院消毒灭菌效果的监测及医院环境卫生学监测.ppt

医院消毒灭菌效果监测及医院环境卫生学监测 苏州九龙医院 医院消毒灭菌效果监测 卫生部 医院感染管理规范 医院必须对消毒 灭菌效果定期进行监测 灭菌合格率必须达到100 不合格的物品不得进入临床使用部门 医院消毒灭菌效果监测 医院消毒灭菌效果监测的目的 是预防医院内感染的重要措施之一 对消毒效果的监测是评价 其消毒设备运转是否正常 消毒药剂是否有效 消毒方法是否合理 消毒效果是否达标的唯一手段 医院消毒灭菌效果监测 消毒灭菌效果监测的目的 是无菌技术操作及隔离技术的基础 因此消毒灭菌效果监测是保证医院消毒灭菌质量的重要措施 医院消毒灭菌效果监测 消毒灭菌效果监测遵循原则 监测人员必须经过专业培训 掌握一定的消毒知识 熟悉消毒设备和药剂性能 具有熟练的检验技能 选择合理的采样时间 消毒后 使用前 遵循严格的无菌操作 医院消毒灭菌效果监测的内容 热力灭菌效果监测 包括 压力蒸汽 干热低温灭菌效果监测 环氧乙烷紫外线消毒效果监测 医疗器械消毒灭菌效果监测 使用中消毒剂的监测 血液净化系统消毒效果监测 医院环境卫生学监测 包括 空气 工作人员手 物体表面 一 热力灭菌效果的监测 热力灭菌效果的监测包括 压力蒸汽灭菌效果的监测干热灭菌效果的监测 一 压力蒸汽灭菌效果监测 压力蒸汽灭菌器的分类 根据排放空气的方式和程度不同可分为 下排气式压力蒸汽灭菌器预真空 脉动真空压力蒸汽灭菌器 一 压力蒸汽灭菌效果监测 压力蒸汽灭菌效果监测方法包括 A 工艺监测B 化学监测C 生物监测 一 压力蒸汽灭菌效果监测 A 工艺监测 程序监测 按照经过试验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查 以判断灭菌是否按照规定的条件进行 一 压力蒸汽灭菌效果监测 工艺监测的主要项目 必须每锅进行 物品的包装体积 重量 下排气式 30cm 30cm 25cm预真空 30cm 30cm 50cm金属包的重量不超过7kg 敷料包不超过5kg快速蒸汽 一般无包装 一 压力蒸汽灭菌效果监测 工艺监测的主要项目 排气情况 灭菌温度灭菌时间压力每次灭菌应做详细记录 包括 每锅锅号 压力 温度 时间 灭菌物品 灭菌操作者签名 一 压力蒸汽灭菌效果监测 压力蒸汽灭菌所需压力 温度 灭菌时间 一 压力蒸汽灭菌效果监测 工艺监测的主要项目 物品的装放 大包上层 小包下层织物上层 金属下层物品竖放不能贴靠柜壁下排气 装量不超过柜室内容量80 一 压力蒸汽灭菌效果监测 工艺监测的主要项目 物品的装放 预真空 装载量不得 柜室容积的90 装载量不得 柜室容积的10 脉动真空 装载量不得 柜室容积的5 以防止 小装量效应 残留空气影响灭菌效果 一 压力蒸汽灭菌效果监测 B 化学监测包括 包内指示卡 121 132 包外指示胶带要求 指示胶带每包外必贴 指示卡每包包内必放 包内 化学指示卡 结果判断 打开灭菌包 指示剂由米色变成黑色 表示达到灭菌条件 包外 化学指示胶带 灭菌包应有标签 灭菌包标签 注意事项 包外化学指示胶带 根据变色情况 只能代表物品是否已经灭菌 仅仅起到一个鉴别作用 不能代表灭菌是否彻底 包内化学指示卡 可以准确反映灭菌的时间 温度和饱和蒸汽的综合变化 是鉴定每一个包裹内部的情况 指示剂与对照色块颜色相符 表示灭菌彻底 一 压力蒸汽灭菌效果监测 B 化学监测 B D试验 空锅试验 需每日一次对于预真空 脉动真空压力蒸汽灭菌器应每日空锅做B D试验 目的 检测灭菌器内空气排除效果 一 压力蒸汽灭菌效果监测 C 生物监测1 压力蒸汽灭菌器 采用 自含式生物指示剂 每月进行一次 指示菌株采用耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢 2 新灭菌设备和维修后在投入使用前 应进行生物监测 合格后方可以投入使用 一 压力蒸汽灭菌效果监测 附 快速压力蒸汽灭菌器有三种 可以分为 1 下排气2 预真空3 正压排气 一 压力蒸汽灭菌效果监测 快速压力蒸汽灭菌器注意 其灭菌参数 如时间和温度由灭菌器性质 灭菌物品材料性质 带孔和不带孔 是否裸露而定 一 压力蒸汽灭菌效果监测 快速压力蒸汽灭菌器注意 一般灭菌时要求灭菌物品裸露 快速压力蒸汽灭菌法的灭菌周期不包括干燥阶段 因此不管物品是否包裹 取出的物品应该尽快使用 不能储存 无有效期 二 干热灭菌效果监测 干热灭菌效果监测方法包括 A 化学检测法B 物理检测法 电热偶检测法 C 生物检测法 二 干热灭菌效果监测注意事项 1 待干热灭菌物品必须清洗干净 温度高于170 时 有机物会碳化 防止灭菌失败或污物碳化 2 灭菌后要待温度降到40 以下再开箱 防炸裂 3 采用干热灭菌 油剂 粉剂的厚度不得超过0 635cm 凡士林纱布厚度不得超过1 3cm 二 干热灭菌效果监测 C 生物检测法2 检测方法 将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌试管内 1片 管 灭菌器与每层门把手对角线内 外角处放置2个菌片的试管 试管帽置于试管旁 关好柜门 经过一个灭菌周期后 待温度降至80 时 加盖试管帽后取出试管 在无菌条件下 加入普通营养肉汤培养基 5ml 管 以36 1 培养48小时 观察初步结果 无菌生长管继续培养至第7日 二 干热灭菌效果监测 C 生物检测法3 结果判断 若每个指示菌片接种的肉汤管澄清 判为灭菌合格 若指示菌片之一接种的肉汤管混浊 判为灭菌不合格 对难以判定的肉汤管 取0 1ml接种于营养琼脂平板 用灭菌L棒涂匀 放36 1 培养48小时 观察菌落形态 并做涂片染色镜检 判断是否有指示菌生长 若有指示菌生长 判为灭菌不合格 若无指示菌生长 判为灭菌合格 4 注意事项 检测所用的指示菌片需经卫生部认可 并在有效期内使用 二 环氧乙烷灭菌效果监测 EO监测方式 A 工艺监测 每锅进行工艺监测B 化学监测 每包进行化学监测C 生物监测 每月进行生物监测 二 环氧乙烷灭菌效果监测 B 化学监测每个灭菌物品的外包装应粘贴包外化学指示胶带 作为灭菌过程的标志 包内放置化学指示卡 作为灭菌效果的参考 只有当消毒工艺符合要求 化学指示物变色符合规定标准色要求的情况下 产品才可以使用 二 环氧乙烷灭菌效果监测 C 生物指示物监测生物监测采用的指示物 枯草杆菌黑色变种芽孢 每月 EO测试包分为 挑战性测试包常规测试包 三 紫外线消毒效果监测 紫外线消毒的监测 必须进行 A 日常监测B 化学监测C 生物监测 三 紫外线消毒效果监测 A 日常监测 使用时记录 新灯管启用日期 灯管使用照射时间 累计照射时间 擦管时间 化学及生物监测结果记录 三 紫外线消毒效果监测 B 化学监测及方法要求 3 6个月一次 主要监测使用中灯管的照射强度 新灯管要进行抽样监测 三 紫外线消毒效果监测 监测方法 采用紫外线消毒灯强度监测化学指示卡 必须经过卫生部批准认可 并在有效期内使用 注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开5分钟 将紫外线消毒灯强度监测化学指示卡垂直平放于灯管一米处 有图案一面朝上 照射1分钟 照射后 图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色 观察指示卡色块的颜色与其标准色块比较 读出照射强度 紫外线消毒灯强度监测化学指示卡 三 紫外线消毒效果监测 监测方法 采用紫外线消毒灯强度监测紫外辐照计 注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开5分钟后 将测定波长254nm的紫外线辐照计探头置于紫外线灯下垂直距离1m的中央处 待仪表稳定后 所示数据即为紫外线灯管的辐照度值 三 紫外线消毒效果监测 注意事项 测定时电压220V 5V 温度20 25 相对湿度 60 紫外辐照计 必须在计量部门检定的有效期内使用 紫外辐照计 至少每1年标定一次 三 紫外线消毒效果监测 结果判定 普通30W直管型紫外线灯 新灯辐照强度 90 W cm2 为合格 使用中紫外线灯辐照强度 70 W cm2 为合格 30W高强度紫外线新灯的辐照强度 180 W cm2 为合格 三 紫外线消毒效果监测 C 生物监测 经紫外线消毒后的物品或空气中的自然菌应减少90 00 以上 人工染菌杀灭率达到90 00 空气消毒效果的监测 空气培养 表面消毒效果的监测 物体表面采样 使用紫外线消毒灯的注意事项 1 灯管是应采用对紫外线透过率高的石英玻璃制成 2 使用强度应该 70 W cm2 70 W cm2要及时更换灯管 采用室内悬吊灯 灯管数量每m3不少于1 5W 照射时间不少于30分钟 考虑到紫外线兼有表面消毒与空气消毒的双重作用 可安装在桌面上方1m处 不考虑表面消毒的房间 可吸顶安装 也可采用活动式紫外线灯照射 照射时间一般均应大于30min 使用紫外线消毒灯的注意事项 3 紫外线灯在使用过程中 应该保持清洁 一般每二周用酒精棉球擦拭一次 发现灯管表面有灰尘 油污时应该及时擦拭 4 用紫外线灯消毒室内空气时 房间内应保持清洁干燥 温度低于20 或高于40 相对湿度大于60 应该适当延长照射时间 5 用紫外线消毒物品时 应使照射表面受到紫外线的直接照射 且应该达到足够的照射剂量 6 不得使紫外线光源照射到人 7 紫外线强度计至少每1年标定一次 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌后国家卫生标准 1 进入人体无菌组织 器官或接触破损皮肤 粘膜的医疗用品必须无菌 2 接触粘膜的医疗用品 细菌菌落总数应 20cfu g或 20cfu 100cm2 不得检出致病性微生物 3 接触皮肤的医疗用品 细菌菌落总数应 200cfu g或 200cfu 100cm2 不得检出致病性微生物 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测1 采样时间 在灭菌处理后 存放有效期内采样 要求 重点科室每月至少监测一次 2 采样地点 在百级净化台下进行 避免微生物污染 对单向流空气区域及工作台面 必须进行洁净度验证 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测3 检测方法 用无菌操作的方法小件的医疗器械 对象 缝合针 针头 手术刀片等检测数量 取5件采样方法 直接分别浸入6管需 厌氧培养管 其中一管为阳性对照 与4管霉菌培养管 培养基用量为15ml 管 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测注射器 对象 各类注射器检测数量 取5支采样方法 在5ml的无菌洗脱液中反复抽吸5次 洗下管内细菌混匀后再接种 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测3 检测方法 用无菌操作的方法大件的医疗器械 对象 手术钳 镊子等大的医疗器械检测数量 取2件采样方法 用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样 并将棉拭子投入5ml的无菌洗脱液中 将采样液混匀后再接种需 厌氧培养管 共6管其中一管作阳性对照 霉菌培养管4管 接种量为1ml 管 培养基用量15ml 管 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测4 培养 在待检样品的需 厌氧培养管中 接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液1 1000稀释1ml 将需 厌氧培养管及阳性与阴性对照管均于30 35 培养5天 霉菌培养管与阴性对照管于20 25 培养7天 培养期间逐日检查是否有菌生长 如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀 经培养后不能从外观上判断时 可再取培养液转种入另一支相同的培养基中 培养48 72小时后再观察有无菌落生长 并在转种的同时 取培养液少量 涂片染色 用显微镜观察是否有菌生长 四 医疗器械消毒灭菌效果监测 各种医疗用品消毒灭菌效果的监测5 结果判定 其阳性对照在24小时内应 有菌生长 阴性对照在培养期间应 无菌生长 如需 厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清 判为灭菌合格 除阳性对照外 其他各管均不得有菌生长 否则判为灭菌不合格 6 注意事项 样本送检时间不得超过6小时 若样本保存于0 4 时不得超过24小时 若消毒因子为化学消毒剂时 采样液中应该加入相应中和剂 五 消毒剂的监测 卫生部 医院感染管理规范 规定 必须对使用中的消毒剂 灭菌剂 进行生物和化学的监测 使用中的消毒剂国家卫生标准 细菌菌落总数应 100cfu ml 致病性微生物不得检出 五 消毒剂的监测 化学监测要求应该根据消毒剂 灭菌剂的性能定期监测 含氯消毒剂 过氧乙酸 戊二醛 作为消毒剂使用 等 应该每日监测浓度 并做好记录 消毒剂使用的时间不得超过产品说明书规定的使用期限戊二醛 作为灭菌剂使用 每周不少于1次监测浓度 应同时对消毒 灭菌的物品进行消毒灭菌效果的监测消毒物品 不得检出致病性微生物 灭菌物品 不得检出任何微生物 五 消毒剂的监测 化学监测 含氯消毒剂浓度测试纸 测定时 半分钟内 在自然光下与标准色块比较 读出溶液所含的有效成分浓度值 时间超过1分钟 颜色即逐渐消退 化学监测 测氯浓度试纸 五 消毒剂的监测 化学监测 戊二醛浓度测试纸操作方法 从小瓶中取出一条试纸 并旋紧瓶盖 将指示色块完全浸没于戊二醛溶液 并及时取出 用吸水纸吸取多余的液体 横置于瓶盖上 注意不要将色块面朝下 等候3 8分钟的颜色变化 判读结果 低于3分钟 颜色变化不彻底结果不正确 超过8分钟 颜色逐渐褪去 也使判读困难 化学监测 戊二醛 化学监测 测戊二醛浓度试纸 五 消毒剂的监测 化学监测戊二醛浓度试纸操作操作结果判定 指示色块变成均匀黄色时 说明溶液的有效浓度高于所测最低有效浓度 指示色块全部或仍有部分白色 说明溶液的有效浓度低于最低有效浓度 五 消毒剂的监测 生物监测检测方法 A 涂抹法 用无菌吸管吸取消毒液1 0ml 加入9 0ml含有相应中和剂的采样管内混匀 用无菌吸管吸取上述溶液0 2ml 滴于干燥普通琼脂平板 每份样品同时做2个平行样 一平板置20 培养7天 观察其霉菌生长情况 另一平板置35 温箱培养72小时记数菌落数同时按照卫生部 消毒技术规范 2002年11月版 详见204页 按照3 17 15原则执行 检测致病菌 金葡 乙型溶血性链球菌 消毒液染菌量 cfu ml 每个平板上的菌落数 50 五 消毒剂的监测 生物监测检测方法 B 倾注法 用无菌吸管吸取消毒液1 0ml 加入9 0ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀 分别取0 5ml放入2只灭菌平皿内 加入已熔化的45 48 的营养琼脂15ml 18ml 边倾注边摇匀 待琼脂凝固 一平板置20 培养7天 观察其霉菌生长情况 另一平板置36 1 培养72小时 记数菌落数 同时按照卫生部 消毒技术规范 2002年11月版 详见204页 按照3 17 15原则执行 检测致病菌 金葡 乙型溶血性链球菌 消毒液染菌量 cfu ml 每个平板上的菌落数 20 五 消毒剂的监测 生物监测结果判断 消毒剂 每季度监测1次 其含菌量必须 100cfu ml 不得检出致病性微生物 灭菌剂 每月监测1次 不得检出任何致病性微生物 3 注意事项 采样后1小时内检测 附 消毒剂配置换算方法 百分比 与mg L换算法 1 10000mg L计算需消毒剂原液的ml数 欲配制消毒剂使用液的ml数 欲配制浓度 消毒剂原液浓度18 的过氧乙酸原液消毒剂 180000mg L 消毒液更换小标签 注意 如果自己配制的消毒剂 一定要有配置时间 失效期 配置人员签名 所有化学测试纸 卡 必须经过卫生部批准认可 并在有效期内使用 五 消毒剂的监测 中和剂 中和被检消毒药液的残效作用 在微生物杀灭试验中 以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂 使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂 不同消毒剂用不同的相应中和剂 而且需要等当量 才可完全消除其作用 六 内镜消毒灭菌效果监测 A 采样方法监测采样部位 为内镜的内腔面 监测采样方法 用无菌注射器抽取10ml含有相应中和剂的缓冲液 从待检内镜活检口注入 用15ml无菌试管从活检口收集 及时送检 2小时内检测 六 内镜消毒灭菌效果监测 B 菌落计数将送检液用旋涡器充分震荡 取0 5ml 加入2只直径9cm无菌平皿 每个平皿分别加入已溶化的45 48 营养琼脂15ml 18ml 边倾注边摇匀 待琼脂凝固 于35 培养48小时后 记数菌落数 结果判断菌落数 镜 2个平皿菌落数平均值 20 六 内镜消毒灭菌效果监测 卫生部要求 消毒后的内镜应该每季度进行生物学监测并记录完整 灭菌后的内镜应该每月进行生物学监测并记录完整 内镜消毒 灭菌后合格标准 消毒后的内镜合格标准为 细菌总数 20cfu 件 不能检出致病菌 灭菌后的内镜合格标准为 无菌检测合格 灭菌后的内镜和附件应按照无菌物品要求进行储存 六 内镜消毒灭菌效果监测 C 致病菌检测方法将送检液用旋涡器充分震荡 取0 2ml 分别接种直径9cm血平皿 中国蓝平皿和SS平皿 均匀涂布 于35 培养48小时后 观察有无致病菌生长 七 血液净化系统消毒效果的监测 监测要求 必须每月对入 出透析器的透析液进行监测 当疑有透析液污染或有严重感染病例时 应该增加采样点 如原水口 软化水出口 反渗水出口 透析液配液口等 并及时进行监测 当检查结果超过规定标准时 须再复查 七 血液净化系统消毒效果的监测 采样时间 每月对入 出透析器的透析液进行监测 判断结果标准值 透析器入口液的细菌菌落总数必须 200cfu ml透析器出口液的细菌菌落总数必须 200cfu ml并且不得检出致病性微生物原水口 软化水出口 反渗水出口的细菌菌落总数必须 200cfu ml 并不得检出致病性微生物 八 医院环境卫生学监测 医院环境卫生学监测内容包括 A 定期进行空气培养B 定期进行物体表面培养C 定期进行工作人员手培养 八 医院环境卫生学监测 医院环境分类 类 层流手术室 层流洁净病房 类 普通手术室 产房 婴儿室 早产儿室 普通保护性隔离室 供应室无菌区 烧伤病房 重症监护病房 类 儿科病房 妇产科检查室 注射室 换药室 治疗室 供应室清洁区 急诊室 检验科 各类普通病房和房间 类 传染病科及病房 八 医院环境卫生学监测 卫生部 医院感染管理规范 规定 医院应每月对手术室 重症监护 病房 室ICU 产房 母婴室 新生儿病房 骨髓移植病房 血液病房 血液透析室 供应室无菌区 治疗室 换药室等重点部门进行环境卫生学监测 当有医院感染流行时 怀疑医院环境卫生学因素有关时 应该及时进行监测 八 医院环境卫生学监测 A 空气消毒效果监测方法1 采样时间 在消毒处理后 操作前进行采样 2 采样方法 平板暴露法 或空气采样机 1 布点方法 室内面积 30m2 设内 中 外对角线3点 内 外点布点部位距墙壁1M处 室内面积 30m2 设4角及中央5点 4角的布点部位距墙壁1M处 2 采样方法 将普通营养琼脂肪平板 直径9cm 放在室内各采样点处 采样高度为距地面1 5m 采样时将平板打开 扣放于平板旁 暴露5分钟 盖好立即送检 空气监测 用直径9cm平皿 空气监测 平皿打开方式 八 医院环境卫生学监测3 检测方法 经采样的平板直接放入37 培养箱中培养48小时 观察最后结果平板暴露法结果计算公式 细菌总数 cfu m3 50000N A T 式中 A为平板面积 cm2 T为平板暴露时间 min N为平均菌落数 cfu 4 判断结果 类区域 细菌总数 10cfu m3未检出金黄色葡萄球菌 溶血性链球菌为消毒合格 类区域 细菌总数 200cfu m3未检出金黄色葡萄球菌 溶血性链球菌为消毒合格 类区域 细菌总数 500cfu m3未检出金黄色葡萄球菌 溶血性链球菌为消毒合格 5 注意事项 采样前 关好门 窗 在无人走动的情况下 静止10分钟进行采样 八 医院环境卫生学监测 B 物体表面消毒效果监测方法1 采样时间 在消毒处理后进行采样 2 采样方法 用5cm 5cm的标准灭菌规格板 放在被检物体表面 采样面积 100cm2 连续采样4个 用浸有 或含有相应中和剂 无菌洗脱液的棉拭子1支 在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次 并随之转棉拭子 剪去手接触部位后 将棉拭子投入10ml的无菌洗脱液试管中 立即送检 门把手等不规则物体表面直接用棉拭子涂擦采样 八 医院环境卫生学监测B 物体表面消毒效果监测方法3 检测方法 1 细菌总数检测 将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次 用无菌吸管吸取1 0ml待检样品接种于灭菌平皿 每一样本接种2个平皿 平皿内加入已熔化的45 48 的营养琼脂15ml 18ml 边倾注边摇匀 待琼脂凝固 置36 1 温箱培养48小时 计算菌落数 八 医院环境卫生学监测B 物体表面消毒效果监测方法2 致病菌检测 原则 致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测 常规检测如 金黄色葡萄球菌 乙型溶血性链球菌 八 医院环境卫生学监测B 物体表面消毒效果监测方法4 结果判定 类区域 物体表面细菌总数 5cfu cm2 类区域 物体表面细菌总数 10cfu cm2 类区域 物体表面细菌总数 15cfu cm2 并不得检