新生儿遗传性代谢病筛查血片采集技术规范与质量控制

新生儿遗传性代谢病筛查血片采集技术规范与质量控制,湖北省荆州市新生儿疾病筛查中心荆州市妇幼保健院 金爱枝,。,新生儿遗传代谢病筛查项目,先天性甲低（CH）苯丙酮尿症（PKU）新生儿听力障碍葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症先天性肾上腺皮质增生症（CAH）地中海贫血。串联质谱筛查耳聋基因筛查,新生儿疾病筛查技术规范2010年版,新生儿疾病筛查是减少出生缺陷，提高我国出生人口素质的三级预防措施之一。为进一步做好新生儿疾病筛查工作，卫生部于2008年对2004年印发的新生儿疾病筛查技术规范作了进一步的修订，形成了新生儿疾病筛查技术规范（2010年版）。,新生儿疾病筛查技术规范2010年版,技术规范（2010年版）由六个部分组成：新生儿遗传代谢病筛查血片采集技术规范；新生儿遗传代谢病筛查实验室检测技术规范苯丙酮尿症和先天性甲状腺功能减低症诊治技术规范新生儿遗传代谢病筛查操作流程新生儿遗传代谢病筛查知情同意书新生儿听力筛查技术规范、新生儿听力筛查技术流程及新生儿听力筛查知情同意书,一、基本要求二、采血机构和人员职责三、血片采集步骤四、采血工作质量控制五、血片递送与检测,新生儿遗传代谢病筛查血片采集技术规范,新生儿遗传代谢病筛查的目的、原则、方法及网络运行培训合格滤纸干血片采集、保存、递送的相关知识培训合格新生儿遗传代谢病筛查相关信息和档案管理培训合格,一、基本要求,一）采血机构设置：设有产科或儿科诊疗科目的医疗机构均应当开展新生儿遗传代谢病筛查血片采集,一、基本要求,二）人员要求1、具有与医学相关的中专以上学历，从事医学临床工作2年以上。2、接受过新生儿遗传代谢病筛查相关知识和技能的培训并取得技术合格证书。培训内容包括：新生儿遗传代谢病筛查的目的、原则、方法及网络运行；滤纸干血片采集、保存、递送的相关知识；新生儿遗传代谢病筛查相关信息和档案管理。,一、基本要求,1、积极开展新生儿遗传代谢病筛查的宣传教育工作。2、加强对本机构血片采集人员的管理和培训。3、承担本机构新生儿遗传代谢病筛查有关信息的收集、统计、分析和上报工作。,二、采血机构和人员职责,4、血片采集人员在实施血片采集前，应当将新生儿遗传代谢病筛查的目的、意义、筛查疾病病种、条件、方式、灵敏度和费用等情况如实告知新生儿的监护人，并取得书面同意。5、认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登 记完整。,二、采血机构和人员职责,6、严格按照新生儿遗传代谢病筛查血片采集步骤采集足跟血，制成滤纸干血片，并在规定时间内递送至新生儿遗传代谢病筛查实验室检验。7、因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应当及时预约或追踪采集血片。,二、采血机构和人员职责,8、对可疑阳性病例应当协助新生儿遗传代谢病筛查中心，及时通知复查，以便确诊或采取干预措施。9、做好资料登记和存档保管工作，包括掌握活产数、筛查数、新生儿采血登记信息、反馈的检测结果及确诊病例等资料，保存时间至少10年。,二、采血机构和人员职责,认真如实填写采血卡片内容：做到字迹清楚 、登记完整。采血单位 母亲姓名（上中下）家庭地址联系电话（手机）新生儿性别孕周新生儿体重新生儿情况母亲用药情况出生日期采血日期采血人、填卡人,二、采血机构和人员职责,先天性肾上腺皮质增生症(CAH)采血要求,先天性肾上腺皮质增生症(CAH)干血片17-OHP测定是一种非常有效的筛查CAH的方法。可以覆盖95的CAH患儿。17-OHP容易受多种因素干扰，降低假阴性/假阳性影响因素：胎龄、出生体重、发热、疾病状态、激素用药史新生儿17-OHP浓度受孕周及体重影响较大，早产、低体重儿17OHP较正常偏高，体重越低，17-OHP测定的浓度越高，早产儿要比足月出生的新生儿17-OHP浓度要高。要求对孕周和体重做准确的填写。要求母亲疾病或婴儿疾病及用药情况如实填写,先天性肾上腺皮质增生症(CAH)采血要求,要避免血样受EDTA或柠檬酸盐污染，受时间分辨免疫荧光方法学影响，EDTA 或柠檬酸盐会与铕发生鳌合反应，导致测定浓度极端升高，严禁使用毛细管将血液转移到滤纸上。,采血时间及要求,卫生部： 血片采集是新生儿遗传代谢病筛查技术流程中最重要的环节。血片质量直接影响实验室检测结果。一般情况下：出生72小时后，7天内充分哺乳（充分哺乳8次及以上）特殊情形的采血时间： 新生儿生后出院过早； 新生儿因特殊病情需转院诊治； 新生儿因出生体重过低、病重、输血（换血）等未符合采血条件者。 应在条件满足时尽早采血，最迟不超过生后20天。,注意事项,在采集、处理血标本时应注意生物安全防范：1、病人的标本可能感染了人类免疫缺陷病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。所有血片应当按照血源性标本对待，严格遵守标本采集技术降低各类工作人员（采血人员、信息录入及实验室工作人员等）的危险性，在接触血标本过程中须戴手套。2、在采集标本过程中要防止交叉感染：严格执行手卫生消毒后再采集下一个标本。,采血前的准备(一),采血前向家长发放“新筛”须知如实告知家长新生儿疾病筛查的相关事项，并取得同意书。,采血前的准备(二),认真如实填写采血卡片内容：做到字迹清楚 、登记完整。采血用品的查对，洗手、戴口罩和手套，确认新生儿身份 载血滤纸：采血信息卡 穿刺针 采血卡支架 75%酒精、棉签、消毒干棉球 热水袋或热敷用毛巾,采血前的准备(三),改善局部血运新生儿足部保持清洁足部注意保暖热敷：可用40-42毛巾热敷15-30分钟新生儿取头高脚低位，可使足部静脉压增高，利于取血。,采血部位,最佳采血部位：足跟内、外两侧。理由：1、血运丰富2、皮肤组织较厚3、损伤最小4、容易固定便于取血针刺部位应选择在如右图所示的阴影区域，切忌采集新生儿脚后跟中间部位针刺接触或触伤足跟骨可引发骨髓炎、钙化结节、脓肿,1、清洗双手，并佩戴无菌、无滑石粉的手套。2、按摩或热敷新生儿足跟，并用75%酒精消毒皮肤。,三、血片采集步骤,3、待酒精完全挥发后， 使用一次性采血针刺足 跟内侧或外侧，深度 小于3毫米，用干棉球 拭去第1滴血，从第2滴 血开始取样（第一滴血含有组织液可能会稀释样本）,三、血片采集步骤,4、轻轻地将滤纸片接触血滴， 切勿触及足跟皮肤，血液滴在预先定好的圈内，使血液自然渗透至滤纸 背面，形成正反两面大小一致，直径大于8mm的血斑，避免重复滴血，采集4个血斑。 所有使用过的用具均应放置在适当的生物危害的容器之中。,三、血片采集步骤,5、标本采集完后，应将 新生儿的足部抬高，用消毒 棉球压迫采血部位止血。,三、血片采集步骤,三、血片采集步骤,6、在室内干燥阴凉处室温放置在水平支架上，悬空、水平摆放3小时自然晾干至深褐色，不能重叠在一起 避免晾置过久、阳光及紫外线照射，烘烤，福尔马林、油漆、甲醛等挥发性化学物质以及蚊虫吸血等污染 要妥善保管好血片及空白滤纸，避免受物理或化学物质的影响而导致血斑洗脱不下。特别是医院新装修、新家具，更应注意。,7、晾干后的血标本及时置于密封袋内，密闭保存在28冰箱中， 有条件者可0以下保存。 8、所有血片应当按照血源性 传染病标本对待，对特殊传染病标本，如艾滋病等应当作标识并单独包装（生物安全标识包装）,三、血片采集步骤,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症对采血标本要求更高,严格控制血片储存和运输条件，避免酶失活血片样本充分自然干燥，应水平放置在无吸水性的的开放位置上，如干燥架，或塑料面的试管架，室温下放置3-4小时。样本应避免阳光直射（不要叠放或靠近热源）样本干燥后及时用密封袋保存，放在4冰箱中。用冷链包及时将血片送到新筛分中心，新筛分中心必须在5个工作日内冷链递送至新筛中心，新筛中心在2个工作日内进行标本的检测。,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症(G6PD缺乏症)的新生儿筛查方法为新生儿滤纸纸片G6PD筛查荧光法 酶活性检测（通过酶的活性反应是否患病）,采血成功小技巧,采血员立于婴儿的右侧，先择婴儿右脚外侧缘采集，更有利于取血 用手握住足部，母指和食指在穿刺点周围较大范围挤压及间断性地放松易于血滴的形成。,采血成功小技巧,滤纸血片与血滴应成90度（垂直方向），有利于血滴扩散成型,支架（自制）,铁支架,纸支架,滤纸干血片的验收(一)合格滤纸干血片应当为：a)4个血斑，且每个血斑直径大于8毫米。b)血滴自然渗透，滤纸正反面血斑一致。c)血斑无污染。d)血斑无渗血环。e)血片信息记录完整。,四、采血工作质量控制,四、采血工作质量控制,滤纸干血片的验收(二)不合格滤纸干血片尽快通知重采：（1）血斑过小（2）渗透不全（3）重复滴血（4）血样不均匀，有凝块（5）血片污染（6）缺斑（7）采血卡项目填写不全或错误,不合格的血样标本(一),血液太少（未渗透） 可能原因：（1）在血斑完全充满圆圈并浸透前移去滤纸片（2）使用毛细管将血液转移到滤纸片（3）手或者润肤霜接触滤纸片,不合格的血样标本(二),重复滴血 可能原因:两滴或两滴以上的血滴汇于同一血斑,不合格的血样标本(三),标本未干 可能原因:血斑未完全干透即放入冰箱保存,不合格的血样标本(四),血样稀释、血斑周围有血清环 可能原因：（1）穿刺皮肤前没有将酒精擦干（2）滤纸片接触酒精、水等物质（3）过度挤压/揉搓穿刺部位使组织液渗出（4）手或其他物质，比如酒精、福尔马林、灭菌溶液、水等接触滤纸片,不合格的血样标本(五),血斑出现凝块 可能原因：（1）采血操作时间过长，血液凝固（2）不恰当地干燥血样（3）用毛细管将血液转移到滤纸上,不合格的血样标本(六),样本血液太多可能原因：（1）滤纸同一位置重复滴血滴（2）在滤纸的正反面重复滴血（3）血液过多，通常使用了某些设备,不合格的血样标本(七)标本干未洗脱,五、血片递送与检测,以前的模式每周1次递送：采血机构递至各分中心 城区医疗机构：血片整理编号，每周五筛查中心专人上门收取 各县市：血片整理编号，每周三寄出快递发送新筛邮件，每周四新筛中心收到标本新筛中心每周集中进行检测1-2次筛查结果以邮件形式发送到分中心,血片递送与检测,新增新筛项目后新筛网络系统、新筛微信公众号每周1-2次递送：采血机构： 采血后贴条码，指导家属进入微信号录入或扫描条码及血片信息并点击提交 机构负责人进入新筛网络系统输入条码确认血片信息无误后递至各分中心各分中心（包括城区医疗机构及各县市）整理血片，进入新筛网络系统集中核对扫码确认血片质量和数量无误冷链快递至筛查中心。新筛中心：收到标本及时进行检测,三查七对编码绝对不能错,筛查信息录入,采血机构人员职责,1、宣教、知情同意2、填写完整的血片信息3、采血4、指导家属扫描新筛微信公众号并进入微信号录入条码及血片信息，点击提交5、进入新筛系统再次确认血片信息是否正确与完整6、血片及时收纳正确保存7、发送血片信息并及时递送至新筛分中心 （每周1-2次递送）,采血机构人员职责,(没有印刷条码)老血片：1、在右上角和右下角贴条码2、指导家属扫描新筛微信公众号并进入微信号录入条码 及登记个人信息3、点击提交按钮4、进入新筛系统再次确认血片信息是否正确 信息不完整需补充完整,采血机构人员职责,新血片：1、指导家属扫描新筛微信号并进入微信号扫描血片条行码登记个人信息2、点击提交按钮3、机构人员进入新筛系统扫描条行码再次确认血片信息是否正确和完整,筛查分中心（各县市及城区市直医院）,进入新筛系统刷条码核对标本质量与数量发送信息5个工作日内冷链递送至筛查中心,1、新生儿遗传代谢病筛查健康教育2、填写采血卡、登记、核对3、改善采血部位血循环4、足跟内外侧缘75%酒精消毒5、针刺和取血6、 24小时常温晾干后及时收纳7