三基训练检验分册281-315

医学临床“三基”训练 检验分册(第四版）基础理论、知识问答（281-315）,5.2基础理论和基本知识问答 281.简述乳酸脱氢酶测定原理及注意事项。乳酸脱氢酶(I.DH)在辅酶I的递氢作用下,使乳酸脱氢而生成丙酮酸。 L一乳酸+NAD+#j丙酮酸+NADH+H+ NAD十还原成NADH,引起340nm处吸光度的改变,其吸光度的增加速率与标本中LDt浓度成正比。此法适应全自动生化仪连续监测。,若无条件连续监测,可在反应后加入2,4一二硝基苯肼,与丙酮酸反应生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性环境中显棕红色。根据颜色深浅计算酶活力大小。 注意事项:草酸、乙二胺四乙酸对本酶有抑制作用,故不宜使用。红细胞中乳酸脱氢酶含量较血清中约高100倍,故应避免溶血,并及时分离血清。,282.乳酸脱氢酶的顺向反应和逆向反应各有什么优点? 以乳酸为底物的反应称为顺向反应,以丙酮酸为底物的反应称为逆向反应。 (1)顺向反应的优点:此法所需的氧化型辅酶I(NAD+)较逆向反应需用的还原性辅酶I(NlADH)稳定,易得纯品,含抑制I+DH的杂质少,价格也较低。乳酸钠(或乳酸锂).底物比丙酮酸底物稳定。过量乳酸对I.DH的抑制低于过量丙酮酸对LDH的抑制。,(2)逆向反应的优点:NADI-用量少,只是正向反应所用NAD+的3。酶反应速率也比乳酸盐法快,单位时间内吸光度的变化较大,能使用比较少的样品在较短的时间内进行测定。酶活力随时间的线性关系较长。用NADI-或丙酮酸盐启动反应,其反应速度相同,而由乳酸盐到丙酮酸盐的反应中,I。DH活力取决于使用的启动剂。,283.用lyr一谷氨酰一a一萘胺作基质测定|IrGT是根据什么原理?常用的显色剂有哪几种? yGT作用于底物L一7氨酰一Q一萘胺,此底物既作为7一谷氨酰的供体,又作为受体,生成L一7一谷氨酰一Ly一谷氨酰一Q一萘胺和游离的Q一萘胺,后者与重氮化的对氨基苯磺酸反应,生成红色的偶氮化合物,色泽的深浅与酶活力成比例,与Q一萘胺标准液所显的颜色进行比较,可以求得样品中-),一GT的活力。,酶促反应生成的Q一萘胺,除用重氮化对氨基苯磺酸显色外,还可用固蓝B显色,或将Q一萘胺重氮化后用N一萘基二氨基乙烯显色。,284.试述血清淀粉酶碘一淀粉比色法测定原理及注意事项。 血清(或血浆)中Q一淀粉酶催化淀粉分子中Q一1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有Q一1,6糖苷键支链的糊精。在有足够量基质的条件下,反应后加入的碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较其吸光度,从而推算出淀粉酶的活力单位。,注意事项:草酸盐、枸橼酸盐、EDTA.一Na2及氟化钠对淀粉酶活性有抑制,肝素无抑制作用。酶活性在400U以下时与底物的水解量成线性,如测定管吸光度小于空白管吸光度一半时,应将血清量加大稀释倍数或减少血清加人量,测定结果乘稀释倍数。本法亦适用于其他体液淀粉酶的测定。唾液含高浓度淀粉酶,须防止混人。淀粉溶液若出现混浊或絮状物,不能再使用。,285.试述血清淀粉酶酶法的测定原理。 葡萄脊6一磷酸+NADP-一j堕塑奠生堕堕堕塑6一磷酸葡萄糖酸一NAD-.PH+H+ 在340nm处测定吸光度值的变化即可推算出AMS的浓度。,286.何谓同工酶? 同工酶指在同种属生物、同一生物体、同一组织或器官,甚至同一细胞内具有相同催化活性,并以多种分子形式存在的酶。 .,287.反映肝细胞损伤的酶类有哪些7 . 反映肝细胞损伤的酶包括:转氨酶(包括AI。T和AST)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)、谷氨酸脱氢酶(G【.DH)、醇脱氢酶(ADH)、山梨醇脱氢酶(SDH)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶()CT)、鸟嘌呤脱氨酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAI.,)、血清胆碱酯酶(CH E),卵磷脂一胆固醇转酰基酶(I.CAT)等。,288.反映胆道梗阻的酶类有哪些? 反映胆道梗阻的酶类有碱性磷酸酶(AI。P)、氨肽酶、5一核苷酸酶(5NT)、.),一谷氨酰转肽酶(.),一GT)等。,289.用于诊断心肌梗死的主要血清酶有几种? 主要有3种:AST、I.DH和CK以及它们的同工酶。 290.诊断胰腺疾病的主要血清酶有哪些? 主要有Q一淀粉酶和脂肪酶。Q一淀粉酶是诊断急性胰腺炎最常用的指标,一般在发病后212小时血清Q一淀粉酶活力开始上升,1272小时达高峰,4天左右恢复正常。血清Q一淀粉酶升高常伴有尿淀粉酶增高,而且尿淀粉酶阳性率和升高程度都可高于血清淀粉酶,维持时间也较长。急性胰腺炎时,血清脂肪酶活力升高,其增高程度可大于淀粉酶,可高于正常上限1 O倍以上,且持续时间较长,特异性较高。,291.诊断骨骼肌疾病时常测定的血清酶有哪些? 有CK、AI。D(醛缩酶)、AST、和I,DH。 292.常用的肿瘤标志酶有哪些? 常用的肿瘤标志酶有碱性磷酸酶(ALP)及其同工酶、酸性磷酸酶(ACP)及同工酶、5一核苷酸酶(5一NT)、|),一谷氨酰转移酶(7一GT)及同工酶、醛缩酶(AI。D)、磷酸己糖异构酶(PHI)、乳酸脱氢酶(I.,DH)及同工酶、芳香烃羟化酶(AHH)、Q一1,4葡萄糖苷酶及组胺酶等。,293.试述尿中17一酮类固醇测定原理及临床意义。 尿中1 7一酮类固醇(17一KS)指尿中出现的所有C一1 7为酮基的类固醇类物质。尿中排出的内源性1 7一KS包括雄酮、异雄酮、脱氢异雄酮及其代谢产物等。17一KS是肾上腺皮质激素及雄性激素的代谢产物,大部分为水溶性的葡萄糖醛酸酯或硫酸酯,必须经过酸的作用才能使其水解成游离的类固醇,再用有机溶剂提取,经过洗涤除去酸类与酚类物质。,17一酮类固醇分子结构中的酮一亚甲基(一COCH2一)能与碱性溶液中的间二硝基苯作用,生成红色化合物。 尿17一酮类固醇增高见于肾上腺皮质功能亢进、肢端肥大症和睾丸间质细胞肿瘤等,减低见于肾上腺功能减退、性功能减退以及某些慢性病如结核、肝病和糖尿病等。,294.试述尿中17一羟皮质类固醇测定原理及临床意义o 1 7一羟皮质类固醇(1 7-OHCS)为肾上腺皮质所分泌的激素,主要为皮质素及氢皮质素。测定尿中17一OI-tCS是指对尿中C-17上有羟基的所有类固醇类物质的测定。待测物在酸性条件下,用正丁醇抽提后再用稀碱处理,除去色素杂质,然后将正丁醇蒸干,用无水乙醇溶解抽提物,再与盐酸苯肼的硫酸溶液作用而产生黄色,称为Porter-Silber颜色反应。用同样呈色的氢化可的松作标准液,以分光光度汁比色,而求得其含量。,17一()HCS增高见于肾上腺皮质功能亢进,如库欣综合征、肾上腺皮质瘤及双侧增生、肥胖症和甲状腺功能亢进等,尤以肾上腺皮质肿瘤增生最为显著。减少见于肾上腺皮质功能不全,如艾迪生病和西门症。,295.用滴定法测定血浆(清)二氧化碳结合力(CQCP)应注意什么? (1)应立即分离血浆(清),并避免与空气接触。 (2)0.01molL氢氧化钠不宜用钠玻璃瓶储存,且应密封,以避免从空气中吸收C02。因0.01toolI.,盐酸较稳定,故应每天作校正滴定,用酚红作指示剂,以出现红色且10秒钟不褪色为准进行质量监测。,(3)所用器材及生理盐水均应为中性。 (4)每次均应以生理盐水加酚红指示剂作为对照,观察颜色变化。 296.血浆(清)二氧化碳结合力(lCP)与总二氧化碳(Tool2)有什么区别? T002是指血浆中以各种形式存在的C02的总含量,包括HC隽的COz(95)与溶解状态的CO2等。C02 CP是指血浆中以HO蹶形式存在的COz含量,即100mI,血浆中有多少毫升C02来自HC0。TC02参考值:动脉血为232 7mmolL,静脉血为2429mmolL。COz CP静脉血为2327mmolL。,297.滴定法测定生CP的临床意义如何? COzCP在反映代谢性酸碱平衡失调时,能较及时地反映体内碱储量的增减变化。对呼吸性酸碱平衡失调时,不能及时反映血中C02的急剧变化。伴随通气障碍而发生的酸碱平衡失调的判断,意义有限。目前血气分析仪已广泛使用,滴定法C02CP测定将被取代。,298.血气分析对血液样品有什么要求?为什么? (1)因静脉血来自身体的不同部位,而动脉血可反映全身情况,故血气分析以动脉血为宜。 (2)采得的血液样品必须严格隔绝空气。因为空气中的氧分压高于动脉血,二氧化碳分压低于动脉血,一旦接触空气可使血液中P02及PC()2都有改变而无测定价值。,3)血液样品采集后必须立即检测。如因故不能及时检测,样品必须置冰水浴中或冰箱内,但最长不能超过1个小时,因为血细胞在体外仍有糖酵解作用,不断消耗02产生C02和乳酸,使P0z和pH值下降而PC02上升。在冰箱中仅使其反应延缓而已。 (4)血液必须抗凝,以防止血气分析仪中毛细管道被阻塞。抗凝剂应选用肝素(浓度为1000UmL或10mgmL,溶于生理盐水)。将肝素0.2m1.,抽人针筒内反复抽动,使针管全部湿润,将多余肝素全部排出,注射器内残留肝素即可抗凝。,299.血气分析仪直接测得的参数有哪几个?还可运算出哪些参数?直接测得的参数有3个:pH值、二氧化碳分压(P(弛)、氧分压(P(_)2)。 其他参数:根据仪器性能不同,一般可测出氧饱和度(Sat02)、二氧化碳总量(TOD2)、实际碳酸氢根(AB)、标准碳酸氢根(SB)、缓冲碱(BB)、剩余碱(BE)、肺泡一动脉氧分压差(AaI02)等。,300.试述离子选择电极【lSE)法测K、Na、CI的原理o . 离手选择电极分析法是以测量电池电动势变化为基础的定量分析法。将离子选择电极和一个参比电极连接即构成一个测量电池。将测量电池置于待测的电解质溶液中,由于离子活度不同而产生不同的电动势变化,这种变化与溶液中的离子浓度成正比,通过能斯特(Nernst)方程即可求出离子浓度。,301.简述血清总钙和离子钙测定原理o (1)血清总钙测定原理:是利用血清中的钙离子在碱性溶液中可与染料结合生成有色物质来测定。常用染料有甲基麝香草酚蓝(MTB)和邻甲酚酞络合酮(OCPC)。同时在试剂中加人8一羟基喹啉,可以消除镁离子的干扰。而偶氮砷法则是利用在中等酸度(pH值约为6)时偶氮砷与钙离子的亲和性远大于镁离子的特性来测定。,(2)离子钙测定原理:采用离子选择电极法测定。钙离子选择电极包括一层含有内置参考电极的钙离子选择膜和氯化钙内部参考溶液。该内部参考溶液常常含有饱和氯化银和生理浓度的氯化钠和氯化钾。外置参考电极与样品通过液体一液体或氯化钾甲酸钠盐桥连接组成化学电池。根据能斯特(Nernst)方程,电池两侧的电位差与离子钙浓度的对数成正比。,302.简述体内钙离子的生理功能。 体内钙离子的生理功能包括:血浆钙离子可降低毛细血管和细胞膜的通透性和降低神经肌肉的兴奋性;作为血浆凝血因子参与凝血过程并有对多种凝血因子的激活;在骨骼肌中的钙离子可引起肌肉收缩;起重要调节作用包括作用于质膜影响其通透性及膜的转运;在细胞内作为第二信使起着重要的代谢调节作用。,303.简述速率法测尿素(1嘞)的测定原理。 尿素在脲酶的作用下,水解生成氨和二氧化碳。氨在a一酮戊二酸和还原型辅酶I存在下,经谷氨酸脱羟酶(GI.DI-)催化生成谷氨酸。同时,还原型辅酶I被氧化成氧化型辅酶I。还原型辅酶I在340nm波长处有吸收峰,其吸光度下降的速率与待测样品中尿素含量成正比。,304.简述苦昧酸和酶法测肌酐的原理。 血清中的肌酐与碱性苦味酸反应,生成黄红色的苦味酸肌酐复合物,在510nm波长处进行比色测定。吸光度的升高与肌酐含量成正比。 酶法测肌酐是利用特异性的肌酐水解酶将肌酐水解,再检测其水解产物(NH3、肌酸等),以求得肌酐含量。酶法测肌酐的特异性要比苦味酸法高,结果也准确,缺点是酶法试剂价格昂贵。,305.血糖的利用途径有哪些? 血糖的利用途径有:有氧氧化或无氧酵解功能。在肝和肌肉细胞内合成糖原。转化为甘油脂肪酸合成脂肪。转化为氨基酸合成蛋白质。转化为其他糖类或衍生物。,306.胰高血糖素的作用有哪些? 胰高血糖素的作用有:促进葡萄糖通过肌肉和细胞的转运率加快,使组织摄取葡萄糖增多。促进葡萄糖磷酸化和氧化分解。抑制糖异生关键酶而使异生减少。促进葡萄糖合成糖原、蛋白质和脂肪。,307.糖尿病性糖耐量降低有哪些表现? 糖尿病性糖耐量降低的表现有:空腹葡萄糖浓度8.OmmolL。葡萄糖峰值10.OmmolL并出现糖尿。延迟(2小时后)才回复到空腹水平。,308.有哪些原因可导致低蛋白血症? 下列原因可导致低蛋白血症:蛋白质合成减少。营养不良或吸收不良。遗传缺陷。蛋白质异常丢失。组织损伤或炎症。清蛋白分布异常。,309.载脂蛋白的作用有哪些? 载脂蛋白的作用有:参与组织或细胞间脂类的运输和分配。维持脂蛋白颗粒的结构。能与细胞膜上特异的受体结合影响脂类的摄取。,310.引起继发性高脂血症和高脂蛋白血症的原因有哪些? 引起继发性高脂血症和高脂蛋白血症的原因有:肥胖、嗜酒、肾病、肝病、糖尿病、药物及内分泌功能紊乱。,311.尿酸生成过多的因素有哪些? 尿酸生成过多的因素有:来源过多。食物嘌呤来自有核蛋白,经小肠一系列酶的作用,降解为嘌呤碱而吸收。嘌呤代谢紊乱。罕见的遗传性疾病,多由于单一酶缺陷所致。,312.写出均数、标准差、标准误及变异系数的符号、公式及意义o (1)均数:符号为又。均数代表一组观察值的集中趋势。 (2)标准差:符号为s。标准差代表一组观察值的离散程度。 (3)标准误:符号为&或SE。标准误是样本均数的标准差,即样本均数与总体均数的接近程度。,(4)变异系数:又称离散系数,符号为CV。变异系数是相对数,没有单位,因此更便于资料之间的分析比较。CV常用于比较均数相差悬殊的几组资料的