动物细胞工程(知识梳理)PPT课件.ppt

第三节动物细胞工程 选修3第二章细胞工程 1 主要内容 动物细胞与组织培养 动物细胞核移植技术 动物细胞融合 单克隆抗体制备 4 1 2 3 动物细胞工程常用技术手段包括 2 一 动物细胞与组织培养 学习目标 1 简述动物细胞培养的过程 条件及应用2 对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理 条件 结果 培养目的 请自主完成导学案课前预习部分 3 一 动物细胞与组织培养 1 概念 1 材料 取自动物或动物的器官或组织 2 场所 在模拟动物 3 目的 使动物细胞或组织继续 并维持原有的和 4 一 动物细胞与组织培养 2 过程 1 动物细胞培养 取动物组织块剪碎 用处理 形成分散的 此称细胞悬液 然后接种到中培养 待细胞分裂形成一层细胞 转移到新培养液中继续培养 2 动物组织培养 剪取动物组织块 用冲洗 将组织块移入 使组织块在培养瓶的瓶壁上 称贴壁培养 5 一 动物细胞与组织培养 3 培养的条件 1 环境条件 包括 和等 温度 哺乳动物多以 为宜 PH值 多数细胞生存的最适pH为 气体 细胞培养所需气体主要有和 是细胞代谢所必需的 CO2的主要作用是维持培养液的 营养成分 有等 6 一 动物细胞与组织培养 2 培养基 天然培养基 取自 和等 其特点是 合成培养基 人工配制 仍需加入 其特点是成分 便于实验条件的控制 7 一 动物细胞与组织培养 4 培养类型 1 原代培养 概念 从机体取出组织或细胞的 一般培养10代左右 特点 细胞的未发生很大改变 应用 药物测试 等试验 2 传代培养 由于的限制和的消耗 导致细胞生长和增殖减缓 需要将原代细胞培养的细胞 转移到中继续培养 一般可继续培养代左右 8 一 动物细胞与组织培养 5 技术的应用 用于 和等领域 补充概念 细胞株 原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞 大部分细胞衰老死亡 少数细胞存活到40 50代 这种传代细胞为细胞株 细胞系 细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态 只有部分细胞由于遗传物质的改变 使其在培养条件下可以无限制传代 这种传代细胞为细胞系 细胞株和细胞系的区别 细胞系的遗传物质改变 具有癌细胞的特点 失去接触抑制 容易传代培养 9 动物胚胎或幼龄动物的组织 器官 取材 细胞悬液 10代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 分解细胞间的蛋白 过程 动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质 3 19 2020 10 一 动物细胞与组织培养 补充概念 细胞贴壁 在培养瓶中 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上 称为细胞贴壁 接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面接触时 细胞就会停止分裂增殖 这种现象叫做接触抑制 11 细胞贴壁过程 那么什么是接触抑制 3 19 2020 12 接触抑制 细胞在贴壁生长过程中 随着细胞分裂 数量不断增加 最后形成一个单层 此时细胞间相互接触 细胞分裂和生长停止 数量不再增加 接触抑制 部分细胞突变 获得不死性 向癌细胞方向发展 糖蛋白减少 3 19 2020 13 一 动物细胞与组织培养 探究 1 在动物细胞培养过程中 为什么选择胚胎期或幼龄动物的器官和组织 2 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理 胃蛋白酶不行吗 3 动物细胞培养与植物细胞培养相同吗 动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体 14 植物组织培养和动物细胞培养的比较 3 19 2020 15 二 细胞核移植与动物体细胞克隆 1 克隆 指遗传上完全相同的 或来自同一祖先的生物个体的 2 动物体细胞克隆 将供体体细胞的与受体去核卵细胞的进行人工组合 借助于卵细胞的发育能力 经过培养发育成进而形成新个体的技术 其关键是技术 利用的是动物细胞核的性 3 细胞核移植 利用技术等将某种动物细胞的移入同种或者异种动物的的技术 16 二 细胞核移植与动物体细胞克隆 4 大致过程如下 动物克隆 17 二 细胞核移植与动物体细胞克隆 细胞质 细胞核 细胞核移植 18 二 细胞核移植与动物体细胞克隆 5 克隆技术应用 在克服动物杂交繁殖障碍 创造等方面具有重要意义和潜在经济价值 在医药卫生领域 人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成相应的组织 器官 可用于组织器官的 治疗性克隆 此外 还能利用克隆技术保护和挽救 但是目前克隆技术并不成熟 仍存在某些问题 有待进一步完善 19 二 细胞核移植与动物体细胞克隆 讨论 1 动物核移植技术选择的受体细胞为什么是卵细胞 2 你认为用体细胞核移植方法生产的克隆动物 是对体细胞供体动物进行了100 的复制吗 为什么 3 阅读课本56页积极思维 从社会伦理道德方面思考生殖性克隆会引发哪些社会问题 4 分析图2 12的技术路线 找出生殖性克隆与治疗性克隆的区别 以及应该阻断哪一步来阻止生殖性克隆 5 讨论克隆技术的应用和前景 20 21 三 动物细胞融合与单克隆抗体 一 动物细胞融合1 概念 是指或结合形成一个细胞的过程 2 诱导动物细胞融合的方法 物理法 常见的诱导因素有化学法 生物法 等 3 应用 制造 22 三 动物细胞融合与单克隆抗体 二 单克隆抗体1 制备过程 1 能产生抗体的细胞是 能够无线增殖的细胞 2 利用融合 检验和筛选杂交细胞 3 该杂交细胞 并筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 杂交瘤细胞的特点是 4 在或者中培养杂交细胞 获取单克隆抗体 单克隆抗体的优点 23 24 三 动物细胞融合与单克隆抗体 2 单克隆抗体的应用 单克隆抗体具有 和优点 主要用于治疗疾病和运载药物 如治疗 等 25 准确 高效 简易 快速 单克隆抗体最主要的优点 特异性强 灵敏度高 并能大量制备 诊断试剂 最广泛应用 2020 3 19 26 生物导弹 单克隆抗体 药物单抗导向 药物为弹头 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗 单克隆抗体作为载体 运载抗癌药物 形成 生物导弹 准确杀伤癌变细胞 2020 3 19 27 三 动物细胞融合与单克隆抗体 探究 1 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 完成表格 28 三 动物细胞融合与单克隆抗体 2 制备单克隆抗体时 为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞 在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞 3 制备单克隆抗体的过程有两次筛选 两次筛选的目的是什么 29 BB B瘤 瘤瘤 B 瘤 一选 选择性培养基 只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 二选 选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点 既能产生特异性抗体 又能大量增殖 2020 3 19 30 三 动物细胞融合与单克隆抗体 小结以下内容 制备单克隆抗体原理 利用 产生特异性抗体的功能 利用 无限增殖的特性 利用 技术将