《氯霉素含量的测定》PPT课件.ppt

氯霉素注射液PH值和含量检测 仪器分析报告 作者 袁伟涛杨金玲朱林辉涂金玲邹瑶 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素的抗菌效果虽然很好 但它的副作用很大 1999年9月13日中华人民共和国农业部发布了 动物性食品中兽药最高残留限量 的通知 规定了氯霉素在所有食品动物的可食用组织中不得检出 2002年3月15日 被我国农业部关于发布 食品动物禁用的兽药及其化合物清单 列为禁止使用的抗生素 2002年1月 美国食品与药品管理局 FDA 公布了禁止在进口动物源性食品中使用11 氯霉素 克伦特罗 已烯雌酚 二甲硝咪唑 其他硝基咪唑类 异烟酰咪唑 呋喃唑酮 呋喃西林 磺胺类药 弗乙酰苯酮和糖肽 种药物 氯霉素列为首位 继美国之后 2002年3月中旬 日本对中国的动物源性食品批批检测11种药物残留物质 其种类和最高限量分别是 氯霉素 0 05ppm 磺胺甲基嘧 0 02ppm 磺胺二甲基嘧啶 0 01ppm 磺胺 6 甲氧嘧啶 0 03ppm 碘胺二甲氧嘧啶 0 04ppm 磺胺喹恶啉 0 05ppm 恶喹酸 喹菌酮0 05ppm 乙胺嘧啶 0 05ppm 基夫拉松 别拉松0 1ppm 尼卡巴嗪 0 02ppm 和其它抗生素 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素 氯霉素可抑制骨髓造血细胞的功能 引起宝宝红细胞 白细胞 血小板减少 贫血 另外 由于乳儿的肝 肾功能发育不完全 从乳汁中摄入的氯霉素不能很好地经肝脏代谢 肾脏排泄而导致中毒 可引起婴儿拒食 呕吐 呼吸不规则 皮肤青紫 灰婴综合征 等 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素的介绍 简介 氯霉素是1947年由委内瑞拉链霉菌Streptomycesvenezuelae培养滤液中得到 确立分子结构后次年即用化学方法合成 并应用于临床 氯霉素的介绍 氯霉素 Chloramphenicol 氯霉素的介绍 结构和化学名 D 苏式 N a 羟基甲基 b 羟基对硝基苯乙基 2 2 二氯乙酰胺 D Threo N a hydroxymethyl b hydroxy p nitrophenethyl 2 2 dichloroacetamine 氯霉素的介绍 结构特点 Chloramphenicol的化学结构中含有对硝基苯基 丙二醇及二氯乙酰氨基 后者与抗菌活性有关 氯霉素的介绍 结构特点 Chloramphenicol的化学结构中含有对硝基苯基 丙二醇及二氯乙酰氨基 后者与抗菌活性有关 氯霉素的介绍 合霉素 Syntomycin 是Chloramphenicol的外消旋体 疗效为Chloramphenicol的一半 氯霉素的介绍 性状 白色或微带黄绿色的针状 长片状结晶或结晶性粉末 味苦 其mp 149 152 本品在甲醇 乙醇 丙酮或丙二醇中易溶 水中微溶 本品在无水乙醇中呈右旋性 比旋度 18 5 21 5 在醋酸乙酯中呈左旋性 比旋度 25 5 氯霉素的介绍 稳定性 本品性质稳定 能耐热 在干燥状态下可保持抗菌活性5年以上 水溶液可冷藏几个月 煮沸5小时对抗菌活性亦无影响 在中性 弱酸性 pH4 5 7 5 较稳定 氯霉素的介绍 水解性 在强碱性 pH9以上 或强酸性 pH2以下 溶液中 都可引起水解 氯霉素的介绍 鉴别反应 酸水解后产物与过碘酸作用 氧化生成对硝基苯甲醛 再与2 4 硝基苯肼缩合 生成苯腙 氯霉素的介绍 鉴别反应 硝基经氯化钙和锌粉还原成羟胺衍生物 在醋酸钠存在下与苯甲酰氯进行苯甲酰化 再在弱酸性溶液中与高铁离子生成紫红色的络合物 氯霉素注射液PH值和含量检测 临床应用 Chloramphenicol对革兰阴性及阳性细菌都有抑制作用 但对前者的效力强于后者 用以治疗伤寒 副伤寒 斑疹伤寒等 其他如对百日咳 砂眼 细菌性痢疾及尿道感染等也有疗效 但若长期和多次应用可损害骨髓的造血功能 引起再生障碍性贫血 氯霉素注射液PH值和含量检测 临床应用 Chloramphenicol对革兰阴性及阳性细菌都有抑制作用 但对前者的效力强于后者 用以治疗伤寒 副伤寒 斑疹伤寒等 其他如对百日咳 砂眼 细菌性痢疾及尿道感染等也有疗效 但若长期和多次应用可损害骨髓的造血功能 引起再生障碍性贫血 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素注射液PH值的测定 pH值应为5 0 7 5 中国药典1985年版二部附录33页 氯霉素注射液PH值测定方案 用PH计测定PH值Ph计的原理 是将一支电极与被测物质活度有关的电极 称指示电极 和另一支电位已知且保持恒定的电极 称参比电极 插入待测溶液中组成一个化学电池 在零电流的条件下 通过测量电池电动势 进而根据能斯特求出待测液ph值 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素注射液PH值和含量检测 两点校正法 两种缓冲溶液的配制PH 5 5的HAc NaAcPH 6 8的HAc NaAcPH 7 2的HAc NaAc 氯霉素注射液PH值和含量检测 缓冲溶液配制原理对于弱酸共轭碱的PH值可由下试可知PH pKa lgc 碱 c 酸 5 5 4 75 lgc Ac c HAc c Ac c HAc 1 77827 氯霉素注射液PH值和含量检测 选用0 1mol L的乙酸和乙酸钠可由上式得出V乙酸钠 V乙酸 1 77827从而可以得出PH为5 5的标准缓冲溶液同理可得PH为6 8和7 2的缓冲溶液 氯霉素注射液PH值和含量检测 PH计的校正预热 开电源 预热30分钟 连接电极有读数开关开放的情况下调0 定位 由产品说明书知注射液的PH为5 0 7 5 将电极浸入PH为6 8的缓冲溶液中 轻轻摇匀 待读数稳定后 调定位旋扭使其读数为6 8 重复2 3次 氯霉素注射液PH值和含量检测 取少量的氯霉素注射液用PH试纸初步判断其酸碱性若为酸性则用PH5 5的缓冲溶液再进行定位 偏碱性则用PH为7 2的缓冲溶液再进行定位 氯霉素注射液PH值和含量检测 再取适量的氯霉素注射液于洁净干燥的烧杯中 氯霉素注射液PH值和含量检测 用无CO2的H2O淋洗电极 并用滤纸吸干再用待测液冲洗电极 将电极浸入氯霉素溶液中 轻轻摇匀 待读数稳定后计数 如此取氯霉素注射液的样测5组数据 取平均值 既为此氯霉素注射液的PH值 氯霉素注射液PH值和含量检测 注意事项由于试样的PH值常伴随着空气中的CO2等因素的改变而改变 所以要分析及时 快速测样 快速清洗 测样时电极不能碰到容器壁 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素含量测定原理 1 2 再用紫外分光光度法测其含量 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素标准溶液的配制准确称取氯霉素标准品0 05g 用丙二醇溶液40 溶解至100ml 配成浓度为500微克 ml的标准储备液 或找到已知氯霉素含量的氯霉素注射液作为标准液 氯霉素注射液PH值和含量检测 取氯霉标准溶液制定氯霉素溶液吸收曲线 找出氯霉素的最大吸收波长 并在此波长下测氯霉素的含量 仪器选用754型分光光度仪 氯霉素注射液PH值和含量检测 取样品 标准溶液各约50ml 加1 氯化钙溶液150ml与锌粉2 5g 置水浴上加热10分钟 倾取上清液 加苯甲酰氯约5ml 立即强力振摇1分钟 加三氯化铁试液25ml与氯仿100ml 振摇 水层显紫红色 40 乙二醇溶液50ml加如上等量的试剂显色 氯霉素注射液PH值和含量检测 氯霉素含量测定步骤找出氯霉素的最大吸收波长 取上述40 的乙二醇溶液作空白对照 上述500微克 ml的标准储备液适量于吸收池中 不断的改变光的波长 记下吸光度和波长 得出曲线图氯霉素的最大吸收波长为278nm 氯霉素注射液PH值和含量检测 记下最大波长下 标准溶液的吸光度 在278nm波长下测出注射液样品的吸光度根据朗伯 比尔定律 A KCL即可以得出氯霉素注射中氯霉素的含量 吸光度 含量 标准液吸光度已知 已知 注射液吸光度已知 配制不同含量的标准溶液求下图以减小误差 氯霉素注射液PH值和含量检测 也可直接将754紫外分光光度仪转换为含量测定模式 以标准溶液为参比溶液 可在仪器上直接读出样品中氯霉素的含量 多次测量 取平均值 氯霉素注射