协和学习班讲稿0911

风湿病相关自身抗体检测的开展,和杰创新,北京和杰创新生物医学科技有限公司成立于2005年5月,公司简介,公司位于风景优美秀丽、高新技术云集的北京经济技术开发区,和杰创新,公司简介,和杰公司专注于以风湿性疾病自身抗体为主的体外诊断试剂的研发、生产和销售,我们致力于开发和推广既有国际先进水平又有临床实用价值的诊断产品和检测技术，为我国医学诊疗事业提供更多新的帮助,和杰创新,检测自身抗体的临床意义,疾病的诊断及鉴别诊断疾病活动性及预后的判断,和杰创新,系统性红斑狼疮（SLE）自身抗体谱,ANA抗dsDNA抗体AHA抗ENA抗体（Sm、U1-RNP、SSA、SSB）抗心磷脂（aCL）抗体等,和杰创新,类风湿关节炎（RA）自身抗体谱,类风湿因子（RF）抗核周因子（APF）抗角蛋白抗体（AKA）抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体抗Sa抗体,和杰创新,血管炎自身抗体谱,ANA抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗血管内皮细胞抗体（AECA）抗肾小球基底膜（GBM）抗体,和杰创新,干燥综合征 （SS）自身抗体谱,ANARF抗ENA抗体（SSA、SSB）,和杰创新,多发性肌炎（PM）/皮肌炎（DM）自身抗体谱,抗Jo-1抗体抗PM-Scl抗体抗PL-12抗体抗PL-7抗体抗Mi-2抗体抗SRP抗体,和杰创新,自身免疫性肝病自身抗体谱,ANA ANCA抗线粒体抗体（AMA） 抗SP100抗体抗GP210抗体抗平滑肌抗体（ASMA） 抗肝肾微粒体（LKM）抗体抗肝细胞质（LC-1）抗体 抗可溶性肝抗原（SLA）抗体,抗核抗体谱（ANAs）,ANAs,抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色体DNA蛋白抗核仁抗体,抗DNA抗体 抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4,抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,RA33,PCNA.,dsDNAssDNA,抗着丝点抗体（ACA),抗5sRNA,和杰创新,ANA,间接免疫荧光法：抗原底物包括HEp-2细胞、动物（大鼠、猴）肝脏、肾脏切片。ELISA：抗原为细胞粗提破碎液或常见纯化抗原的组合。,和杰创新,ANA（）,均质型Homogeneous,和杰创新,ANA（）,斑点型Speckle,和杰创新,ANA（）,着丝点型Centromere,和杰创新,抗ENA抗体,ENA：可提取性核抗原成分：核酸与核蛋白功能：参与细胞内的DNA的复制、转录以及蛋白的翻译合成来源：多种组织中获得，无种属差异，有组织不均一性意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的一簇抗体,和杰创新,抗ENA抗体临床意义,有助于疾病的诊断： 抗Sm抗体系统性红斑狼疮（SLE） 抗ScL-70抗体系统性硬化症（SSc） 抗Jo-1抗体多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM） 高滴度抗U1RNP抗体混合性结缔组织病（MCTD） 抗rRNP抗体狼疮脑病 抗SSA/SSB抗体干燥综合征（SS）/红斑狼疮研究发病机理,和杰创新,抗Sm抗体的发现者,Eng M Tan 教授，美国“自身抗体之父”,和杰创新,抗ENA抗体（酶免斑点法）,和杰创新,抗ENA抗体（）,单一抗体检测SSASSBScl-70Jo-1,和杰创新,抗ENA抗体（）,双抗体检测Sm/RNP,和杰创新,抗dsDNA抗体,和杰创新,抗dsDNA抗体,SLE 血清特异性抗体 活动期SLE 80%-90%抗体滴度的消长与SLE疾病活动程度相关 可用于SLE 疾病活动期判断药物疗效观察,和杰创新,短膜虫（CL),阳性荧光模式 核与动基体表现为均质或环状荧光，成对出现。核较大，位于虫体一端；动基体较小靠近鞭毛端。,抗dsDNA抗体,和杰创新,抗dsDNA抗体（）,和杰创新,抗核周因子（APF）,检测方法：间接免疫荧光法（IIF）底物来源：頬粘膜上皮细胞 靶位： 细胞核周围的球性透明角质颗粒 胞浆内、均质形、47m抗原特性：不溶性蛋白、但易受冻融影响,和杰创新,APF （）,和杰创新,抗角蛋白抗体 (AKA）,检测方法：间接免疫荧光法底物来源：Wistar大鼠食道的中1/3段抗原靶位：角质层荧光特点：板层状或点线状,和杰创新,AKA（）,和杰创新,APF/AKA对RA诊断价值,和杰创新,抗CCP抗体,1 理想的特异性和敏感性,抗CCP抗体非常特异且出现在约80% 的类风湿关节炎病人中,和杰创新,CCPRFnpos%npos%类风湿关节炎1831437818314981健康志愿者95119511系统性红斑浪疮59005958硬皮病620062915骨关节炎27002714反应性关节炎401240410肌炎60355459原发性干燥综合征6459291759血管炎300030413银屑病29131900克隆氏病40004000溃疡性结肠炎40004000非类风湿关节炎总数44692%4304510%,CCP和RF的敏感性、特异性比较,和杰创新,CCP和RF在感染性疾病中,CCPRFnpos% npos%Mycoplasm100019211Syphilis0-14214Chlamydia0-14214Legionella100020210Borrelia80020210Infectious endocarditis40014214Tuberculosis200020420Yersinia20002000Salmonella20002015Rubella200020210Streptococcus pyogenes20152000Infectious mononucleosis (EBV)2000901011Parvo virus B19150016319Malaria1011010220Schistosoma20002015Toxoplasma20002015Leishmania2000201155Chagas syndrome131810550总数25031%3875213%,和杰创新,RA的血清学指标在老年人中,npos% pos% pos%RA332886%-2886%老年人*300*21%*248%*5217%78-88 yrs健康对照组670-35%40-65 yrs*1 RA 病人,CCPAFARF-test,T. Palosuo et al. Ann Rheum Dis 2003, 62: 261-263,和杰创新,L. de Rycke et al. Ann Rheum Dis 2004, 63: 1587-1593.,118 新近的RA（ACR标准）,146 新近的非RA (OA, SLE等),CCP和RF的比较分析,和杰创新,2 出现在疾病早期,抗CCP抗体往往在病人第一次就诊时就检测出阳性,抗CCP抗体,和杰创新,抗CCP抗体,Anti-CCP can be detected years before appearance of the first symptoms,和杰创新,3 能够判断疾病的预后,抗CCP抗体结果往往与侵蚀性关节破坏相关,抗CCP抗体,和杰创新,诊断早期RA新标准的发展,自限性 vs. 持续性 持续非侵蚀性vs.持续侵蚀性 危险系数得分 危险系数得分症状持续时间 6 周、 6 月5.4931.440晨僵 1年1.9611.961关节炎 3 关节区域1.7311.731对称性关节炎1.6513.782IgM RF 5 IU 2.9922.992抗CCP抗体 92 IU4.5834.583放射学改变 2.752NANA,Visser et al., Arthritis Rheum 2002, 46: 357-365,和杰创新,抗CCP抗体,ACR 标准早期诊断不理想Visser et al提出早期诊断的新标准 Arthritis Rheum 2000,46:357-365Anti-CCP 包括在新标准中,和杰创新,Immunoscan CCplus（欧洲诊断公司）,第二代抗CCP抗体试剂盒（ELISA）Euro-Diagnostica全球唯一生产商已获得中国SFDA批准和杰公司为其中国首席服务商,和杰创新,不同CCP来源各不相同,摘自：Clinical Chemistry 53:8,1527-1533(2007),和杰创新,不同CCP试剂诊断特性比较,和杰创新,抗CCP抗体对RA的诊断价值,Ann Rheum Dis 2006;65:845-851,和杰创新,CCP发现者Walther J. van Venrooij教授,和杰创新,抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）,和杰创新,特殊颗粒,胞核,胞膜,分泌颗粒,胞浆,嗜天青颗粒,ANCA,和杰创新,ANCA,胞浆型ANCA（cANCA）核周型ANCA（pANCA）,典型pANCA,不典型aANCA,乙醇固定,和杰创新,cANCA（）,乙醇固定,福尔马林固定,和杰创新,pANCA（）,乙醇固定,福尔马林固定,和杰创新,ANCA的首位发现者（2004年）,和杰创新,自 身 免 疫 性 肝 病 诊 断,1、病史 2、临床表现 3、体征,和杰创新,自免肝特异性自身抗体,和杰创新,ASMA（）,I 型AIH的标志性自身抗体 靶抗原为F-肌动蛋白。 荧光模式：可见胃的肌层，粘膜肌层，粘膜腺体间平滑肌细胞呈现胞浆型荧光。,和杰创新,抗LKM抗体(),II型自身免疫性肝炎的标志性抗体 靶抗原为靶抗原是细胞色素P450 IID6 。 荧光模式：以肾脏为标准基质，肾脏近端肾小管细胞呈现胞浆型荧光，而远端肾小管为阴性。,和杰创新,AMA（）,PBC的标志性抗体 靶抗原是线粒体内膜的丙酮酸脱氢酶及-酮戊二酸脱氢酶复合物 荧光模式：以大鼠肾脏为标准基质，近端肾小管及远端肾小管细胞胞浆呈现颗粒型荧光。,和杰创新,和杰创新公司其它产品,MPO/PR3：ELISA或斑点法肾小球基底膜抗体（GBM）磷脂类抗体：aCL、2-GP1血小板自身抗体： 靶抗原为GPIIb/IIIa、Ib/IX、Ia/IIa,和杰创新,北京和杰创新公司网站,谢 谢！,和杰创新,和杰创新技术服务一：人员培训,邀请对象： 检验科或风湿科实验室的操作者培训内容： 理论实践（观摩、动手练习和结果观察）时间：一周左右,和杰创新,服务对象：国内有意购买和使用我公司产品的重点客户方式：我公司负责样品免费邮寄、指导使用和结果判断，配有阳性示教片。,和杰创新技术服务二：样品试用装,和杰创新,和杰创新技术服务三：荧光显微镜,和杰创新,OLYMPUS光学显微镜OLYMPUS CX21OLYMPUS其它型号光学显微镜荧光装置荧光光源B/G激发光波滤色组件 护目屏电源,和杰创新技术服务三 ：荧光显微镜,和杰创新,OLYMPUS（CX21）临床和生物教学显微镜的新标准,采用了研究级光学系统UIS2无限远光学校正系统及