直接滴定法测食品中还原糖实验报告.doc

1. 目的 掌握直接滴定法测还原糖的原理、操作、条件及注意事项。2. 原理样品经前处理提取还原糖，在加热条件下，直接滴定一定量的碱性酒石酸铜标准溶液，以次甲基蓝作指示剂，根据样液消耗体积，计算样品中还原糖量。3. 试剂3.1 碱性酒石酸铜标准溶液（还原糖因数f/mg10mL-1）3.1.1 甲液:称取23.10g硫酸铜（CuSO45H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至100mL3.1.2 乙液: 称取115.33g酒石酸钾钠及33.30氢氧化钠，溶于水中，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶中瓶中3.2 乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL. 加水溶解并稀释至100mL3.3 亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL3.4 盐酸3.5 葡糖糖标准溶液：精密称取7.0000g经过98100干燥至恒量的纯葡萄糖加水溶解，并以水稀释至1000mL.此溶液每毫升相当于7mg葡糖糖4. 仪器碱式滴定管、电炉5. 样品硬糖（m样=5.8002g）6. 操作6.1 样品处理称取样品5.8002g置于小烧杯中，加40mL水，40微热溶解，冷却后加40mL水，调节PH至中性，加水定容至100mL，过滤后收集滤液即为样品溶液。6.2 标定碱性酒石酸铜溶液吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置150mL三角锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，置于电炉上加热至沸（要求控制在2min内沸腾），然而趁热以每秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖的总体积。同时平行操作三份，取其平均值，计算每10mL（甲液乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量mg，即还原糖因数f。6.3 样品溶液预测吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL三角锥瓶，加水10mL，加入玻璃珠2粒，摇匀，在电炉上2min内加热至沸，趁热以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的迅速滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样品溶液消耗体积。6.4 样品溶液测定（精确滴定）吸取5.0mL碱性酒石酸甲液及5.0mL乙液，置于150mL三角锥瓶，加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管加入比预备测定体积少1mL的样品溶液，使2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的迅速滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样品溶液消耗体积，同法平行操作三次，得出平均消耗体积。7. 数据记录7.1 原始数据7.2 可疑值弃留测得数据符合要求，无可疑值7.3 整理数据m样=5.8002g粗滴/mL精滴/mLV1V2V3标定碱性酒石酸铜溶液7.106.806.606.95样品溶液4.904.304.704.50表1.还原糖测定实验数据整理8. 计算f10-3X = m样/V定V样精滴式中：X 样品中还原糖含量（以葡糖糖计），%； f 10mL碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖（以葡糖糖计）质量，mg； m样 样品质量，g； V样精滴 测定溶液的消耗体积，mL;标定碱性酒石酸铜：V标=（V标1+V标2+V标3）/3=（6.80+6.60+6.95）/3=6.78mL f = 7V标=47.46mg样品溶液：V样=（V样1+V样2+V样3）/3=（4.30+4.70+4.50）/3=4.50mL f10-3 47.46mg10-3 X% = 100% = = 18.2 m样/V定V样精滴 5.8002g/100mL4.50mL9. 结果糖中还原糖的含量为18.2%10. 结果可靠性分析10.1 精密度标定碱性酒石酸铜溶液：平均偏差=（0.02+0.18+0.17）/3=0.12相对平均偏差=(0.12/6.78) 100%=1.77% 样品溶液：平均偏差=（0.20+0.20+0.00）/3=0.13相对平均偏差=(0.13/4.50) 100%=2.96%10.2 误差分析10.2.1 根据实际操作情况分析误差产生原因滴定时由于终点颜色变化判断不准，可能终点已到但仍继续滴加了试剂，导致消耗试剂体积过多，结果偏低。10.2.2 误差的方向性正误差11. 结论称取5.802g样品溶解定容至100mL.标定碱性酒石酸铜溶液三次平行实验各消耗葡萄糖标准溶液6.80mL、6.60 mL 、6.95 mL、平均值为6.78mL。样品溶液滴定消耗体积分别为4.30 mL、4.70 mL、4.50 mL。计算出样品中还原糖含量为18.2%。12. 思考题12.1 碱性酒石酸铜液试剂的组成？各试剂的用途？特点？碱性酒石酸铜溶液由甲液、乙液组成，甲液由硫酸铜和次甲基蓝组成，乙液由酒石酸钾钠和氢氧化钠组成。碱性酒石酸铜甲液与乙液混合，会生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，沉淀会和酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的的可溶性酒石酸钾钠铜络合物，以次甲基蓝为指示剂，用样液滴定，样液中还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，为滴定终点。特点：甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则就是酸钾钠铜络合物长再碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。 12.2