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文档简介

氯霉素检测盒说明书氯霉素检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(含水产) 、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样品中氯霉素的残留一、概要氯霉素 (Chloramphenicol,CAP )曾是应用广泛的抗菌素,但由于其存在严重的副作用,能引起人的再生障碍性贫血,粒细胞缺乏症等疾病,欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。氯霉素检测试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代药物残留检测产品,操作时间仅需45min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。二、试验原理氯霉素检测试剂盒采用直接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上预包被氯霉素抗体,样品中残留的氯霉素和酶标氯霉素抗原竞争微孔条上预包被的抗体,经 TMB 底物显色,样品吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中氯霉素的含量。三、交叉反应率氯霉素100氯霉素碱0.5甲基氯霉素0.05氟苯尼考0.01%氟苯尼考胺0.1%*注:标准品浓度为 0ppb,0.05ppb,0.15ppb,0.45ppb,1.35ppb,4.05ppb四、操作步骤:1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(2025)平衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入自封袋,保存于 28。3、洗涤工作液在使用前也需回温。4、编号:将样品/标准品对应微孔按序编号,并记录标准孔和样品孔所在的位置。5、加标准品/样品:加标准品 /样品 70l 到对应的微孔中,再加入氯霉素酶标物 30l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 25避光环境中反应 30min。6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液 300l/孔,充分洗涤 5 次,每次间隔 30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破) 。7、显色:加入底物液 A 液 50l/孔,再加底物液 B 液 50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置 25避光环境中反应 1520min。8、测定:加入终止液 50l/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据) ,测定每孔 OD 值。( 若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。五、检测方法灵敏度、准确度、精密度试剂盒灵敏度:0.05ppb样品最低检测限:组织样品0.1ppb牛奶0.05ppb饲料0.2ppb蛋0.05ppb蜂蜜0.05ppb回收率:组织样品 10215%牛奶 11010%饲料9310%蛋9515%蜂蜜8010%精密度:试剂盒的变异系数均小于 10%六、注意事项1、室温低于 20或试剂及样品没有回到室温(2025)会导致所有标准的 OD 值偏低。2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3、每加一种试剂前需将其摇匀。4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、储存条件:保存试剂盒于 28,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0 标准的吸光度(450/630nm )值小于0.5(A450nm0.5)时,表示试剂可能变质。8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般显色时间为 1520min 即可。若颜色较浅,可延长反应时间到 30min(或更长) ,但不得超过 40min。反之,则减短反应时间。9、该

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