳定的。酸水解较好，但色氨酸遭到破坏羟基氨基酸小部分水解，天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解 5、与氧结合时是3价，去氧后是2价 6、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、凝血酶、纤溶酶 7、B：凝胶过滤层析是根据分子大小分离的技术 8、Edman降解法用于N末端分析，苯异硫氰酸酯（PITC）法 9、竞争性抑制（丙二酸和琥珀酸结构类似） 10、B型：DNA的构型有：A、B（C、D、E）、Z 11、核糖体 12、A：酶活力大小即酶含量多少，酶比活力代表酶的纯度=总活力U/总蛋白mg 13、k：维生素K是凝血酶原和其他蛋白质中谷氨酸残基羧化作用的辅因子 14、去污剂：膜周边蛋白通过静电力和非共价键与其他膜蛋白相互作用连接在膜上。膜内在蛋白主要考疏水力与膜脂相结合。去污剂如SDS：十二烷基硫酸钠，可蛋白质中的氢键和疏水作用 15、NAD+：一般来说，细胞的有机成分比代谢总产物的还原程度高，生物合成是一个还原性的反映过程16、解偶联剂 17、DNA聚合酶：DNA聚合酶是切除和修复，DNA聚合酶是修复，DNA聚合酶是复制 18、限制性内切酶 19、级联放大效应五、简单题1、超二级结构：若干相邻二级结构元件组合在一起，彼此相互作用，形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构串，在多种蛋白质中充当三级结构的构件，称为超二级结构结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成的三级结构的局部折叠区，他是相对独立的紧密球状实体，称为结构域模体：具有特殊功能的超二级结构，是二个或三个二级结构的肽段在空间上接近形成的具有特殊功能的超二级结构亚基：有些蛋白质是由两条或多条多肽链构成，其中每条多肽链称为亚基或亚单位2、（1）别构调控：酶分子的非催化部位与某些化合物可逆的非共价结合后发生构想的改变，进而改变酶活性状态，称为酶的别构调节。别构酶一般都是寡聚蛋白，通过次级键由多亚基组成，在别构酶分子上有和底物结合和催化底物的活性部位，也有和调节物或效应物结合的调节部位。调节部位和活性部位虽然在空间上是分开的，但这两个部位可以相互影响，通过构想的变化产生协同效应，实现对酶活的调控（2）酶原的激活：体内合成出的蛋白质，有时不具有活性，经过蛋白水解酶专一作用后，构想发生变化，形成酶的活性部位，变成活性蛋白，活性蛋白是酶，这个前体就称为酶原，该活化过程是不可逆的，通过专一蛋白水解酶作用，使原来酶原无活性的构想变成了有活性的构想，实现了对酶的调控（3）可逆的共价修饰：这种调控作用通过共价调节酶进行。共价调节酶通过其他酶对其多肽链上的某些基团进行可逆的共价修饰，改变酶的构像，使处于活性与非活性的互变状态，实现多酶活的调控，这种调控方式最普遍的就是磷酸化作用3、（1）化学偶联假说：此假说认为在电子传递过程中产生一种活泼的高能共价中间物，它随后裂解驱动氧化磷酸化作用，在糖酵解中可以看到这种情况：甘油醛3磷酸被NAD+氧化释放的能量形成甘油酸1，3二磷酸，这就是一个具有高能磷酸基团的酰基磷酸化物，但是在氧化磷酸化作用中一直未能找到任何一种活泼的高能中间产物（2）构想偶联假说：这种假说认为在电子沿电子传递链传递使线粒体内膜蛋白质组分发生了构象变化，形成高能形式，这种高能形式通过ATP的合成而恢复其原来的构象。这一假说和化学偶联假说一样，至今未能找到有力的实验证据4、（1）复制：DNA复制采取半保留复制的方式DNA聚合酶是一种模板指导的酶并且需要有引物链的存在DNA聚合酶有校对、修复功能（2）转录：转录过程RNA聚合酶要以一条DNA链为模板，受DNA的指导转录后对RNA的加工可以消除一定的错误（3）翻译：发生在tRNA上的校正突变，产生校正tRNA密码子的简并性和变偶性，密码的编排具有放错功能翻译过程要以mRNA为模板氨酰tRNA合成酶能够纠正酰化错误5、（1）糖与蛋白质：糖分解代谢过程中产生的丙酮酸经TCA循环转变为草酰乙酸、酮戊二酸等可用于合成各种氨基酸的碳链结构，经氨基化或转氨基后即生成相应的氨基酸，另外糖分解产生的能量也可供氨基酸合成蛋白质用蛋白质分解为氨基酸脱氨基后形成酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸经TCA循环和糖异生途径可形成葡萄糖和糖原（2）脂和蛋白质：脂类分子中的甘油可以经丙酮酸转变为草酰乙酸、酮戊二酸进而变为氨基酸。而脂肪酸氧化产生的乙酰辅酶A在动物体内由于没有乙醛酸循环不易被利用合成氨基酸，一般都经TCA循环被氧化产能蛋白质分解产生的生酮氨基酸可形成乙酰乙酸，从而合成脂肪，而生糖氨基酸可通过丙酮酸变为甘油，也可形成乙酰辅酶A，经丙二酰合成脂肪(3)糖和脂：糖经酵解生成二羟丙酮磷酸和丙酮酸，前者合成甘油，后者可以再形成乙酰辅酶A，经丙二酰形成脂肪酸脂肪分解产生的甘油可转变为二羟丙酮磷酸，从而生成糖，而脂肪酸氧化产生的乙酰辅酶A由于再动物体内酶有乙醛酸循环，一般都经TCA循环氧化成二氧化碳和水，生糖的机会很少2006年一、 填空1、7脱氢胆甾醇 促进钙、磷的吸收和骨骼的发育 2、16% 凯氏定氮法 3、脲酶 4、二氢叶酸合成酶 5、螺旋 折叠片 转角 6、丙酮 乙酰乙酸 D羟丁酸 7、10序列（Pribnow框，有助于DNA双链的解开） 35序列（识别区，提供RNA聚合酶识别的信号） 8、53外切酶 聚合酶 9、8 8 4 柠檬酸循环（氧化每一轮回产生一个NADP(2.5ATP)，一个FADH2(1.5ATP)，一个H+和一个乙酰辅酶A（10ATP）二、判断1、二硫键对蛋白质的三级结构有稳定作用，它的位置属于三级结构（某些二硫键是生物活性所必须的，另一些二硫键则不是生物活性所必需的，再绝大多数情况下，二硫键再多肽链的转角附近形成的）2、竞争性抑制使酶对底物的Km值增大3、碱性氨基酸的等电点与PH之间的关系为：PIPH7， 酸性氨基酸的等电点与PH之间的关系为：PIPH74、硫辛酸是一种酰基载体，存在于丙酮酸脱氢酶和酮戊二酸脱氢酶5、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶6、糖异生途径不是糖酵解途径的简单逆反应7、排阻层析（凝胶过滤层析）是根据分子大小进行分离的技术，不同大小的分子受到的排阻不同，最终按照分子大小从小到大的顺序流出8、端粒酶实际是一种反转录酶，它以RNA为模板来合成DNA的端粒结构（真核生物线性染色体的两个末端具有端粒结构富含G，功能是稳定染色体末端结构，防止染色体间末端连接，并可以补偿滞后链5末端在消除RNA引物后造成的空缺，端粒酶的存在使端粒保持一定的长度）9、肌红蛋白和血红蛋白又相似的三级结构，但共价结构不相似，动力学常数也不同10、构成生物膜的脂质、蛋白质、糖类在膜两侧的分布都是不均匀的四、名词解释1、PI：氨基酸净电荷为0时的PH称为等电点，即PI2、蛋白聚糖：是一类特殊的糖蛋白，由一条或多条糖胺聚糖和一个核心蛋白共价连接而成3、生酮氨基酸：分解过程中能产生乙酰乙酰辅酶A的氨基酸，可通过乙酰乙酰辅酶A变为乙酰乙酸和羟丁酸，这些氨基酸称为生酮基酸（生糖氨基酸：凡能形成丙酮酸、酮戊二酸、琥珀酸、草酰乙酸的氨基酸都称为生糖氨基酸）4、酶活力单位：一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需的酶量（比活力：每mg蛋白质所含的酶活力单位数）5、PCR：聚合酶链反应，是体外酶促扩增DNA的一种应用广泛的生物技术，又称无细胞分子克隆法6、SDS-PAGE：十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，再聚丙烯酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠和少量巯基乙醇，用于测定蛋白质分子量的方法7、氧化磷酸化：伴随电子经电子传递链传递到氧，ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程即是氧化磷酸化作用8、蛋白质组：指细胞内基因组表达的所有蛋白质9、一碳单位：具有一个碳原子的基团称为一碳单位10、岗崎片段：DNA复制时，35走向的链短期内首先合成较短的DNA片段，接着出现较大的分子，这些较短的DNA片段称为岗崎片段11、别构效应：多亚基蛋白一般具有多个结合部位，结合再蛋白质分子的特定部位上的配体对该分子的其他部位产生的影响称为别构效应12、G蛋白：全名GTP结合蛋白，它既与GTP结合，也与GDP结合，是一类信号传递蛋白13、Na+-K+ATP酶：是一个跨膜的Na+-K+泵，即通过水解ATP提供的能量主动向外运输Na+，而向内运输K+ 14、Motif：是具有特殊功能的超二级结构，是二个或三个具有二级结构的肽段，再空间上相互接近形成的一个具有特殊功能的超二级结构15、质粒：染色体外自主复制的遗传因子，多为共价闭环的DNA分子五、问答题1、（1）前处理：分离纯化某中蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保持原来的天然状态，不丢失生物活性就。对于猪肝应先剔除结缔组织和脂肪组织，再用电动捣碎机等设备对猪肝进行细胞破碎，再选择适当的缓冲液把SOD酶提取出来，细胞破碎等不溶物用离心或过滤的方法除去（2）粗分级分离：当蛋白质提取液获得后，选用一套释放的方法，将所需蛋白质与其他杂质分离开。对于SOD酶可以选用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离法等。（3）细分级分离：也就是样品的进一步纯化。对于SOD酶可选用层析法进行纯化（4）结晶：是蛋白质分离纯化的最后步骤，尽管结晶并不能保证蛋白质一定是均一的，但只有某种蛋白质再溶液中的数量占有优势时才能形成结晶，结晶过程本身也伴随这一定程度的纯化。对于细分级分离后得到的SOD酶可以进行结晶。2、蛋白质的结构和功能之间具有高度的统一性和适应性，二者密切相关。在丝氨酸蛋白酶中胰凝乳蛋白酶的结构是个典型。它的结构是以个紧密球状实体，活性中心位于酶分子表面凹陷的小口袋中，这个沟较深，说明了胰凝乳蛋白酶对芳香族和其他大的疏水性侧链的专一性的功能，在活性中心中His57与Ser195相临近，Asp102的羰基也在其附近，这3个残基形成了催化三联体，这种结构构成了酶的催化活性。在催化过程中，专一性侧链进入酶的口袋，然后通过酸碱催化和共价催化完成催化作用。正是蛋白质结构和功能之间的这种统一性和适应性，才是胰凝乳蛋白酶巧妙的完成了它的催化作用，可见蛋白质结构和功能的密切相关。3、（1）化学偶联假说：见2007（2）构象偶联假说：见2007（3）化学渗透假说：这种假说认为电子传递释放出的自由能和ATP合成是与一种跨线粒体内膜的质子梯度相偶联，也就是电子传递的自由能驱动氢离子从线粒体基质跨过内膜进入到间隙，从而形成跨线粒体内膜的氢离子电化学梯度，这个梯度的电化学势驱动ATP的合成，这种假说可以解释很多关键现象：氧化磷酸化作用的进行需要封闭的线粒体内膜线粒体内膜对氢离子、氢氧根离子、钾离子、氯离子等离子都是不通透的破坏氢离子浓度梯度的形成都必然破坏氧化磷酸化作用的进行线粒体电子传递所形成的电子流能够将氢离子从线粒体内膜逐出到线粒体间隙大量实验表明膜表面不仅能滞留大量质子，而且在一定条件下，质子能沿膜表面迅速转移，其速度超过在大量水相中的速度4、乳糖操纵子包括启动子、操纵基因和三个结构基因（分别编码分解乳糖所需要的3种酶），乳糖操纵子的操纵基因lacO不编码任何蛋白质，它是另一位点上调节基因lacI所编码的阻遏蛋白的结合部位，阻遏蛋白是一种变构蛋白，当细胞中有乳糖或其他诱导物的情况下阻遏蛋白便和他们结合，结果使阻遏蛋白的构象发生了改变而不能结合到lacO上，于是转录便得以进行，从而使吸收和分解乳糖的酶被诱导产生。如果细胞中没有乳糖或其他诱导物则阻遏蛋白就结合在lacO上，阻止了结合在启动子P上的RNA聚合酶向前移动，使转录不能进行5、（1）关键调控步骤：在糖酵解中：葡萄糖在己糖激酶作用下生成葡萄糖6磷酸果糖6磷酸在磷酸果糖激酶作用下生成果糖1，6二磷酸磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸其中第步是主要的TCA循环中：草酰乙酸和乙酰辅酶A在柠檬酸合酶作用下缩合形成柠檬酸异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下形成酮戊二酸酮戊二酸在酮戊二酸脱氢酶作用下生成琥珀酰辅酶A其中第步是主要的(2) 氧化还原步骤：甘油醛3磷酸在甘油醛3磷酸脱氢酶作用下氧化成1，3二磷酸甘油酸(NADH)异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下形成酮戊二酸(NADH)酮戊二酸在酮戊二酸脱氢酶作用下生成琥珀酰辅酶A(NADH)琥珀酸在琥珀酸脱氢酶作用下形成延胡索酸（FADH2）苹果酸在苹果酸脱氢酶作用下生成草酰乙酸（NADH）丙酮酸在丙酮酸脱氢酶作用下生成乙酰辅酶A（NADH）(3)ATP数目：底物水平的磷酸化作用：在糖酵解起始阶段先消耗了2分子ATP用于底物的磷酸化，然后形成的1，3二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸，分别可以形成3磷酸甘油酸和丙酮酸，并各产生1分子ATP，这样1分子葡萄糖糖酵解就在底物水平的磷酸化作用上净形成了2分子ATP。在TCA循环中琥珀酰辅酶A转变为琥珀酸形成了1分子GTP（相当于ATP），1分子葡萄糖就生成了2个GTP氧化磷酸化作用：如上1分子葡萄套共产生10分子NADH和2分子FADH2，共生成ATP为2.5*10+1.5*2=28个1分子葡萄糖有氧氧化共产生ATP28+4=32个2005年一、 填空1、 1，4糖苷键：糖原磷酸化酶（a活、b）：只能催化1，4糖苷键磷酸解，发生在碳和氧之间，形成葡萄糖1磷酸，需要辅助因子：磷酸吡哆醛（PLP，氨基转移作用中也是一个重要的辅助因子）糖原脱支酶：催化1，6糖苷键水解，产生葡萄糖磷酸葡萄糖变位酶：需要少量葡萄糖1，6二磷酸的存在才能充分发挥活性UDP葡萄糖焦磷酸化酶：催化葡萄糖1磷酸与UTP生成UDP葡萄糖（UDPG），葡萄糖形成UDPG的重要生物学意义就在于它使葡萄糖变为更活泼的活化形式糖原合酶：不能从0开始合成，需要引物：生糖原蛋白（糖原素），它具有自动催化功能，可催化8个UDPG连续以1，4糖苷键连接，形成糖原分子的核心，在此基础上糖原合酶在进行合成，糖原分子的延长与否取决于糖原合酶与生糖原蛋白的相互作用，糖原合酶一旦脱离生糖原蛋白，就不在进行合成糖原分支酶：从非还原末端约7个葡萄糖残基（至少已经有11个残基了）处断开1，4糖苷键，转移到同一或其他糖原分子靠内部的某个葡萄糖残基上，形成1，6糖苷键，糖原分支增加了糖原的可溶性，还增加了非还原末端的数目，从而大大提高了糖原的分解、合成效率2、细胞溶胶 果糖6磷酸形成果糖1，6二磷酸 线粒体 草酰乙酸与乙酰辅酶A缩合成柠檬酸 琥珀酰辅酶A转化成琥珀酸生成GTP3、VmaxS/(Km+S) 增大：Km的物理意义，Km是当酶反应速率达到最大反应一半时的底物浓度，单位是mol/L。1/Km可以近似的表示酶对底物亲和力的大小，大大、小小4、丙酮酸 酮戊二酸 5、帽子（3端有多聚腺苷酸尾巴） 6、丙氨酸 核内不均一RNA ribozyme 聚丙烯酰胺凝胶电泳二、名词解释1、福林酚反应：福林酚试剂定量的与Cu+反应，Cu+是由蛋白质的易氧化成分还原Cu2+产生的2、无规则卷曲：或称卷曲，它泛指那些不能被归入明确的二级结构的多肽区段3、盐溶：低浓度时，中性盐可以增加蛋白质的溶解度，这种现象称为盐溶（盐析：当溶液离子强度增加到一定数值时，蛋白质的溶解度开始下降，当离子强度增加到足够高时，蛋白质可以从溶液中沉淀出来，这种现象称为盐析）、4、ZDNA：是DNA的一种构象，是一种左手螺旋的、细长的5、比活力：每mg蛋白质所含的酶活力单位数，即总活力U/总蛋白mg6、Cori循环：激烈运动时，糖酵解作用产生的NADH的速度超过氧化呼吸链再形成NAD+的能力，这时肌肉中酵解过程形成的丙酮酸由乳酸脱氢酶转变为乳酸使NAD+再生，乳酸扩散到血液并随血液进入肝细胞，再通过糖异生作用转变为葡萄糖，又回到血液中，这个循环称为可立氏循环：肌肉酵解产生丙酮酸变为乳酸，同时再生NAD+，乳酸随血液进入肝脏，糖异生形成葡萄糖，再进入血液的过程称为可立氏循环7、丙氨酸葡萄糖循环：肌肉氨基转移酶可以催化丙酮酸形成丙氨酸，后者随血液进入肝细胞经转氨基作用产生丙酮酸，又可用于糖异生作用，生成的葡萄糖又回到肌肉，又降解为丙酮酸，此循环称葡萄糖丙氨酸循环（起着把氨运入肝脏的作用）8、外显子：真核生物的基因通常都是断裂的，保留再成熟RNA中的编码序列称为外显子（插入的非编码序列称为内含子）9、rRNA：核糖体RNA，构成核糖体，是蛋白质的装配者10、终止子：（DNA）11、HIV：人类免疫缺损病毒，它是一类逆转录病毒，侵入人体引起人类免疫缺陷综合症，即艾滋病12、脂质体：利用类脂经超声波、机械搅拌等处理形成双脂层小囊泡，将DNA包裹再内即为脂质体（它与细胞膜融合使DNA进入细胞的方法为脂质体法）13、乙醛酸循环：这个循环通过一些列反应最终产生乙醛酸，再动物体内不存在，只存在于植物和微生物中，主要内容是通过乙醛酸途径使乙酰辅酶A转变为草酰乙酸从而进入柠檬酸，其全部反应可以看做是2个乙酰辅酶A分子合成1分子草酰乙酸14、反义链：15、拓扑异构酶：引起拓扑异构反应的酶称为拓扑异构酶16、滞后链：DNA复制中，一条模板链是53走向的，在其上DNA以53方向合成，但是与复制叉移动的方向正好相反，所以随着复制叉的移动，形成许多不连续的片段，最后连成一条完整的DNA链，该链称为滞后链（DNA复制中，一条模板链是35走向的，在其上DNA能以53方向连续合成，称为前导链）17、一碳单位：具有一个碳原子的基团称为一碳单位18、磷酸戊糖途径：在细胞溶胶内进行的从磷酸化六碳糖形成五碳糖并产生还原力（NADPH）的循环过程19、别构酶：酶分子的非催化部位与某些化合物可逆的非共价结合后发生构象的改变，进而改变酶活性状态，称为酶的别构调节，具有这种调节作用的酶称为别构酶20、脂多糖：脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有结构成分，构成外膜外表面的主要物质，并赋予这类细胞以亲水表面三、简答题1、（1）合成：酮体的合成主要是肝脏的功能，在肝脏线粒体中，决定乙酰辅酶A去向的是草酰乙酸，在草酰乙酸浓度十分低时，乙酰辅酶A进入TCA循环的量也随之变少，从而有利于酮体的合成，同时肝脏中脂肪酸的氧化仍保持继续。在基质中先由乙酰辅酶A合成乙酰乙酸，之后乙酰乙酸可在D羟丁酸脱氢酶作用下生成D羟丁酸，也可自动脱羧生成丙酮。（2）分解及生理意义：在肝外组织中D羟丁酸被D羟丁酸脱氢酶催化生成乙酰乙酸，进而形成2分子乙酰辅酶A进行供能（3）增加及其影响：严重饥饿或未经治疗的糖尿病人体内可产生大量的乙酰乙酸，其原因是饥饿状态和胰岛素过低都会耗尽体内糖的贮存。肝外组织不能自血液中获取充分的葡萄糖，为了获得能量，肝中的葡萄糖异生作用就会加速，肝和肌肉中的脂肪酸氧化也同样加速，同时带动蛋白质的分解。脂肪酸氧化加速产生大量的乙酰辅酶A,糖异生作用使草酰乙酸供应耗尽，而后者又是乙酰辅酶A进入TCA循环所必需的，在此种情况下乙酰辅酶A不能正常的进入柠檬酸循环，而转向生成酮体的方向，造成：血液中出现大量丙酮，它是又毒的血液中出现乙酰乙酸和D羟丁酸，使血液PH降低，以至发生酸中毒以上血液或尿中酮体过高都可导致昏迷，甚至死亡2、（1）结构基础：完整的线粒体内膜NADHQ还原酶、辅酶Q、琥珀酸Q还原酶、细胞色素还原酶、细胞色素氧化酶等电子传递有关的酶ATP合酶（2）假说：见以上2张卷子3、（1）前处理：分离纯化某中蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保持原来的天然状态，不丢失生物活性，为此，动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织，种子材料应先去壳去皮，油料种子最好先用低沸点的有机溶剂脱脂，然后根据情况不同，选用适当的方法将组织和细胞破碎。动物组织和细胞可用电动捣碎机等设备进行破碎，。植物组织和细胞一般需要用石英砂或玻璃粉和适当的提取液一起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理。细菌细胞的破碎常用超声波震荡等方法。组织和细胞破碎以后，再选择适当的缓冲液把所要的蛋白质提取出来，细胞破碎等不溶物用离心或过滤的方法除去。（2）粗分级分离：当蛋白质提取液获得后，选用一套释放的方法，将所需蛋白质与其他杂质分离开。一般这一级分级分离用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离法等，这些方法的优点是简便，处理量大。有些蛋白质提取液大，又不适合用沉淀或盐析法浓缩，则可采用超过滤、凝胶过滤等方法（3）细分级分离：也就是样品的进一步纯化。进一步纯化一般使用层析法包括凝胶过滤，离子交换层析，吸附层析以及亲和层析等。用于细分级分离的方法一般规模较小，但分辨率高（4）结晶：是蛋白质分离纯化的最后步骤，尽管结晶并不能保证蛋白质一定是均一的，但只有某种蛋白质再溶液中的数量占有优势时才能形成结晶，结晶过程本身也伴随这一定程度的纯化。4、（1）两条途径的发生场所不同，脂肪酸合成发生于细胞溶胶，降解发生于线粒体（2）两条途径都有一中间体与载体连接，脂肪酸合成中载体为ACP，降解中为辅酶A（3）两条途径中有4步反应从化学上看一条途径的4步反应是另一条途径4步反应的逆反应，脂肪酸合成中是：缩合、还原、脱水、还原;脂肪酸降解中是：氧化、水合、氧化、裂解（4）两条途径都具有转运机制将线粒体和细胞溶胶沟通起来，在脂肪酸合成中有三羧酸转运机制，在脂肪酸降解中有肉碱载体系统（5）两条途径都以脂肪酸的逐次、轮番的变化为特色，在脂肪酸合成中，脂肪链获取2碳单元而延伸，脂肪酸降解中则是使乙酰辅酶A形式的2碳单元离去，以实现脂肪链的缩短（6）脂肪酸合成时，是从分子甲基端开始到羧基为止，而脂肪酸降解中则是相反的（7）羟酯基中间体在脂肪酸合成中是D型，在脂肪酸降解中是L型（8）脂肪酸合成由还原途径构成，需要有NADPH参与，脂肪酸降解则由氧化途径构成，需要有FAD和NAD+参与（9）两条途径，每一轮都可以延伸或除去2个碳原子单元（10）动物体中，脂肪酸合成用的酶全都设在单一多肽链上，此多肽链是脂肪酸合酶的一部分，脂肪酸降解中酶是以何种形式聚合在一起还未弄清5、（1）运输：多肽合成后每一需要运输的多肽都含有一段氨基酸序列，称为信号肽序列，引导多肽至不同的转运系统。真核细胞中，当某一多肽的N端刚开始合成不久，这种多肽的去向就已经被决定。一部分核糖体以游离状态停留停留在胞浆中，它们只合成供装配线粒体及叶绿体膜的蛋白质，另一部分核糖体，受新合成的多肽N端上的信号肽控制进入内质网，与内质网相结合的核糖体主要合成溶酶体蛋白、分泌到细胞外的蛋白和构成质膜骨架的蛋白。结合在内质网上的核糖体合成的多肽经多肽移位后，在内质网小腔中被修饰，主要包括N端信号肽的切除、二硫键的形成、使线形多肽呈现一定的空间结构和糖基化作用，通过短时间在粗面内质网内加工后，分泌蛋白形成被膜包裹的小泡，转运至高尔基体，在高尔基体对糖蛋白上的寡聚糖核做进以步修饰与调整，并将各类多肽分类运送到溶酶体、分泌粒和质膜等目的地2004年一、 填空题1、GE HPLC snRNA PCR ( ) ( ) 亮氨酸 5脱氧鸟苷 核磁共振 超氧化物歧化酶2、甘油3磷酸 苹果酸天冬氨酸NADH的电子在甘油3磷酸脱氢酶作用下转移到二羟丙酮磷酸形成甘油3磷酸，后者可以轻易的线粒体内膜，在线粒体内在甘油3磷酸脱氢酶作用下使FAD还原成FADH2，实现NADH的转移NADH的电子由苹果酸脱氢酶传递给草酰乙酸使后者变为苹果酸，后者经过苹果酸酮戊二酸载体进入线粒体内膜，被氧化成草酰乙酸，并生成NADH，草酰乙酸通过转氨基作用转变为天冬氨酸，再通过谷氨酸天冬氨酸载体转移到细胞溶胶，随后转氨基又变为草酰乙酸3、40 4、磷酸果糖激酶 柠檬酸合酶 硫解酶二、判断题1、所有蛋白质的翻译开始于甲硫氨酸的参与2、丝氨酸是一种带电荷的极性R基氨基酸3、基团转移是一种主动运输（动物体小肠和肾细胞中葡萄糖的运输是伴随着Na+一起进入细胞的，这种运输称为协同运输）4、米氏常数可以表示酶对不同底物的亲和性5、20种氨基酸基本都是L型的6、RNA在碱性条件下比DNA更容易被降解（RNA的磷酸酯键易被碱水解，DNA的磷酸酯键则不易被碱水解，DNA一般对碱稳定;酸水解中，糖苷键比磷酸酯键更易水解，嘌呤对酸不稳定）7、肼解法是目前测定氨基酸C端残基最重要的方法（PITC法最初用于N末端分析，后来发展为Edman降解法，用于氨基酸序列的测定）8、糖原分解过程中断裂1，6糖苷键的酶是糖原脱支酶9、尿素循环（urea cycle）的过程，生成一分子尿素需消耗4个高能磷酸键，3个ATP水解为2个ADP和一个AMP线粒体中：尿素的第一个N原子获取：NH3和HCO3在线粒体的氨甲酰磷酸合成酶作用下消耗一分子ATP，生成氨甲酰磷酸（细胞溶胶中的氨甲酰磷酸合成酶由嘧啶生物合成的任务）氨甲酰磷酸在鸟氨酸转氨甲酰酶的作用下消耗一分子ATP将氨甲酰基转移到鸟氨酸上形成瓜氨酸细胞溶胶：尿素的第二个N原子获取：瓜氨酸在精氨琥珀酸合成酶的作用下与天冬氨酸反应，消耗ATP成AMP，生成精氨琥珀酸精氨琥珀酸在精氨琥珀酸（裂解）酶作用下脱下延胡索酸生成精氨酸精氨酸在精氨酸酶的作用下水解生成尿素和鸟氨酸总结：循环中使用了4个高能磷酸键（3个ATP水解为2个ADP和1个AMP），尿素中的C来自HCO3，N一个来自于氨，一个来自于天冬氨酸10、引起SARS的冠状病毒是一种负链RNA病毒？三、选择题1、谷氨酸（谷氨酸和氨基丁酸均是神经递质，后者GABA）2、G+C的含量越高（G与C之间有3个氢键所以G+C多的DNA更稳定，Tm越高，Tm可以作为衡量DNA均一性的标准，可以推算出DNA碱基的百分组成XG+C=(Tm69.3)*2.44）3、3（P/O比是生成ATP于消耗氧的关系，NADH为2.5 FADH2，一分子羟丁酸可生成2分子乙酰辅酶A，还产生了一分子NADH）4、线粒体 5、葡萄糖6磷酸酶（葡萄糖6磷酸酶存在于肝及肾，脑和肌肉中均无此酶，它将葡萄糖6磷酸水解为葡萄糖，用于维持血糖水平）6、动物眼球突出、心搏加快、基础代谢增高、消瘦、神经系统兴奋性提高、神经过敏（甲状腺激素总的表现是增强机体新陈代谢，引起耗氧量及产热量的增加，并促进智力和机体发育） 7、 8、诱导表达 9、2 10、D：hnRNA为核内不均一RNA，又称类似DNA的RNA（DRNA），hnRNA转变成mRNA的加工过程包括：（1）5端形成帽子结构（2）在3端加上多聚腺苷酸尾巴（3）通过拼接除去内含子转录来的序列（4）链内部核苷被甲基化。内含子：断裂基因中经转录被拼接除去的序列称为内含子11、蚜肠霉素 12、 13、丙氨酸、酪氨酸 14、12.5 15、尿酸（鸟嘌呤、腺嘌呤次黄嘌呤、黄嘌呤。次黄嘌呤黄嘌呤。黄嘌呤尿酸） 16、肝脏中缺少L古洛糖酸内酯氧化酶四、名词解释1、蛋白聚体：2、酸值（价）：中和1g油脂中的游离脂肪酸所需的KOH的mg数（碘值：100g油脂卤化时所能吸收的碘的克数。皂化值（价）：造化1g油脂所需的KOH的mg数）3、核酶：具有催化活性的RNA称为核酶4、转换数：当酶被底物饱和时每秒每个酶分子转换底物的分子数，这个常数叫做转换数（TN）5、HDNA：一种分子内折叠形成的三股螺旋的DNA，其中胞嘧啶发生了H+化6、Cori循环：见2005年名词解释7、岗崎片段：见2006年名词解释8、中心法则：即遗传信息从DNA传到RNA，再传到蛋白质，一旦传给蛋白质就不再转移9、化学渗透假说：见2006年简答10、别构酶：见2005年名词解释五、问答题1、蛋白质的结构和功能之间具有高度的统一性和适应性，二者密切相关。（1）血红蛋白是具有四级结构的蛋白质，它共有4个亚基，每个亚基都含一个血红素，血红素是处在多肽链的包围之中，血红蛋白与氧结合就是通过血红素中的铁原子与氧进行可逆的结合来实现的。由于4个亚基间靠8个盐键连接，使得亚基彼此靠近，从而维持其稳定的构象。但此种构象的约束不利于血红蛋白与氧的结合，故血红蛋白与氧的结合能力比单个亚基还弱。当一个亚基与氧结合后，引起亚基间盐键的断裂，血红蛋白的四级结构发生了变化，结果导致其他亚基的氧结合点暴露，增大了其他亚基与氧的亲和力，促进了它们与氧的结合。随着盐键的全部断裂，整个血红蛋白变为氧合血红蛋白，这是氧与血红蛋白结合的协同效应。由此可见蛋白质的结构和功能之间具有高度的统一性和适应性，二者密切相关。（2）肌红蛋白由一条多肽链和血红素构成，血红素位于肌红蛋白的疏水空穴内，肌红蛋白和氧的结合就是通过血红素中的铁原子与氧可逆的结合来实现的。这种可逆结合需要多肽链结构的微环境提供帮助，再血红蛋白中也是如此：固定血红素基保护血红素铁免遭氧化为氧分子提供一个合适的结合部位。由此可见蛋白质结构和功能的密切关系2、（1）DNA聚合酶：切除引物（岗崎片段的RNA引物）和修复（2）DNA聚合酶：修复（3）DNA聚合酶：复制（4）拓扑异构酶：在DNA中引入或消除超螺旋（拓扑异构酶：连续的引入负超螺旋，消除复制叉前进带来的扭曲张力，促进双链解开）（5）HU蛋白：促进双链DNA弯曲（6）SSB：单链结合蛋白，保护单链，防止恢复双链（7）Dna A蛋白：识别起始位点，形成起始复合物（8）Dna B蛋白：解开DNA双链（9）Dna C蛋白：帮助Dna B结合于起点（10）引物合成酶（Dna G）：合成RNA引物3、见2005年简答4、（1）底物专一性：酶对底物的专一性包括结构专一性和立体异构专一性，作用机制是诱导契合假说，即当酶分子与底物分子接近时，酶蛋白受到底物分子的诱导，其构象发生有利于底物结合的变化，酶与底物再此基础上互补契合进行反应。（2）反应高效率：使酶催化高效的因素主要有：邻近效应与定向效应：邻近效应指酶与底物结合形成中间复合物以后，使底物和底物之间，酶的催化基团与底物之间结合于同一分子而使有效浓度得以极大升高，从而使反应速度大大增加的一种效应；定向效应：指反应物的反应基团之间和酶的催化基团与底物的反应基团之间的正确取位产生的效应。酸碱催化：酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质子以稳定过渡态，加速反应的一类催化机制共价催化：共价催化又称亲核催化或亲电子催化，在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出或汲取电子并作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能，使反应加速金属离子催化：金属离子主要通过3种途径参与催化：a、通过结合底物为反应定向b、通过可逆的调节金属离子的氧化态调节氧化还原反应c、通过静电稳定或屏蔽负电荷多元催化和协同效应：酶催化反应中，常常是几个基元反应配合在一起共同起作用，这种多元催化协同作用的结果，是使酶反应加速的一个因素活性部位微环境：活性部位一般位于酶分子疏水环境的裂缝中，这种环境中底物分子与催化基团之间多用比在极性环境中强的多，大大有利于酶的催化作用。5、（1）原理：将不同来源的DNA放在试管里，经热变性后，慢慢冷却，让其复性。若这些DNA之间在某些区域有相同的序列 ，复性时，会形成杂交DNA分子。（2）将DNA样品经限制性内切酶降解后，用琼脂糖凝胶电泳进行分离。将胶浸泡在碱溶液中使DNA变性，然后将变性DNA转移到硝酸纤维素膜上，在80焙烤4到6小时，使DNA牢固的吸附在硝酸纤维素膜上，然后与放射性同位素标记的变性DNA探针进行杂交，杂交须在较高的盐浓度及适当的温度下进行数小时或十余小时，然后通过洗涤，除去未杂交上的标记物，将硝酸纤维素膜烘干后进行放射自显影6、人体内脂肪酸是很难转变为葡萄糖的。因为脂肪酸通过氧化生成乙酰辅酶A，在植物体内可以通过乙醛酸循环转变为三羧酸循环中的有机酸，如草酰乙酸，然后生成丙酮酸，糖异生形成葡萄糖，而在动物体内，由于没有乙醛酸循环，乙酰辅酶A一般都是经三羧酸循环氧化生成二氧化碳和水，生糖的机会很少2003年一、 填空题1、1.5 2.5 2、A位点 P位点 3、脲 4、苯丙氨酸（Phe） 酪氨酸（Tyr）5、天冬酰胺 丝氨酸 苏氨酸 6、糖类（一类非抗体的蛋白质或糖蛋白，它能专一的与细胞表面的糖类非共价结合，并具有凝集细胞和沉淀聚糖和复合糖的作用） 7、己糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶 柠檬酸合酶 异柠檬酸脱氢酶 酮戊二酸脱氢酶 8、2nm 0.34nm 10 A、C、D、E、Z 9、2 25 32二、判断题1、氨基酸与茚三酮反应均生成颜色反应，是鉴定氨基酸的特征反应2、二硫键对于稳定蛋白质的三级结构具有重要的作用，二硫键的位置属于三级结构范畴3、所有的酶蛋白都是球状蛋白（X？）4、将某种氨基酸溶于水所得溶液PH为9，则该氨基酸的等电点大于95、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶6、维生素B12的分子结构中含有钴元素7、竞争性抑制使酶对底物的Km变大8、构成生物膜的脂质、蛋白质、糖类在膜两侧的分布都是不均匀的9、真核生物成熟的mRNA有帽子和尾巴结构10、若DNA双链之一股是pGpTpGpGpApC,则其互补链是pCpApCpCpTpG11、在大肠杆菌中转录和翻译几乎是同时进行的12、脂双层膜对一些小分子，如水分子以及各种离子是允许自由通过的（X）13、DNA复制时，岗崎片段的合成需要RNA引物14、操纵子模型是由Monod和Jacob两位科学家提出的15、Southern blot、Nothern blot、Western blot分别是DNA、RNA和蛋白质进行印记转移的技术四、名词解释1、等电点：氨基酸净电荷为0时的PH称为等电点，即PI2、双螺旋结构：3、核酶：具有催化活性的RNA称为核酶4、Tm值：把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，即Tm5、操纵子：指细菌基因表达核调控单位，它包括结构基因、调节基因和由调节基因产物所识别的控制序列6、Pribnow box：大肠杆菌RNA合成时，起点上游约10处有6bp的保守序列TATAAT，称为Pribnow 框，即Pribnow box，又称10序列7、排阻层析：（凝胶过滤层析）是根据分子大小进行分离的技术，不同大小的分子受到的排阻不同，最终按照分子大小从小到大的顺序流出8、岗崎片段：见2006年名词解释9、协同效应：10、级联放大效应：机体调节代谢过程中，少量的物质，到最后却引起了极强烈的效应，反应过程中各个信号放大了数百万倍，这种作用称为级联放大效应11、酵解途径：无氧条件下，葡萄糖进行分解，形成2分子丙酮酸并提供能量，这一个过程为糖酵解作用，即酵解途径12、电子传递链：电子从NADH到O2的传递所经过的途径形象的称为电子传递链，或称呼吸链13、脂质体：见2005年名词解释14、第二信使：激素调节过程中，cAMP起着信息的传递和放大作用，激素这样作用方式称为第二信使学说，cAMP即为第二信使15、端粒酶：是一种反转录酶，它以RNA为模板来合成DNA的端粒结构五、问答题1、乳糖操纵子包括启动子、操纵基因和三个结构基因（分别编码分解乳糖所需要的3种酶），乳糖操纵子的操纵基因lacO不编码任何蛋白质，它是另一位点上调节基因lacI所编码的阻遏蛋白的结合部位，阻遏蛋白是一种变构蛋白，当细胞中有乳糖或其他诱导物的情况下阻遏蛋白便和他们结合，结果使阻遏蛋白的构象发生了改变而不能结合到lacO上，于是转录便得以进行，从而使吸收和分解乳糖的酶被诱导产生。如果细胞中没有乳糖或其他诱导物则阻遏蛋白就结合在lacO上，阻止了结合在启动子P上的RNA聚合酶向前移动，使转录不能进行2、（1）糖先在细胞溶胶中经糖酵解途径转化为丙酮酸，随后丙酮酸进入线粒体脱氢形成乙酰辅酶A，经过三羧酸循环彻底氧生成二氧化碳和水。另外，糖酵解产生的丙酮酸还可在无氧条件下转化为乳酸。（2）脂肪在体内先转变为脂肪酸，然后活化称脂酰辅酶A，进入线粒体进行氧化生成乙酰辅酶A，进入三羧酸循环（3）蛋白质水解为氨基酸后经过转氨基、脱氨基作用，N经尿素循环最后形成尿素排除体外，而碳骨架则以各种形式进入三羧酸循环（4）相互联系：A、糖与蛋白质：糖分解代谢过程中产生的丙酮酸经TCA循环转变为草酰乙酸、酮戊二酸等可用于合成各种氨基酸的碳链结构，经氨基化活转氨基后即生成相应的氨基酸，另外糖分解产生的能量也可供氨基酸合成蛋白质用蛋白质分解为氨基酸脱氨基后形成酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸可形成葡萄糖和糖原B、脂和蛋白质：脂类分子中的甘油可以经丙酮酸转变为草酰乙酸、酮戊二酸进而变为氨基酸。而脂肪酸氧化产生的乙酰辅酶A