紫外可见分光光度计测人参总皂苷.doc

人参总皂苷Renshen ZongzaoganTOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT本品为五加科植物人参JPanaa:ginsengC. A. Mey.的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1. 5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D 1 0 1型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用6 0 %乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06?1.08(80C)的清膏，干燥，粉碎，即得。【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，昧苦;具吸湿性。本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙米或石油米中几乎不溶。【鉴别】（1)取本品O.lg，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。(2)取本品O.lg，加甲醇10ml使溶 解，作为供试品溶液;另取人参对照药材lg，加水100ml煎煮2小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1cm，柱高为15cm) ,用水洗至无色，弃去水液，再用6 0 %乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残淹加甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人参皂苷R b i对照品、人参皂苷R gl对照品与人参皂苷R e对照品，加甲醇溶解制成每lml各含2 m g的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述三种溶液各2M1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15 : 40 : 22 : 10) 1 0 1以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 0 %硫酸乙醇溶液，在105C加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365mn)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。【检査】粒度依法检查（通则0982第二法），能通过1 2 0目筛的粉末不少于95%。干燥失重取本品，在105C干燥至恒重，减失重量不得过5.0%(通则0831) o总灰分不得过6 . 0 % (通则2302)。炽灼残渣不得过6 . 0 % (通则0841)。重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321)测定，铅不得过3mg/kg;镉不得过0. 2mg/kg;砷不得过2mg/kg;汞不得过0. 2mg/kg;铜不得过20mg/kg。有机氣农药残留量照农药残留量测定法(通则2341有机氯类农药残留测定法第一法）测定：六六六（总BHC)不得过0. lmg/kg;滴滴涕（总D D T )不得过lmg/kg;五氯硝基苯(PCNB)不得过0. lmg/kg。【特征图谱】照高效液相色谱法(通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为2 5 c m，内径为4 . 6 m m，粒径为5 / n in，载碳量11%);以乙腈为流动相A，以0 . 1 %磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为3 0 C ;流速为每分钟1. 3ml;检测波长为203mn。理论板数按人参皂苷R e峰计算应不低于6 0 0 0，按人参皂苷R d峰计算应不低于200 000。时间(分钟） 流动相A ( % )流动相B ( % )0?30 19 8130?35 19-24 81 7635?60 24 40 76 60参照物溶液的制备取人参皂苷R gl对照品、人参皂苷R e对照品和人参皂苷R d对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每lml含人参阜苷Rgi 0. 3 m g、人参阜背Re 0. 5m g和人参皂苷Rd 0. 2 m g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品30mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇超声处理使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10pl，注入液相色谱仪，测定，即得。供试品特征图谱中应呈现7个特征峰，其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同，与人参皂苷R d参照物峰相应的峰为S峰，计算特征峰3?7的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的 5 %之内，规定值为：0. 84 (峰3)、0. 91(峰4)、0. 93(峰5)、0. 95(峰6)、1. 00(峰7)。对照特征图谱峰1 :人参皂苷R g i峰2 :人参皂苷R e峰3:人参皂苷R f峰4 :人参皂苷Rln峰5 :人参皂苷R c峰6:人参皂苷R b 2峰7(S)：人参皂苷R d【含量测定】人参总皂苷对照品溶液的制备取人参皂苷R e对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含l m g的溶液，即得。标准曲线的制备精密吸取对照品溶液20x1、40M1、80/!_11、120?11、160)、2 00|，分别置于具塞试管中，低温挥去溶剂，加入1 %香草醛高氯酸试液0. 5ml，置60C恒温水浴上充分混匀后加热15分钟，立即用冰水冷却1分钟，加人77%硫酸溶液5ml，摇匀；以试剂作空白。消除气泡后照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在5 4 0 n m的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。测定法取本品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5(1，照标准曲线的制备项下的方法，自“置于具塞试管中”起依法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷R e的量，计算结果乘以0. 84，即得。本品按干燥品计，含人参总皂苷以人参皂苷Re(C48H 820 18)计，应为6 5 %?85%。人参皂苷R &、R e、R d照高效液相色谱法（通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A ,以0. 1 %磷酸溶液为流动相B，按特征图谱项表中梯度进行洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷R e峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取人参皂苷R gl对照品、人参皂苷R e对照品和人参皂苷R d对照品适量，精密称定，加甲醇制成l m l中含人参阜苷Rgi 0. 30mg，人参阜苷Re 0. 5 0 m g和人参皂苷Rd 0. 2 0 m g的混合溶液。供试品溶液的制备取特征图谱项下的供试品溶液，即得。测定法分别精密吸取供试品溶液10