临床免疫学检查

第十二节临床常用免疫学检查,万杰医学院临床护理教研室刘玉洁,2,一、免疫球蛋白测定,【概述】免疫球蛋白(Ig)通常是指具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白。应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类： IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。IgG：含量最多或最主要的Ig（75%），唯一能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。具有抗细菌、抗病毒及抗毒素等作用。,3,IgA：约占10%，SIgA在局部免疫（呼吸道、消化道等）中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。IgM：分子量最大，由5个IgM单体通过J链连接。是最早出现的Ig，是抗原刺激后最早出现的抗体，其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高5001000倍。测定方法：单向免疫扩散法（RID）或免疫比浊法。,4,【参考值】 免疫比浊法 IgG：5.6517.65g/L IgA：0.43.5g/L IgM ：0.53.0 g/L【临床意义】免疫球蛋白增高：多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病，如SLE、类风湿关节炎等。单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。,5,免疫球蛋白降低：常见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。,6,二、血清补体测定,【概述】 补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白，分3组：9种补体成分（C1C9）；B、D、P、H、I 因子；补体调节蛋白，如C1抑制物、C4结合蛋白、促衰变因子等。,7,（一）. 总补体溶血活性（CH50）测定,概述：测定主要是9种补体成分（C1C9）的总体水平。一般以50溶血率作为判别点，即CH50 。参考值 ：试管法 50000100000U/L,8,临床意义：,增高：见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。降低：见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。,9,（二）. 血清补体C3测定,血清补体C3：主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用.参考值：免疫比浊法0.851.70g/L临床意义增高：作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。,10,降低：见于慢性肝病、肝硬化、急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病（如SLE）、AIDS、遗传性补体缺乏症等。,11,（三）. 血清补体C4测定,血清补体C4：由肝脏、吞噬细胞合成，参与补体的经典激活途径。参考值：单向免疫扩散法：0.5330.109g/L.临床意义：基本与C3相似，降低还见于多发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏症等。,12,三. 病毒性肝炎标志物检查,1. 肝炎病毒种类:HAV: RNA病毒, 粪口传播, 预后较好HBV: DNA病毒, 输血,垂直,密切接触传播, 预后相对差, 慢性乙肝肝硬化肝癌HCV: RNA病毒, 同上HDV: RNA病毒, 同上HEV: RNA病毒,粪口传播, 预后较好,13,14,2. Virus marker-特异性抗原和特异性抗 体的检查HAV: HAVAg(Elisa) : 阴性HAV-Ig (Elisa) : HAV-IgA ,HAV- IgM阴性 HAV-IgG: 部分成 人阳性,15,临床意义HAV-IgM+: 感染后1-4周出现阳性(高滴度) , 持续2-3个月(低滴度), 逐渐转阴(12个月) 是新近感染HAV的证据 是甲肝早期诊断的特异性指标,16,HAV-IgA+: 是肠道黏膜分泌的局部抗体 由粪便中检测出阳性反应 见于甲肝早期和急性期 是甲肝早期诊断的指标之一,17,HAV-IgG+: 出现晚, 感染后3-12个月达高峰 终身存在(低滴度) 提示既往曾感染过甲肝,现已痊愈 已获得一定的免疫力 为甲肝卵细胞学调查的指标,18,HBV: 三大抗原抗体系统 HBsAg: HBV病毒的外壳蛋白,正常- 抗-HBs: 保护性抗体,具中和作用, - HBeAg: HBV核心颗粒中的蛋白, - 抗-HBe: 非保护性抗体, - HBcAg: HBV的核心蛋白, - 抗-HBc: 非保护性抗体, -,19,临床意义HBsAg+: 急,慢性乙肝, HBV携带者 抗-HBs+: 曾患乙肝, 接种乙肝疫苗者HBeAg+: 病毒复制, 肝炎活动期, 传染性强抗-HBe+:病毒复制减少,传染性弱HBcAg+:病毒复制活跃,传染性强, 预后差抗-HBc+ IgG+: 表示即往感染(低效价) IgM+: 近期或活动性感染指标,20,HBV DNA(PCR): 正常人-HBV-DNA 阳性: HBV病毒血症HBV病毒复制, 具有传染性敏感性高, 但须注意假阳性,21,HCV: HCV-RNA(RT-PCR) :HCV-RNA+: 病毒血症,病毒复制,传染性强抗HCV-IgM: -抗HCV-IgM+: 急性丙肝, 新近感染抗HCV-IgG: -抗HCV-IgG+: 已有HCV感染, 有转慢性倾向,22,四、感染免疫学检验,血清抗链球菌溶血素“O” (ASO) 增高：常见于A组溶血链球菌感染相关疾病，如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。肥达（Widal）反应 O升高，H升高：伤寒可能性大。血清冷凝集实验支原体肺炎24周滴度增高。血清幽门螺杆菌抗体慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡等的幽门螺杆菌感染,23,血清C-反应蛋白（CRP）测定概述：C-反应蛋白是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌C多糖体起反应的急性时相反应蛋白，具有激活补体，促进吞噬和免疫调理作用。参考值：8mg/L（免疫比浊法）意义：组织损伤：如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。各种细菌性感染，尤其是革兰氏阴性杆菌感染。病毒性感染升高不明显或轻度升高。风湿热活动期，可达200mg/L以上。,24,五、肿瘤标志物检验,（一）甲胎蛋白（AFP）测定血清AFP检测是诊断肝癌的重要指标。参考值： CLIA，RIA，ELASA：血清25g/L临床意义：原发性肝癌明显升高，AFP300 g/L。病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高，但常 300 g/L。生殖腺胚胎性肿瘤血清AFP升高。妊娠。,25,（二）症胚抗原（ CEA ）测定,CEA是一种广谱肿瘤标志物，特异性不高。参考值：05ng/ml 临床意义： 血清CEA升高：恶性肿瘤，特别是胃肠道恶性肿瘤、肺癌、乳腺癌等患者血清CEA含量可明显增高。 血清CEA连续随访检测：可用于恶性肿瘤手术后的疗效观察及化疗患者的疗效观察。CEA升高也见于肠梗阻、胆道梗阻、胰腺炎、肝硬化、溃疡性结肠炎、局部性肠炎和溃疡病。这些患者中25%的人血清CEA可暂时升高。,26,（三）糖蛋白/糖脂类肿瘤标志物概述：静脉血，ELISA法检测。临床意义CA15 3 乳腺癌、卵巢癌CA125 卵巢癌、宫颈癌CA19 9 胰腺癌、胆管癌,27,（三）前列腺特异蛋白（ PSA ）,PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶。血清中80的PSA以结合形式存在，称为复合前列腺特异蛋白（ CPSA ）。参考值： PSA 4ug/L CPSA 0.8ug/L 临床意义： 用于早期诊断前列腺癌。,28,（一）类风湿因子（RF）,概述：类风湿因子（RF）：靶抗原为变性IgG的Fc部分，有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五种类型。参考值：RIA、ELISA法正常人阴性临床意义：90%RA患者呈阳性，IgA-RF与骨质破坏有关，早期升高提示病情严重，预后不良。IgE-RF升高时已属病情晚期。,六、自身抗体检验,29,（二）抗核抗体（ANA）检查：概述：抗各种细胞核成分（脱氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗原-ENA和RNA等）。参考值：IFA法阴性，血清滴度1：40为阳性临床意义：见于SLE（80%100%）、MCTD（100%）、原发性胆汁性肝硬化