临床检验仪器重点

灵敏度：检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比，即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力，它反映仪器能够检测的最小被测量。误差：当对某物理量进行检测时，所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差，误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。最小检测量：检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化，此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。重复性：在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下，在一个不太长的时间间隔内，连续多次检测同一参数，所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关，重复性反映一台设备固有误差的精密度。精度：对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价，是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念，其高低是用误差来衡量的，误差大则精度低，误差小则精度高。可靠性：仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。临床检验仪器特点：1涉及的技术领域广2结构复杂3技术先进4精度高5对使用环境要求严格临床检验仪器分类:1分离分析检验仪器2光谱分析检验仪器3目视检验仪器4细胞及其分子生物学检验仪器5临床检验常规仪器6其他临床检验仪器临床检验仪器主要结构：取样装置；预处理系统；分离装置；检测器；信号处理系统；显示装置；补偿装置；辅助装置；样品前处理装置。临床检验仪器选用标准：1要求仪器的精度和分辨率等级高、应用范围广、检测范围宽、稳定性好和重复性好、灵敏度高、误差和噪声小、响应时间短。2要求仪器的检测速度快、检测参数多，结果准确可靠，可靠性好。3用户操作程序界面全中文显示，操作简单，快捷。4有国内生产的配套试剂盒供应5仪器不失效的性能、寿命、可维修性和仪器的保存性能好。6能充分体现高效益、低成本全实验室的自动化（TLA）：又称全程自动化，是指将临床实验室中相互有关或互不相关的自动化仪器串联起来，构成流水线作业的组合，形成大规模的全检测过程的自动化。临床检验仪器正朝着自动化、智能化、标准化、个性化以及小型便携化的方向发展。离心机的工作原理：离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降，从而使溶液得以分离。颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度，把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。离心力(Fc)：由于物体旋转二产生脱离旋转中心的力，也是物体做圆周运动所产生的向心力的反作用力。差速离心法：是利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀的离心方法。所以这个方法又称为分步离心法。密度区带离心法：又称为区带离心法，是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡，在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。速率区带离心法：速率区带离心方法是根据分离的粒子在离心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。等密度区带离心法：当不同颗粒存在浮力密度差时，在离心力场下，颗粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上（即等密度点）形成区带，称为等密度区带离心法。光学显微镜的工作原理：显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统，是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜，而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距离反射照明：低档普通生物显微镜仅使用凹面反射镜反射自然光而不经聚光器直接给标本照明。也有使用聚光器的，同时使用凹面或平面反射镜，但光源是自然光。临界照明：使用电光源，照明光经聚光器后再照亮标本。由于光源经聚光器透镜所成的像是和标本所在平面近于重合，既影响观察又可能会因像的亮度的不均匀使标本的照明不均匀。尽管它有着这样的缺点，但因有结构简单的优势而用于普通显微镜。柯拉照明：可以克服临界照明的缺陷，保证标本的均匀照明。这是一种用在透射光与亮视场中的标准照明方式这种照明方式使物平面界限清晰、照明均匀，效果比较满意使用荧光显微镜的注意事项:1观察对象必须是可自发荧光或已被荧光染料染色的标本2载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光物质3选用最好的滤片组4荧光标本不能长期保存5严禁在开机15分钟内关机，严禁频繁开关机6若暂不观察标本，可阻光光帘阻挡光线7长时间观察时，应阻挡紫外线的护目镜。紫外-可见分光光度计原理：光照射到物质可发生折射、反射和透射，一部分光会被物质吸收。光被吸收后，其能量常以热的形式释放出来，这种能量一般察觉不到，但可以利用测量物质对某波长光的吸收来了解物质的特性。不同的物质会吸收不同波长的光，改变入射光的波长，并依次记录物质对不同波长光的吸收程度，就会得到该物质的吸收光谱。每一种物质都有其特有的吸收光谱，因此可以根据吸收光谱来分析物质的结构、含量和纯度。单光束的、分光光度计的特点：1从光源到试样只有一个光通道，依次对参考样品和待测样品进行测试，然后将两次数据进行比较计算，获得最终结果2只有一个色散元件，工作波长范围较窄3采用直接接受放大显示的简单电子系统，用电表或数字显示4结构简单、附件少、功能范围小，不能做特殊测试测定。血细胞分析仪(BCA):是对一定体积全血内血细胞数量和异质性进行自动分析的常规检测仪器。主要功能是血细胞计数、白细胞分类、血红蛋白测定、相关参数计算。血细胞分析仪测定血红蛋白的原理：血细胞悬液加入溶血剂后，红细胞溶解释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统。在特定的波长（530550nm）下进行光电比色，吸光度值与所含血红蛋白含量成正比，经仪器计算显示出血红蛋白浓度。血细胞分析仪的基本结构：机械系统；电学系统；血细胞监测系统；血红蛋白测定系统；计算机控制系统。血细胞分析仪常见堵孔原因与处理方法:1仪器长时间不用，试剂中的水分蒸发、盐类结晶堵孔，可以用去离子水浸泡，待完全溶解后，按CLEAN键清洗2末梢采血不顺或用棉球擦拭微量取血管3抗凝剂量与全血不匹配或静脉采血不顺，有小凝块4小孔管微孔蛋白沉积多，需清洗5样品盖未盖好，空气中的灰尘落入杯中。后四种原因，一般按CLEAN键进行清洗，若不行，需小心卸下检测器，按仪器说明书进行处理。血凝仪的主要检测方法有：凝固法；底物显色法；免疫学法；干化学法。其中凝固法最常用简单。血液流变学：是研究血液宏观流动性质，人和动物体内血液流动和细胞变形，以及血液与血管、心脏之间相互作用、血细胞流动性质及生物化学成分、血液及其组分流动和变性规律的一门科学。血液流变分析仪器（HA）：对全血、血浆或血细胞流变特性进行分析的检验仪器，只要有：血液粘度计；红细胞变形测定仪；血小板聚集仪；红细胞电泳仪；血沉分析仪。尿液分析仪的检验原理：把试剂带浸入尿液中后，除了空白块外，其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应产生了颜色变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关，颜色越深，相应某成分浓度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越小；反之，反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系，而色的深浅又与尿中各种成分的浓度成比例关系，所以只要测得光的反射率就可以求得尿液中各种成分的浓度。自动生化分析仪：是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保湿反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告，以及试验后的清洗等步骤自动化的仪器。连续流动式自动分析仪原理：是通过比例泵将样品和试剂按比例吸入到连续的管道系统中，混合并透析去除干扰物，在一定条件下保湿、显色、比色、信号放大并运算处理。自动生化分析仪的参数：包括基本分析参数和特殊分析参数，基本分析参数是检测的前提条件，没有则无法进行检测，特殊分析参数与检测结果准确性有关，不设定也能检测项目，但可能导致结果不准确。电解质分析仪的基本结构：电子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制电路、驱动电机和显示器组成。血气分析仪是利用电极对人体血液中的酸碱度（pH值）、二氧化碳分压和氧分压进行测定的仪器。血气分析仪工作原理：仪器测量过程中，被测血液样品在管路系统的抽吸下，进入样品室内的测量毛细血管中。测量的毛细血管的管壁上开有几个空，孔内分别插有pH、PCO2和PO2等测量电极和一支参比电极。其中，pH电极和pH参比电极共同组成对pH值的测量系统。血液样品进入样品室的测量管后，管路系统停止抽吸，样品中pH值、CO2的分压和O2的分压同时被这些电极所感测。微生物鉴定的自动化系统大致分为两类：一类是自动血培养检测和分析系统。主要功能是检测标本中是否有微生物存在。另一类是自动微生物鉴定及药敏分析系统。主要是将分离的微生物进行鉴定，同时进行抗菌药物敏感试验。自动血培养基基本原理：自动血培养系统主要由培养系统和检测系统组成。培养系统包括培养基、恒温装置和振荡培养装置。其工作原理主要是通过自动监测培养基中的浑浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物的变化，定性的检测微生物的存在。自动血培养系统的性能特点：1培养及营养丰富2以连续、恒温、振荡方式培养3培养瓶多采用不易碎材料制成4采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式5自动连续监测6阳性结果报告及时，并经打印显示或报警提示7培养瓶多采用双条形码技术8培养瓶可在随时放入培养系统，并进行追踪检测。9数据处理功能较强10设有内部质控系统11检测范围广泛。药敏测试板分为常规测试板（原理为比浊法）和快速荧光测试板（荧光法）微生物自动鉴定及药敏分析系统的性能：自动化程度高功能范围大检测速度快系统具有较大的细菌资料库使用一次性测试卡或测试板数据处理软件功能强大软件和测试卡大多可不断升级更新设有内部质控系统酶免疫分析可分为均相酶免疫测定和非均相（固相和液相）。酶标仪不同之处在于比色液的容器不是比色皿，而是塑料微孔板；以垂直光束通过微孔板中的待测液。酶免疫分析仪的性能评价：滤光片波长精度检查及其峰值测定灵敏度和准确度通道差与孔间差检测零点漂移精密度评价线性测定双波长测定发光免疫分析法根据示踪物检测不同分为荧光免疫测定、化学发光免疫测定及电化学发光免疫测定。全自动化学发光免疫分析系统仪器测定原理主要包括竞争反应法（小分子抗原物质测定）和夹心法（大分子）。仪器组成：主机和微机。闪烁体：是将核辐射能激发分子转化成可探测闪光的荧光物质。光电倍增管：能有选择的把闪烁体发出的极弱闪光的一部分转化成电信号。基本结构：光电转化、电子倍增和电子收集装置。免疫比浊分析仪：根据检测原理不同分为透射比浊法（浊度测定法和胶乳浊度测定法）和散射比浊法（终点法和速率法）。免疫透射比浊测定原理：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物。使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准晶对照，即可计算出未知蛋白质的含量。激光散射浊度测定分为终点散射比浊法和速率散射比浊法。时间分辨荧光免疫检测原理：用镧系三价稀土离子及其螯合物作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质；当免疫反应发生后，根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特点（特异性强、巨大Stokes位移、荧光寿命长），用时间分辨荧光分析仪延缓测量时间，排除标本中非特异性荧光的干扰，所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异荧光，测定免疫反应最后产物的特异性荧光信号。时间分辨荧光免疫分析仪特点：特异性强灵敏度高标记物稳定荧光信号强。即时检验仪器的特点：仪器小型化，便于携带操作简单化，一般3-4个步骤即可完成检测缩短检验周期，报告即时能获得权威机构的质量认证仪器和配套试剂中应配有质控品，可检测仪器和试剂的工作状态仪器检测项目具备临床价值和社会学意义仪器的检测费用合理仪器试剂的应用不会造成对患者和工作人员的健康损害或对环境的污染等。PCR核酸扩增仪的控温方式：水浴锅控温压缩机控温半导体控温离心式空气加热控温。 温度特性：温度的准确性温度的均一性升降温的速度不同模式下的相同温度特性热盖温度Ct值含义：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。PCR核酸扩增仪的临床应用：感染性疾病的分子诊断和研究遗传性疾病的分子诊断和研究恶性肿瘤的分子诊断和研究PCR核酸扩增仪在移植配型中的应用在法医学中的应用在分子生物学其他领域的应用在卫生安全中的应用。PCR扩增仪包括普通PCR扩增仪和实时荧光定量PCR扩增仪。普通的包括：一般定性PCR扩增仪、带梯度PCR功能的梯度PCR仪和带原位扩增功能的原位PCR仪；实时荧光定量PCR扩增仪由PCR系统和荧光检测系统做成，荧光检测系统包括激发光源和检测器。FCM光学系统中滤光片主要分为：长通滤光片、短通滤光片和带通滤光片。电泳（EP）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。电泳基本原理：物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子，不同的物质由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，它们在一定的电场中移动方向和移动速度也不同，因此可将它们分离。影响电泳的外界因素：电场强度溶液的pH值溶液的离子强度电渗作用粒子的迁移率吸附作用常用电泳方法纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳凝胶电泳等电聚焦电泳等速电泳双向凝胶电泳免疫电泳电泳仪的基本结构包括主要设备（分离系统）和辅助设备（检测系统）。主要设备包括电泳电源、电泳槽。光谱分析法是利用某物质对特定光谱进行吸收、发射或散射后所引起的光谱改变来进行其结构或含量分析的方法。荧光光谱仪原理：当某种常温物质经某种波长的入射光照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的波长长的出射光，而一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。其分类：荧光光度计荧光分光光度计X荧光光谱仪影响荧光强度的因素：溶剂的特性温度的变化pH变化内滤光作用、自吸收现象和溶液荧光淬灭。光学系统的组成：激发光源、单色器、样品池和检测器四部分。荧光光度计主要特点是两个单色器都用滤光片。激发光分为两路：一路照射样品溶液；另一路照射参比溶液。原子吸收光谱法是测定气态的自由原子对某种特定光谱的吸收特性，从而进行定性和定量分析的方法。色谱法：是一种物理分离技术，实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶的两相（固定相和流动相）之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法固定相：一种固定在色谱仪中的具有大比表面积的固体或以某种方式固定了的液体。流动相：色谱仪中一种能携带待分离混合物流过固定相的是气体或液体。色谱仪的工作原理：色谱是利用待分离的样品组分在两相中分配的差异而实现分离的。这个