血常规分析中的误差因素及血涂片复检规则.ppt

血常规分析中的误差因素及血涂片复检规则 多种病理条件对血常规检测的干扰 假性血小板减少或增多假性红细胞减少或增多假性白细胞减少或增多 假性血小板减少或增多的干扰因素 假性血小板减少样品采集环节中的血小板聚集EDTA诱导的血小板聚集血小板卫星现象巨大血小板假性血小板增多红 白细胞碎片小红细胞 EDTA诱导的血小板聚集 EDTA诱导血小板聚集 发病率0 07 0 11 诱因健康人自身免疫病 慢性炎症 病毒或细菌感染肿瘤潜在的误诊风险高预防性血小板输血的医学决定水平血小板计数为20 109 L误诊为ITP或TTP EDTA诱导血小板聚集的发病机制 血小板糖膜改变 血小板膜内隐匿性抗原暴露血浆中自身抗体与隐匿性抗原形成复合物激活细胞膜中的磷酯酶血小板膜水解并释放血小板活性物质AA ADP 5 TH 胶原 凝血酶原等血小板纤维蛋白原受体被活化血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团出现血小板假性减少 EDTA诱导血小板聚集的处理方法 光学显微镜镜检采用血小板稀释液进行稀释瑞氏染色更换抗凝剂重新抽血检测枸橼酸钠肝素钠 血小板卫星现象 自身抗体引起的一种免疫反应IgG型抗体识别中性粒细胞和血小板上共同抗原结构血小板的GPIIb IIIa中性粒细胞上的Fc RIII片断处理方法形态学镜检 巨大血小板 PLT I32 10 9 L x1000 PLT O65 10 9 L 红 白细胞碎片的干扰 红细胞碎片的产生弥散性血管内凝血微血管病性溶血性贫血心源性溶血性贫血其它化学中毒 肾功能衰竭 血栓性血小板减少性紫癜和化疗白细胞碎片的产生AML 淋巴瘤 严重感染 化疗 排除红 白细胞碎片对血小板干扰 假性红细胞减少或增多的干扰因素 红细胞冷凝集所致假性红细胞减少巨大血小板所致假性红细胞增多 红细胞凝集所致干扰及处理 RBCHGBHCTMCVMCHMCHCRDW 2 231440 249111 764 65780 254 1012 Lg LfLpgg L RU RU RU RU RU 处理方法加温到37OC后再测定 红细胞冷凝集所致假性红细胞减少 冷凝集素综合症在31 以下自身红细胞抗原发生可逆性凝集病因白血病 恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮肺炎支原体属感染传染性单核细胞增多症血吸虫病 丝虫病 疟疾肝硬化 非典型性肺炎 假性白细胞减少或增多的干扰因素 白细胞聚集所致假性白细胞减少红细胞溶血不良所致假性白细胞增多有核红细胞所致假性白细胞增多 溶血剂滴下后 正常人RBC 肝硬化病人RBC 红细胞溶血不良 因脂类代谢异常所致红细胞膜表面与外周血脂类结合形成脂质颗粒保护膜 或红细胞膜表面结构异常 正常浓度的溶血素无法破坏红细胞膜表面常见于以下疾病肝功能低下 肝硬化 肝癌晚期 胆道堵塞 高脂血症高胆固醇制剂输液治疗过程中异常血红蛋白症 Hgb S症 Hgb C症 红细胞溶血不良的原因 红细胞溶血不良 处理办法 人工显微镜形态学镜检 淋巴细胞峰左边上翘显示碎片明显涂片显示大血小板 棘形红细胞 WBC6 9 109 LLYM 34 3 MXD 19 4 NEUT 46 3 有核红细胞的存在 血液学疾病 急性髓细胞白血病急性红白血病急性淋巴细胞白血病慢性粒细胞白血病慢性淋巴细胞白血病多发性骨髓瘤骨髓增生异常综合征恶性淋巴瘤骨髓转移癌骨髓纤维化原发性血小板增多症 血液非肿瘤性疾病缺铁性贫血巨幼细胞贫血溶血性贫血增生性贫血再生障碍性贫血原发性血小板减少性紫癜感染性疾病原发性脾亢脾 有核红细胞对白细胞检测的干扰 WBC56 1X109 L 外周血中红细胞的数量是白细胞的三次方数量级 排除NRBC对白细胞检测的干扰 形态学镜检高端仪器 WBC6 90 109 LNRBC0 34 109 L A blood smearcampaign Blood 1April2003 101 7 2453 2453 临检是实验室风险最大的部门 ISO对血常规形态学的相关要求 5 5检验程序b 血液学检查部门需制定如下标准 程序并形成文件 不仅限于如下标准 程序 血细胞分析的显微镜复检标准 检测结果出现异常计数 警示标志 异常散点图等情况时结果的确认方法和程序 血涂片制备和检验的书面程序 过程 对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准及程序 c 血液计数结果超出仪器线性范围时宜规定识别和解决方法 如对血样进行适当稀释和重复检验 对于检测样本存在一些影响因素 如有核红细胞 红细胞凝集 小红细胞 红细胞有内容物或疟原虫 血小板凝块 巨型血小板等 时 对仪器检测结果可靠性的判定和纠正措施需有书面规定 CAP对血常规形态学的相关要求 HEM 34200Hasthelaboratoryestablishedcriteriaforcheckingandreviewingleukocytedifferentialcounterdata histograms and orbloodfilmsforclinicallyimportantresultsflaggedbytheautomateddifferentialcounter HEM 34300Isthequalityofbloodfilmssatisfactory properlystained freeofprecipitate goodcelldistribution HEM 34350Areslidesuniquelyidentified NOTE Slidesorcoverslipsmustbeuniquelyidentifiedbyelement s suchasspecimenoraccessionnumber orpatientnameand ornumber HEM 34450Arebloodfilmsretainedforatleastoneweekforpossiblereviewand orreference NOTE Itmaybedesirabletoretainoutpatientfilmsforalongerperiodandsignificantlyabnormalfilmsindefinitelyforteachingpurposes 国内常用血细胞分析仪复检规则的制定 SysmexXE 2100BeckmanCoulter系列SiemensBayerAdvia120 2120 协和医院血常规检查仪器配置 北京协和医院检验科 协和医院东院区检验科 协和医院西院区检验科 门诊HST XE 302ADVIA2120 病房ADVIA2120XS 800i 国际医疗部 特需ADVIA2120 急诊XT 1800XS 800i 病房 门诊XE 2100XE 2100 急诊XT 1800 11台 涂片复检规则设置流程 镜检阳性判断标准 存在异常红细胞可见NRBC 白细胞计数异常Dohle小体粒细胞显见中毒颗粒粒细胞显见空泡变性粒细胞显见原始和幼稚细胞 1 早 中幼粒细胞 1 晚幼粒细胞 2 异型淋巴细胞 5 存在巨大血小板存在血小板聚集 镜下形态异常样品分类 1223例血常规样本来自体检者 门诊及住院患者其中阴性标本37 4 阳性标本62 3 阳性标本包括细胞数量异常 白细胞分类异常和细胞形态异常镜下形态异常样品203例 16 6 对国际复检规则进行评估 采用相同涂片复检标准 不同型号仪器的筛选性能大致相同 略有差异虽然假阴性率符合目标 但XE XT漏掉2例AL病例 XS漏掉其中1例 2例AL都未触发41条规则 但镜下发现白细胞分类异常并有异常红细胞推片率过高 N 1223 对加强的国际复检规则进行评估 血液科标本全推 以避免漏掉严重的血液病病人假阴性率下降但推片率过高 工作中实现难度增大我们确定的推片复检规则以此为基础 从降低假阳性入手 N 1223 导致假阳性的主要触发规则 WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞原始细胞核左移异型淋巴细胞 WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞有核红细胞异常红细胞血小板聚集 WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞血液科全推 WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞小细胞 大细胞 细胞大小不等 XE 2100 XT 1800i XS 800i ADVIA 2120 导致假阳性的主要触发规则 XE 2100WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞原始细胞核左移异型淋巴细胞 XT 1800iWBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞有核红细胞异常红细胞血小板聚集 XS 800iWBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞血液科全推 ADVIA 2120WBC x10 9 L 30PLT x10 9 L 1000不成熟粒细胞小细胞 大细胞 细胞大小不等 降低假阳性同时必须使真阳性率改变不大 4种型号血细胞分析仪复检规则的分析结果 N 1223 4种型号血细胞分析仪涂片复检规则 一 4种型号血细胞分析仪涂片复检规则 二 4种型号血细胞分析仪涂片复检规则 三 4种型号血细胞分析仪假阴性分析 4台仪器共有的假阴性规则异常红细胞 空泡变性 血小板聚集和中毒颗粒有核红细胞SiemensADVIA2120早中幼粒细胞SysmexXT 1800i晚幼粒细胞和白细胞计数SysmexXT 1800i XS 800i和SiemensAdvia2120异形淋巴细胞SysmexXE 2100和XT 1800i 假阳性主要因素分析 XE 2100未成熟粒细胞原始细胞PLT聚集异常红细胞 XT 1800i未成熟粒细胞原始细胞有核红细胞异型淋巴细胞 XS 800i有核红细胞异常红细胞