肿瘤遗传学(研究生)PPT课件.ppt

肿瘤遗传学 TumorGenetics 1 肿瘤 tumor 细胞增殖和分化失控所形成新生物 neoplasm 肿瘤的发生是一个多步骤的复杂过程 既受环境因素的影响 也有遗传因素的作用 2 环境因素 物理的 化学的和生物的致癌因子 遗传因素 基因碱基替换 缺失 插入和基因扩增等 染色体的数目和结构的异常 如非整倍体改变 易位等 表遗传学改变 如DNA甲基化型式改变 组蛋白修饰和染色质重塑等 3 肿瘤的流行病学研究 一 肿瘤发病率的种族差异 不同的种族和地区有着明显不同的癌发病率 4 中国人鼻咽癌发病率居世界各民族之首 即使移居国外也是如此 如在新加坡的中国人 马来人和印度人鼻咽癌发病率的比例为13 3 3 2 0 4 移居到美国的华人鼻咽癌的发病率也比美国白人高34倍 5 二 肿瘤的家族聚集现象 1 癌家族 cancerfamily 是指一个家族中有多个成员患一种或几种恶性肿瘤 发病年龄较早 通常按常染色体显性方式遗传 6 2 家族性癌 familialcarcinoma 是指一个家族内多个成员患同一类型的癌 5个世代52个成员患鼻咽癌的家系 3代14人患肝癌的家系 77对双生子 白血病的同卵双生一致率非常高 20对同卵双生子均患同一部位肿瘤 7 这些都说明遗传背景在肿瘤发病中的作用 不同的遗传背景 肿瘤的易感性不同 8 某些遗传病的癌变倾向 一 染色体病的癌变倾向21三体综合征患者中急性淋巴细胞白血病高达1 95 而群体发病率约为1 3000 Klinefelter综合征患者易继发乳腺癌或性腺母细胞瘤 Turner综合征患者的条索状卵巢则易恶变为卵巢癌 9 二 单基因病的癌变倾向良性肿瘤 常染色体显性遗传病 青春期或40岁左右恶变 1 家族性结肠息肉 familialpolyposiscoli FPC 2 型神经纤维瘤 neurofibromatosis NF1 3 基底细胞痣综合征 basalcellnevussyndrome 10 三 染色体不稳定综合征与恶性肿瘤以染色体不稳定性为特征的疾病或综合征统称染色体不稳定综合征 呈常染色体隐性遗传 其染色体易发生裂隙 断裂和重排等 这些综合征中发生肿瘤的风险增加直接与染色体自发断裂的频率增加有关 11 12 华中科技大学同济医学院医学遗传系杨真荣提供 13 Fanconi贫血 Fanconianaemia FA Bloom综合征3 毛细血管扩张性共济失调 ataxiatelangiectasia AT 4 着色性干皮病 xerodermapigmentosum XP 14 一些疾病的遗传背景 基础 促进肿瘤发生 或某些疾病的肿瘤易感性增高 15 遗传性恶性肿瘤 20世纪70年代初期 AlfredKnudson为解释遗传性 hereditary 和散发性 sporadic 视网膜母细胞瘤之间的关系时提出了肿瘤抑制基因的 二次打击 two hit 假说 16 Knudson 二次打击 two hit 假说 17 遗传性肿瘤第一次突变发生在生殖细胞 第二次突变则随机发生在体细胞中 这样的个体发病概率较高 非遗传性或散发性肿瘤的发生则需要同一个细胞在出生后积累两次突变 因而概率很小 18 19 20 肿瘤抑制基因失活方式 1 基因突变 点突变 移码突变 杂合性丢失 lossofheterozygosity LOH 等 2 表观遗传沉默 epigeneticsilencing 21 LOHmechanisms 22 23 LOHanalysis 24 3p VHL 3p25 3 10 2Mb MLH1 3p22 3 37 0Mb HYA22 3p22 3 37 9Mb CTNNB1 3p22 1 42 4Mb LIMD1 3p21 31 45 6Mb LTF 3p21 31 46 5Mb SEMA3B 3p21 31 50 3Mb HYAL1 3p21 31 50 3Mb RASSF1 3p21 31 50 3Mb RARB 3p24 2 25 2Mb FHIT 3p14 2 59 7Mb BAP1 3p21 1 52 4Mb TGFBR2 3p24 1 30 6Mb ROBO1 3p12 3 78 7Mb Gene Loaction Deletedandeliminatedregions AP20CER2CER1LUCAFERU2020 25 LOHatdifferentchromosomeregionsinbreastcancer 26 1 视网膜母细胞瘤 retinoblastoma RB 是小儿最常见的眼内肿瘤 可分为遗传型和散发型 1 约40 的病例属遗传型 呈常染色体显性遗传 通常大多在2岁内发病 且是双侧发病 可以有家族史 2 约60 的病例属散发型 一般在两岁后发病 并且大多为单侧发病 27 双侧视网膜母细胞瘤右眼已萎缩 28 29 视网膜母细胞瘤的系谱 AD遗传方式 30 散发性视网膜母细胞瘤 31 高分辨显带技术证明遗传型视网膜母细胞瘤患者均有13号染色体异常 主要是其长臂1区4带的缺失 32 最小重叠区 最小重叠区 最小重叠区 最小重叠区 对多个RB患者Chr缺失鉴定 最后确定SRO 13q14 33 Friend等通过进一步的研究从视网膜细胞中克隆了RB1基因的cDNA RB1基因共有27个外显子 长180kb RB1蛋白由928个氨基酸组成 34 2 遗传性非息肉病性大肠癌 hereditarynon polyposiscolorectalcancer HNPCC 呈常染色体显性遗传 家族病人早发 多发原发性大肠癌 另外还多发胃癌 子宫内膜癌 卵巢癌 乳腺癌 胰腺癌等恶性肿瘤 DNA错配修复基因 MLH1 MSH2 MSH6和PMS2 遗传性突变或表观遗传性沉默 35 年 国际合作组制定了该病的诊断标准 即 标准 家族中至少 人经病理确诊为结肠癌 且其中一人为其他 人的直系亲属 必须累及连续 代人 至少有一人大肠癌发病早于 岁 排除家族性腺瘤 该标准未考虑大肠外恶性肿瘤的重要性 于是制定了 标准 即家族中至少有 例以上患 相关癌 结直肠癌 子宫内膜癌 胃癌 卵巢癌 小肠癌 输尿管和肾盂癌 脑癌 胆管癌 皮肤癌 其他标准同前 36 日本HNPCC临床诊断标准 1 1级亲属中有3个或3个以上结直肠癌 2 1级亲属中2个或2个以上结直肠癌 并符合以下标准之一 结直肠癌诊断年龄小于50岁 右侧结肠癌 同时性或异时性结直肠多原发癌 伴同时性或异时性结肠外恶性肿瘤 37 中国人HNPCC家系筛检标准 2003年杭州 家系中至少有2例组织病理学明确诊断的大肠癌患者 其中的2例为父母与子女或同胞兄弟姐妹的关系 并且符合以下一条 1 至少1例为多发性大肠癌患者 包括腺瘤 2 至少1例大肠癌发病早于50岁 3 家系中至少1人患HNPCC相关肠外恶性肿瘤 包括胃癌 子宫内膜癌 小肠癌 输尿管或肾盂癌 卵巢癌 肝胆系统癌 38 BethesdaGuidelines 1997年 1 符合Amsterdam标准者 2 患两个HNPCC相关肿瘤者 包括同时或异时结直肠癌 或相关的结肠外恶性肿瘤 子宫内膜癌 卵巢癌 胃癌 肝胆癌或小肠癌 肾盂或输尿管移行细胞癌 3 结直肠癌患者 其一级亲属患有结直肠癌和 或 HNPCC相关恶性肿瘤和 或 结直肠腺瘤 并且其中一种癌患者诊断年龄 45岁 腺瘤患者诊断年龄 40岁 4 结直肠癌患者或子宫内膜癌患者 诊断年龄 45岁 5 右半结肠癌患者 组织病理为未分化癌 由不规则 实性片状排列的大嗜酸性细胞及小腺样区域组成的低分化或未分化癌 呈实体 筛孔状结构 诊断年龄 45岁 6 印戒细胞癌 印戒细胞成分多于50 患者 诊断年龄 45岁 7 腺瘤患者诊断年龄 40岁 39 RevisedBethesdaGuidelines 1 结直肠癌患者诊断年龄 50岁 2 同时或者异时存在HNPCC相关肿瘤 结直肠癌 子宫内膜癌 胃癌 卵巢癌 小肠癌 输尿管和肾盂癌 脑瘤 恶性胶质瘤 肝胆系统癌 胰腺癌 皮肤肿瘤 皮脂腺瘤或皮脂腺癌或角化棘皮瘤 3 结直肠癌组织学具有以下特性 肿瘤内淋巴细胞浸润 克隆样淋巴细胞反应 粘液或印戒细胞癌 髓样生长 并且患者年龄 60岁 4 结直肠癌患者有至少1例直系亲属患有结直肠癌相关肿瘤 且至少一例 50岁 5 结直肠癌患者有至少2例直系或第二级亲属患有结直肠癌相关肿瘤 无论年龄 40 遗传性非息肉病性大肠癌 HNPCC 系谱图 41 Mismatchrepairprocess 42 MSH2 MSH6 Recognitionofbase basemispairsandsinglebaseinsertion deletionmispairs 5 3 CCCCCCCC GGGG GGG 5 3 ATCGGCGC TAGCTGCG MLH1 PMS2 MSH2 MSH3 Recognitionofinsertion deletionmispairs 2 3basepairs 5 3 CACACACACA GTGT GTGT 43 Recognitionofbase basemispairsandsinglebaseinsertion deletionmispairs Recognitionofinsertion deletionmispairs 2 3basepairs 44 LossofDMMRleadstomicrosatelliteinstability MSI phenotypesinEC 45 MSIphenotypesinbreasttumours 46 在1997年的Bethesda会议上 国际合作组还推荐五个微卫星位点也就是Bethesda微卫星标记 BAT 25 4q12 BAT 26 2p21 22 D5S346 5q21 22 D2S123 2p16 和D17S250 17q11 2 12 进行肿瘤的微卫星不稳定性 MSI 检测 2 MSI High MSI H 1 MSI Low MSI L 0 MS Stable MSS 47 PCR或DNA复制过程中的链滑 strandslippage 机制 48 CAG 6 CAG 5 CAG 6 Forwardslippage PCR CAG 6 Backwardslippage DNAreplication CAG 7 CAG 6 CAG 6 CAG 5 CAG 4 CAG 7 CAG 6 N T N T 49 PCR方法对个体进行微卫星 CArepeat 多态性分型 50 GenemutationsinMSI gastrictumours SamplehMSH3hMSH6BAXTGF IIRIGFIIRNumber A 8 C 8 G 8 A 10 G 8887 88 9 10888 9810878 991197 88810 118 95567 87 889 108887 89 1088889 10 1189047 887 8 99 108 51 在MSI 肿瘤中 肿瘤相关基因如癌基因 KRAS和MYC等 和抗癌基因 TP53和DCC等 也被发现有突变 52 ImmunohistochemicalStainingforMismatch RepairProteinsinColorectalAdenocarcinomawithDeleteriousMutations MLH1 MLH1 MSH2 MSH2 MSH6 MSH6 PMS2 PMS2 53 MLH1U MLH1M AbsenceofMLH1ExpressioninTumorswithMLH1Methylation Simpkinsetal HumMolGenet1999 54 3 遗传性胃癌 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一 部分胃癌 约10 的发生与遗传有一定的关系 遗传性胃癌分为家族性肠型胃癌 familialintestinalgastriccancer FIGC 和遗传性弥漫性胃癌 Hereditarydiffusegastriccancer HDGC 55 FIGC的发生的遗传学基础目前尚不十分清楚 HDGC与上皮型钙粘蛋白 E cadherin CDH1 基因突变有关 为常染色体显性遗传 其特点包括 基因外显率高 70 80 发病年龄早 平均38岁 病理类型一致 均为弥漫性胃癌 皮革胃 56 1998年汉城国际遗传会议制定遗传性胃癌标准该标准 家族中至少有3人患相同疾病 其中一人为另两人的直系亲属 至少连续两代人患病 家族中的患者至少有1人于45岁之前被确诊 至少满足以上标准中的两项标准 57 StructureoftheE cadherin 16q22 1 100kb 16exons 882aa 120kDa 58 E cadherin mediatedcell celladhesion E cadherinasagrowthsuppressor 59 CDH1mutationsfoundtodate 60 ThegermlinesplicesitemutationofCDH1wasaGtoAsubstitutioninthisfamily skinbiopsy 61 SequencingofthePCRproductsshowedtheexpectednucleotidechangesassociatedwithbisulphitemodificationinthemethylatedandunmethylatedallelesoftheE cadherinfromgastriccancerpatient 62 A AnalysisofmethylationofE cadheriningastricmucosafrompatientswithdyspepsia B AnalysisofmethylationofE cadheriningastricmucosafrompatientswithdyspepsia asshownin A butwithMSPperformedwiththesecondprimerset C AnalysisofmethylationofE cadherininintestinalmetaplasia IM gastricadenocarcinomas T andmetastaticlymphnodes LN frompatientswithgastriccancer 63 E cadheringenemutationsinlobularbreastcancer 64 LOHatE cadherinlocusinlobularbreastcancer 65 E cadherinstaininginlobularbreasttumour 66 E cadheringenemutationsinasetof40lobularbreastcancer 67 AbnormalexpressionofE cadheringeneinbreastandgastriccancer 68 E cadherin表达障碍常见于分化差的乳腺小叶癌 lobularbreastcancer 和弥散性胃癌 diffusegastriccancer 而这些肿瘤易发生转移 69 肿瘤与染色体畸变 染色体畸变 chromosomeaberration 是许多肿瘤的共同特征 包括染色体数目和结构异常 1 肿瘤的染色体数目异常正常人体细胞为二倍体细胞 许多肿瘤细胞中均可见染色体数目异常 包括整倍体和非整倍体或异倍体改变 70 肿瘤细胞异倍体染色体数目的标准范围 71 2 肿瘤的染色体结构异常 1 主要包括易位 倒位 缺失 插入 等臂染色体 双微体和均染区等 2 双微体 doubleminutes DM 是非常小的成双的无着丝粒染色体断片 均染区 homogenouslystainingregion HSR 是染色体经过显带技术处理而表现为不显带纹并呈均一着色的均匀染色区域 可以认为DM HSR的存在是癌基因扩增的表现 72 73 均质染色区 HSR 和双微 DM 74 标记染色体 markerchromosome 在同一肿瘤内较多细胞出现的同一结构异常的染色体 标记染色体分为两种 一种是非特异性的 它只见于少数肿瘤 对该类肿瘤来说不具有代表性 另一种是特异性的 它经常出现在某一类肿瘤 对该肿瘤具有代表性 75 76 77 慢性粒细胞性白血病 CML 的染色体异常 1 Nowell及Hungerford于1960年发现慢性粒细胞性白血病 CML 患者的血液细胞中有一个小于G组的22q 染色体 由于首先在美国费城 Philadelphia 发现 故命名为Ph染色体 78 2 最初认为是22号染色体的长臂缺失所致 后经显带证明是9号和22号染色体长臂易位的结果 3 易位使9号染色体长臂 9q34 上的原癌基因c abl和22号染色体 22q11 上的bcr breakpointclusterregion 基因重新组合成融合基因 后者编码活性增高了的酪氨酸激酶 可促成细胞的恶性转化 79 Ph染色体的形成 80 82 Ph的重要临床意义在于 1 90 95 的慢性粒细胞性白血病病例都是Ph阳性 因此它可以作为诊断依据 2 可用以区别临床上相似 但Ph为阴性的其它血液病 如骨髓纤维化等 3 有时Ph染色体先于临床症状出现 故又可用于早期诊断 4 已知Ph阴性的慢性粒细胞性白血病患者对治疗反应差 预后不佳 83 Burkitt淋巴瘤 非洲儿童恶性淋巴瘤 的染色体异常 1 在约90 的Burkitt淋巴瘤病例中可以见到一个长臂增长的14号染色体 14q 这是一条8号染色体长臂末端的一段 8q24 易位到了14号长臂末端 14q32 形成了8q 和14q 两个异常染色体 2 这种易位使位于8q24处的原癌基因MYC移至位于14q32处的免疫球蛋白重链基因IGH的毗邻下游 84 14q 染色体形成示意图 85 3 约10 的Burkitt淋巴瘤患者肿瘤细胞有t 2 8 p12 q24 或t 8 22 q24 q11 2和22号染色体分别带有免疫球蛋白轻链 基因IGK和免疫球蛋白轻链 基因IGL 4 IGH IGL和IGK基因因有增强子的作用而不断表达 86 87 5 正常情况下 MYC基因的表达被严格调节 仅在B淋巴细胞成熟的后期表达 易位后 MYC基因受IGH或IGL或IGK增强子的影响 其表达水平很高 不适当的超表达导致细胞过度增殖 从而诱导肿瘤的发生 88 实体瘤的染色体改变 89 肿瘤相关基因 癌的生成涉及多种基因 单独一种基因的突变不足以致癌 多种基因变化的积累才能引起控制细胞生长和分化的机制紊乱 Turninganormalcellintoamalignantcancercellrequiresperhapssixspecificmutationsintheonecell 90 Ifatypicalmutationrateis10 7pergenepercell itisextremelyunlikelythatanyonecellshouldsuffersomanymutations whichiswhymostofusarealive Theprobabilityofthishappeningtoanyoneofthe1013cellsinapersonis1013 10 42 or1in1029 91 Cancerhappensbecauseofacombinationoftwomechanisms Somemutationsenhancecellproliferation creatinganexpandedtargetpopulationofcellsforthenextmutation 92 Multistageevolutionofcancer Eachsuccessivemutationgivesthecellagrowthadvantage sothatitformsanexpandedclone Ifeachclonehas103cells P 10 7x10 7x103x10 7x103x10 7x103x10 7x103x10 7x103x1013 10 14 4 5 6 93 Somemutationsaffectthestabilityoftheentiregenome ateithertheDNAorthechromosomallevel increasingtheoverallmutationrate DirectrepairreversestheDNAdamage AspecificenzymeisabletodealkylateO6 alkylguaninedirectly Baseexcisionrepair BER usesglycosidaseenzymestoremoveabnormalbases 94 Nucleotideexcisionrepair NER removesthyminedimersandlargechemicaladducts Post replicationrepairisrequiredtocorrectdouble strandbreaks Theusualmechanismisageneconversion likeprocess recombinationalrepair MismatchrepaircorrectsmismatchedbasepairscausedbymistakesinDNAreplication 95 FourcategoriesofDNArepairsystem baseandnucleotide 96 两类基因 癌基因 oncogene 抑癌基因 cancersuppressorgene 也称肿瘤抑制基因 tumorsuppressorgene TSG 或抗癌基因 anti oncogene 97 一 癌基因 1 功能是促进细胞的生长 可引起细胞的恶性转化 2 来自细胞的称为细胞癌基因 c onc 或原癌基因 proto oncogene 可被激活成为癌基因 来自病毒的称为病毒癌基因 v onc 98 3 依其编码产物功能分类 生长因子 sisPDGF生长因子受体 erbB1EGFR信号传递因子 Ras核转录因子 mycJUNFOS 99 癌基因产物在细胞内的分布 100 101 102 4 在通常情况下 其表达受到严格的控制 当其发生突变或被异常激活时 产生的癌蛋白在性质或数量上出现异常 就可能导致细胞发生恶性转化 103 6 原癌基因的激活 病毒诱导 反转录病毒感染细胞后 其基因组所携带的长末端重复序列 longterminalrepeat LTR 内含较强的启动子和增强子 插入到c onc附近或内部 使之激活 104 105 106 反转录病毒感染细胞后 其基因组插入到宿主细胞基因组内部 107 基因扩增 geneamplification 是基因组中原癌基因在特殊条件下复制多次使拷贝数增加 而其它基因无增加的现象 基因扩增在大多数情况下随后出现基因的过度表达 over expression 双微体 doubleminutes 和染色体上的均染区 homogenouslystainingregion 两种表现形式 108 均质染色区 HSR 和双微 DM 109 人肿瘤中细胞原癌基因扩增举例 110 染色体重排 chromosomerearrangement 已在许多血液系统恶性肿瘤和实体瘤中鉴定了由于染色体重排导致的原癌基因激活 染色体重排后可形成新的融合基因 fusiongene 产生异常的融合蛋白而使细胞转化 染色体重排也可改变基因的调节 111 112 点突变 pointmutation 体细胞内的原癌基因可以因点突变而激活成为癌基因 113 原癌基因RAS家族的点突变 114 115 单个碱基突变改变了编码蛋白质的存在形式而使癌基因激活 K rasN rasH ras RAS有GTPase活性 GTPase激活蛋白 GAP GAP 116 二 肿瘤抑制基因 1 功能是抑制细胞的生长和促进细胞的分化 2 当两个等位基因突变或缺失而丧失功能 即处于纯合失活状态时 细胞就会因正常抑制的解除而恶性转化 3 一般分成两组 把关基因 gatekeeper 和管护基因 caretaker 117 把关基因通过抑制细胞增殖或促进细胞凋亡 apoptosis 直接控制肿瘤的发生和演进 管护基因关系到DNA修复和维护基因组的完整性 它们的失能可增加把关基因 原癌基因等癌相关基因的突变速率 进而促进肿瘤的发生和演进 118 视网膜母细胞瘤的RB基因是一个典型的把关基因 抑制 激活 119 RB基因定位于13q14 约200kb 有27个外显子 编码的蛋白P105含928个氨基酸 RB蛋白在60 以上已研究过的人类肿瘤中失活 其失活可通过多种不同的机制实现 包括基因突变 表观遗传沉默 RB蛋白磷酸化 或者RB1蛋白与DNA肿瘤病毒的癌蛋白结合 120 DNA错配修复基因 MLH1 MSH2 MSH6和PMS2 是典型的管护基因 MSH2 MSH6 Recognitionofbase basemispairsandsinglebaseinsertion deletionmispairs 5 3 CCCCCCCC GGGG GGG 5 3 ATCGGCGC TAGCTGCG MLH1 PMS2 MSH2 MSH3 Recognitionofinsertion deletionmispairs 2 3basepairs 5 3 CACACACACA GTGT GTGT 121 肿瘤抑制基因及其产物 122 肿瘤发生的遗传学说 一 肿瘤的单克隆起源假说 1 除少数例外 癌是原始的 单个细胞增殖的后代 即癌为单克隆起源 123 2 有许多证据证明肿瘤的克隆特性 B或T细胞淋巴瘤的所有细胞都有相同的免疫球蛋白基因或T细胞受体基因重排 对女性肿瘤的研究发现 一些恶性肿瘤的所有癌细胞都含有相同失活的X染色体 124 二 肿瘤的多步骤损伤学说从正常细胞到形成临床上可检测的肿瘤往往需要经过一个很长的时期 有多种遗传因素参与 125 PC突变DNA RAS CC突变P53突变转移LOH甲基化突变LOHLOH相关基因 5q 12p 18q 17p 正常上皮上皮增生早期腺瘤中期腺瘤晚期腺瘤结肠癌转移 大肠癌形成的模式图 FearonandVogelstein 126 大肠癌 127 有癌家族史的大肠癌10 30 128 2002年世界范围内男性大肠癌发病率 129 2002年世界范围内女性大肠癌发病率 130 中国城市大肠癌发病率抽样调查结果 大肠癌发病率 105 城市1988 19921993 1997变化男女男女哈尔滨14 614 817 313 6 北京16 116 718 718 9 天津13 212 816 716 0 上海27 126 833 332 1 武汉11 911 214 113 5 中国试点市 县恶性肿瘤的发病与死亡中国医药科技出版社北京 中国2002 131 中国城市大肠癌死亡率抽样调查结果 大肠癌死亡率 105 城市1988 19921993 1997变化男女男女哈尔滨7 87 57 86 8 北京9 410 410 910 7 天津5 76 06 97 6 上海15 215 118 817 9 武汉7 27 27 67 6 中国试点市 县恶性肿瘤的发病与死亡中国医药科技出版社北京 中国2002 132 大肠癌的分期与存活率 分期Dukes分期TNM分期5年存活率 DukesA期T1 2 N0M0 90 ADukesB期T3 N0M060 85 BDukesB期T4 N0M0 ADukesC期T1 2 N1M025 65 BDukesC期T3 4 N1M0 CDukesC期T任何 N2M0 DukesDT任何 N任何M15 7 133 大肠癌早期诊断的策略自然人群普查癌前病变随访遗传家族预测 134 大肠脱落细胞 正常大肠粘膜上皮脱落1 5 1010 24小时收集方案腹泻法普通粪便法检测方法普通光镜法IHC分析方法DNA指数分析法基因检测 联合多项癌基因和抗癌基因检测 135 基因检测 RAS MYC erB2等癌基因突变检测 APC MCC DCC p53及RB等抑癌基因突变及启动子区域甲基化分析 用五个微卫星标记 BAT25 BAT26 D2S123 D5S346 和D17S250 进行MSI分析 对5号 17号和18号染色体进行LOH检测 136 晚期成团癌细胞 137 早期癌细胞 138 粪便中的淋巴瘤细胞 139 大肠癌的发生率在逐年上升 近年美国已达46 10万 国内一些比较发达的城市已达30 10万 因此大肠癌已成为发达国家和地区导致死亡的主要疾病之一 年全世界大肠癌的发病数估计在94万左右 约有10 为遗传性 其中遗传性非息肉性结直肠癌 HNPCC 是遗传性大肠癌最普遍的一种形式 为常染色体显性遗传病 占总的大肠癌 CRC 发生率的2 7 140 表观遗传学 指以不涉及到核苷酸序列的改变 但可以通过有丝分裂和减数分裂进行遗传的生物现象为内容的生命学科 通过DNA的甲基化 组蛋白修饰 染色质重塑和非编码RNA调控等方式来控制表观遗传的沉默 141 ChangesinDNAmethylationduringmammaliandevelopment 142 McGarvey K M etal CancerRes2006 66 3541 3549 表观遗传沉默 143 Protein mRNA epigeneticsi