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文档简介

。Sp二步法步骤啊,具体如下:一、 1 烤片,65,2 小时;二、 二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水:二甲苯I 20min - 二甲苯II 20 min无水乙醇I 15min 无水乙醇II 15min - 95%乙醇10min- 80%乙醇10min- 70%乙醇10min 双蒸水10min三、 阻断灭活内源性过氧化物酶:3%H2O2 37 孵育10min,PBS冲洗3X5min;四、 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液(PH 6.0)中用煮沸(95,1520min),自然冷却20min 以上,至室温,PBS冲洗3X5min。五、 正常羊血清工作液封闭,3710 min,倾去勿洗.六、 滴加适当比例稀释的一抗4 冰箱孵育过夜或37孵育23 小时,PBS冲洗3X5min(用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照);七、 滴加生物素标记的二抗, 37孵育15min, PBS冲洗3X5min;八、 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液,37孵育 15min, PBS冲洗3X5min;九、 DAB显色:1ml双蒸水先加一滴A,混合均匀,再加B和C,再次混匀,三夜混合后,室温反应210min,显微镜下观察,有棕黄色沉淀物,即自来水冲洗,终止反应。十、 苏木素复染35min,盐酸酒精分化12s,常规脱水,透明,干燥,封片。欢迎您的下载,资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议,策

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