abo血型鉴定

项目二 血型与输血,任务一 ABO血型鉴定,第一节 人类血型,一、血型的概念血型是血液成分的一种遗传多态性，是产生抗原抗体的遗传性状。二、血型的种类：1、红细胞血型: 2、白细胞血型: HLA抗原,又称为移植抗原3、血小板血型:,ABO血型系统 Rh血型系统,三：血型研究的用途输血器官移植 新生儿溶血病亲子鉴定、法医学等,第二节 ABO血型,一、ABO血型分型 ABO血型是根据红细胞表面是否含有A、B抗原来分型的。二、ABO血型抗原与血型物质 A、B、H 抗原1、 血型物质：每个个体所专有的血型抗原物质被称为血型物质.2、分泌型与非分泌型 脑脊液中不含血型物质,3、测定血型物质的临床意义：辅助测定ABO血型；鉴定抗体的性质：可中和天然抗体制备混合血浆检查羊水中的血型物质，可用于预测胎儿的ABO血型。,三、ABO血型抗体（一）天然抗体（二）免疫抗体,IgM,IgG,天然抗体与免疫抗体的鉴别,无察觉 有抗原刺激（妊娠、输血）,大 小,4-25 37,易被血型物质中和 大多不能被血型物质中和,不能 能,盐水介质 酶、抗人球蛋白等,IgM,IgG,四、ABO血型的亚型亚型：属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数不尽相同的情况A型 ：A1 A1和A抗原，血清中含有抗B抗体A2 只有A抗原，血清中含抗B和抗A1抗体,五、ABO血型的遗传A和B为显性基因，O为隐性基因举例： A B AO BO,AB,AO,BO,OO,任务一（第三节）ABO血型鉴定,一、标本的采集柠檬酸钠抗凝剂二、红细胞悬液的配制1、洗涤：2、配制25的红细胞悬液5红细胞悬液比容红细胞1滴生理盐水1ml2红细胞悬液比容红细胞1滴生理盐水2ml,三、标准血清要求 1、特异性 2、效价 3、亲和力 4、不含冷凝集素 5、不含补体，无任何污染四、标准红细胞悬液的制备,五、ABO血型鉴定方法正定型：反定型：（一）试管法：（二）玻片法；,用已知抗A、抗B和抗AB分型血清来测定红细胞上有无相应的A、B抗原,：,用已知A抗原和B抗原红细胞来测定血清中有无相应的抗A、抗B抗体。,（三）注意事项1、严格查对2、操作方法应按规定先加血清，再加红细胞悬液，3、试验用器材应清洁干燥4、玻片法勿将干涸的红细胞聚集误认为凝集5、反定型一般不宜采用玻片法6、试管法离心后应先观察上清有无溶血,对于工作人员1%的错误，病人就是100%的误诊！,前身物质(oh),经H基因作用,H抗原,经A基因作用,A抗原,经B基因作用,B抗原,（一）试管法 1、正定型 取10mm60mm试管3支，分别标明抗A、抗B、抗AB，用滴管加入相应的抗A、抗B、抗AB标准血清各1滴，再加入被检者5红细胞盐水悬液1滴，轻轻混匀。 2、反定型 取同样试管3支，分别标明A、B、O红细胞，用滴管各加入被检者血清1滴，再分别加入A、B、O型5标准红细胞悬液1滴，轻轻混匀。 3、立即以RCF177g（1000r/min）离心1分钟。 4、取出试管，先观察有无溶血，再轻弹试管，观察有无红细胞凝集，如肉眼不见凝集，应将反应物倾倒于玻片上，在显微镜下用低倍镜观察。结果判断可见表75。,实验操作,ABO血型鉴定正定型 试管法：,A,B,标记号,1滴抗B,1滴RBC悬液,标记号,1滴抗A,1滴RBC悬液,1000转/min离心1分钟，观察凝集结果,ABO血型正反定型结果判定,标准血清 被检者血型 标准红细胞 被检者红细胞 被检者血清抗A 抗B 抗AB A细胞 B细胞 O细胞 A型 B型 O型 AB型 ,（二）玻片法 1、正定型 取清洁玻片或白瓷板，用蜡笔画出方格或圆圈，依次标明抗A、抗B、 抗AB，按标记用滴管加入相应的标准血清各1滴，再加入被检者5红细胞悬液1滴，转动玻片混匀。 2、反定型 另取清洁玻片或白瓷板，用蜡笔画出方格或圆圈，依次标明A细胞、B细胞、O细胞，用滴管加入被检者血清各1滴，再按标记加入5标准A、B、O红细胞悬液1滴。转动玻片混匀。 3、不断转动玻片或白瓷板，使血清与细胞充分混合，室温下（2024）1015分钟，观察有无凝集和溶血。如用玻片试验，必要时可用显微镜在低倍镜下观察。红细胞凝集判断标准图72。,实验操作,ABO血型鉴定正定型 玻片法：,A,B,各加一滴红细胞,抗B,抗A,转动玻片，15分钟后观察结果,实验十六 ABO血型鉴定RH血型鉴定,实验目的,1、熟练掌握ABO血型鉴定方法。2、熟悉RH血型鉴定的方法及结果判定。,实验器材、试剂,器材毛细血管采血用具、离心机、试管、玻片试剂1、生理盐水2、标准血清3、抗D抗体,实验安排,两人一组互取标本，配制5%红细胞悬液1、单号：ABO血型鉴定正定型：玻片法2、双号：ABO血型鉴定正定型：试管法3、每人进行Rh血型鉴定,提问,玻片法血型测定的方法及结果判读,实验操作,两人一组毛细血管采血 1、配制5%红细胞悬液： 末梢采血1滴+10滴生理盐水 2、ABO血型鉴定正定型 玻片法：,A,B,各加一滴红细胞,抗B,抗A,转动玻片，15分钟后观察结果,实验操作,ABO血型鉴定正定型 玻片法：,A,B,各加一滴红细胞,抗B,抗A,转动玻片，15分钟后观察结果,实验操作,3、ABO血型鉴定正定型 试管法：,A,B,标记号,1滴抗B,1滴RBC悬液,标记号,1滴抗A,1滴RBC悬液,1000转/min离心1分钟，观察凝集结果,实验操作,4、Rh血型鉴定:,-1滴红细胞悬液,1滴抗D-,37水浴30分钟,Rh阳性,Rh阴性,结果报告,ABO血型的报告方式： ABO血型 型Rh血型的报告方式： Rh血型：阴性 Rh血型：阳性,注意事项,要有及高的责任心，避免发生血型鉴定错误对于工作人员1%的错误，病人就是100%的误诊！,作业