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文档简介
三聚氰胺检测试剂盒说明书一、概要三聚氰胺是一种低毒、无味的纯白色单斜棱晶体,形似蛋白粉,属于三嗪类含氮杂环有机化合物,广泛应用于塑料、染料、化肥的生产和纺织行业。由于三聚氰胺分子含氮量很高,只要添加到食品中就可在检测中造成蛋白质含量较高的假象。目前在饲料、牛奶、奶粉、饼干、奶糖等相关产品均发现有三聚氰胺残留现象。动物实验结果表明,三聚氰胺的摄入可能会导致繁殖障碍、膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。现有的检测三聚氰胺方法如液相色谱-质谱联用法、质谱电喷射离子技术其样品前处理复杂、所需仪器昂贵、操作复杂、耗费时间。而使用三聚氰胺 ELISA 试剂盒能够既快速又准确的分析样品中三聚氰胺残留。三聚氰胺检测试剂盒是应用 ELISA 技术研发而成的检测产品,操作时间短于 45min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。二、试验原理三聚氰胺检测试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上预包被三聚氰胺抗原,样本残留的三聚氰胺和微孔条上预包被的抗原竞争抗三聚氰胺抗体,同时三聚氰胺抗体与酶标二抗相结合,加入 TMB 底物显色,样本吸光值与其残留物三聚氰胺成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中三聚氰胺的含量。适用范围:三聚氰胺检测试剂盒可定性、定量检测牛奶、奶粉、饲料、动物组织和鸡蛋等样本中三聚氰胺的残留量。交叉反应率:三聚氰胺100%三、检测步骤:1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(2025)平衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入自封袋,保存于 28。3、洗涤工作液在使用前也需回温。4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。5、加标准品/样本:加标准品 /样本 50l/孔到对应的微孔中,再加入酶标物 50l/孔,再加入抗试剂 50l/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温 25避光环境中反应 30min。6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液 300l/孔,充分洗涤 5 次,每次间隔 30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破) 。7、显色:加入底物液 A 液 50l/孔,再加底物液 B 液 50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温 25避光环境反应 15min。8、测定:加入终止液 50l/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据) ,测定每孔 OD 值。( 若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。四、检测方法灵敏度、准确度、精密度试剂盒灵敏度:10ppb样本最低检测限:牛奶100ppb鸡蛋100ppb组织100ppb奶粉 500ppb饲料 500ppb回收率:牛奶 11010%鸡蛋 9010%组织 8010%奶粉 8010%饲料 801
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