血浆蛋白质医学生用的生化学习资料

血浆蛋白质,南昌大学医学院 温小刚 2011.11,正常血清蛋白电泳可分为： 清蛋白（57%-68%） 1球蛋白（1.0%-5.7%） 2球蛋白（4.9%-11.2%） 球蛋白（7%-13%） 球蛋白（9.8%-18.2%）,急性时相反应（APR）,当机体因感染、自身免疫性疾病等组织损伤侵害，诱导炎症，使单核细胞和巨噬细胞等细胞释放紧急反应性细胞因子IL-1、IL-6、TNF,再经血液循环，刺激肝脏细胞产生AAT、Hp等，是血浆中浓度升高，而血浆中PA、Alb、Tf则下降，此炎症反应过称为急性时相反应，该过程中出现的蛋白质称为急性时相反应蛋白（APP）,前清蛋白（PA）,包括视黄醇结合蛋白（RBP）和甲状腺转运蛋白（TTR）由肝脏合成RBP转运视黄醇，TTR转运T4.血浆中RBP与TTR 1:1形成复合物，可避免小分子RBP从肾小球滤过，并减少RBP释放到非靶细胞中,临床意义,负性APP营养不良的指标肝功能不全的指标：PA因半衰期短而比Alb、Tf更敏感,清蛋白（Alb）,血浆中含量最多的蛋白质由肝实质细胞合成，合成速率主要由血浆胶体渗透压和蛋白质摄入量调节生理功能：1）保持血浆胶体渗透压 2）重要的营养蛋白 3）血浆中主要的载体蛋白 4）具有缓冲酸碱的能力,临床意义,清蛋白合成不足：急慢性肝病 蛋白质营养不良或吸收不良清蛋白丢失：肾病综合征等可由尿丢失 肠道炎症性疾病时，胃肠道蛋白丢失 烧伤或渗出性皮炎，从皮肤丧失蛋白清蛋白分解代谢增加：组织损伤或炎症清蛋白分布异常：门静脉高压时大量漏入腹水无清蛋白血症,1-抗胰蛋白酶 1-酸性糖蛋白1球蛋白 高密度脂蛋白 甲胎蛋白,1-抗胰蛋白酶（AAT）,属于蛋白酶抑制剂（Pi）占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右含多种遗传表型：M型 S型Z型对蛋白酶的抑制作用主要依靠M型PiMMPiMSPiMZPiSSPiSZPiZZ,临床意义,AAT缺陷与肺气肿：M型缺乏时，蛋白水解酶可作用于肺泡壁的弹性纤维而导致肺气肿。低血浆AAT可见于胎儿呼吸窘迫综合症AAT缺陷与肝病：新生儿PiZZ型与PiSZ型AAT与其胆汁淤积、肝硬化、肝细胞癌的发生有关APP与雌激素增多时血浆AAT升高,1-酸性糖蛋白（AAG）,又称类粘蛋白，含糖45%，是血清粘蛋白的主要成分由肝实质细胞合成AAG可结合利多卡因和普萘若尔等，在急性心肌梗死时，AAG升高后，使药物结合状态增加而游离状态减少，故治疗时需增加药物剂量,临床意义,作为APR的指标，在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加3-4倍，3-5d出现高峰是反映溃疡性结肠炎活动性最可靠的指标营养不良、严重肝损、肾病综合征及胃肠道疾病致蛋白严重丢失时，AAG降低糖皮质激素增加可引起AAG升高，雌激素可减少AAG合成,触珠蛋白 2球蛋白 2 -巨球蛋白 铜蓝蛋白,触珠蛋白（Hp）,又称结合珠蛋白与红细胞中释放的游离血红蛋白结合，从而防止Hb从肾丢失而为机体有效的保留铁，并能避免Hb对肾脏的损害每分子Hp可结合两分子的HbHp-Hb复合物不可逆,临床意义,溶血性疾病：主要是血管内溶血，血管外溶血时Hp水平变化不大烧伤、肾病综合征使Alb大量丢失，大分子Hp明显增加雌激素使Hp减少（急慢性肝病时，雌激素分解减少，Hp可减少）,2 -巨球蛋白（AMG）,血浆中最大的蛋白质，肝实质细胞合成蛋白酶抑制剂酶与AMG结合时，使酶不易作用于大分子底物，而底物为小分子时，可被催化水解不属于APP低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，AMG显著增高,铜蓝蛋白（Cp）,肝实质细胞合成铜的无毒性代谢库（血清95%铜存在Cp中）具有铁氧化酶作用，使Fe2+Fe3+抑制膜脂质氧化的作用主要用于Wilson病的辅助诊断指标严重肝病、肾病综合征时下降,转铁蛋白 补体C41球蛋白 补体C3 低密度脂蛋白 2球蛋白- 2微球蛋白、纤维蛋白原,转铁蛋白（Tf）,肝细胞合成能可逆地结合多价阳离子（Fe3+、Cu2+、Zn2+等），每分子Tf可结合两个Fe3+贫血的鉴别诊断：缺铁贫-Tf饱和度铁 再障-Tf/铁饱和度 营养不良、肝病时下降 属于负性APP,C-反应蛋白 IgA球蛋白 IgG IgM,C-反应蛋白（CRP）,第一个被认识的APP，首先升高的APP急性炎症病人血清中出现的可结合肺炎链球菌细胞壁C多糖的蛋白质非特异性指标，主要用于结合临床检测疾病,临床意义,筛查微生物感染评估炎症性疾病的活动度监测白血病和外科手术后并发的感染新生儿败血症和脑膜炎的监测监测肾移植后的排斥反应冠心病时，CRP升高反映了动脉硬化存在低度的炎症过称和粥样斑块的脱落,血清淀粉样蛋白A（SAA）,属于APP急慢性炎症、病毒感染、肿瘤、异体移植排斥反应、营养不良、地中海贫血，SAA升高SAA是冠脉血管病变活动性的标志物,体液总蛋白测定,依据蛋白质特有的结构和性质： 重复的肽链结构 酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收 与色素结合能力 沉淀后借浊度或光折射测定,凯氏定氮法,原理：测定样品氮含量，根据蛋白质平均含氮量16%计算优点：准确性好，精密度高，灵敏度高，参考方法，用于标准蛋白质的定值和校正缺点：操作复杂、费时，不适于体液总蛋白测定，疾病状态时，各种蛋白质含氮量差异更大，不适于临床应用,双缩脲法,原理：在碱性溶液中，蛋白质与Cu2+形成紫红色络合物该反应需三肽以上才反应优点：特异性好，准确度高，显色稳定，方法简便缺点：灵敏度不高，适宜血清总蛋白定量，不适于蛋白含量低的脑脊液、尿液,酚试剂法,原理：酪氨酸与色氨酸使磷钨酸和磷钼酸还原为钨蓝和钼蓝优点：灵敏度较高，适于测定单一蛋白质缺点：易受还原性化合物的干扰,直接紫外吸收法,原理：芳香族氨基酸含有共轭双键，在280nm处有吸收峰优点：适于较纯的酶、免疫球蛋白等蛋白测定缺点：尿素、胆红素在280nm附近有干扰，不适于血清、尿液等组成复杂的蛋白的测定,比浊法,原理：某些酸能与蛋白质结合而产生微细沉淀，而引起悬液浊度变化优点：操作简便，灵敏度高，可测定蛋白含量低的样品缺点：影响浊度大小的因素较多,染料结合法,原理：酸性条件下，蛋白质带正电荷，可与染料阴离子反应发生颜色变化。优点：简便、快速、灵敏缺点：不同蛋白质与染料结合力不同，比色杯对染料有吸附作用邻苯三酚红钼法：邻苯三酚红和钼酸络合形成红色复合物,吸收峰在467nm。该复合物在酸性条件下与蛋白质形成络合体,使吸收峰移至594nm。其颜色深浅与蛋白质含量成正比。适于蛋白低的尿液、脑脊