肿瘤标志物的检测及应用

,肿瘤标记物的检测及应用,天津海滨人民医院 欧喜兵,2,概 述,癌症对人类健康和生命的威胁很大。它和心血管疾患一起，已成为医学上的两大难关。全世界52亿人口中，每年约有700万人新患癌症，每年约有500多万人死于癌症， 几乎每6秒钟就有一名癌症患者死亡。近年来，我国癌症的发病率呈上升趋势，恶性肿瘤居城市人口死因的首位随着医学的进步和发展，诊断方法不断进步可以使大约80-90%的癌症得到确诊，而且，13的癌症患者能在早期发现。世界卫生组织作出的最新权威性结论：癌症患者如果能早期发现，治愈率可达80。因此，早期肿瘤诊断已成为全世界医务人员长期以来极尽全力研究的热门课题,3,诊断肿瘤有二大类方法,医学影像学方法检验诊断学、核医学方法。这里讨论的肿瘤标志物的测定，就属于这一类,4,肿瘤标志物（Tumor marker,TM）,1978年Herberman在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出的肿瘤标记物（tumor marker）又称肿瘤标志物，是指特征性存在于恶性肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常而产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测,理想的TM,特异性高，对肿瘤与非肿瘤鉴别的准确性可达100%。敏感性高，能在极早期发现肿瘤，不漏诊。在体液中的浓度应与瘤体大小、临床分期密切相关，并可据此判断预后。半衰期短，可根据其水平的升降监测治疗效果及肿瘤是否复发或转移。肿瘤标记物的浓度和肿瘤转移、恶性程度相关，可通过定量或定性检测而协助肿瘤的分期和预后的判断； 存在于体液特别是血液中易于检测。,6,肿瘤标志物的用途,肿瘤的早期发现 肿瘤筛查肿瘤的诊断、鉴别诊断与分期 肿瘤疗效的检测 肿瘤复发的指标 肿瘤的预后判断,7,按肿瘤标记物本身的性质分类,胚胎抗原蛋白类标记物糖类标记物酶类标记物激素类标记物基因类标记物其他肿瘤标记物,8,常用的肿瘤标记物,9,胎儿发育早期，由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，电泳时位于白蛋白和1球蛋白之间，胎儿出生后不久即逐渐消失。成人血清中含量甚微。,10,AFP异质体,LCA结合型AFP 25，原发性肝癌 500g/L持续1个月或AFP200g/L持续 2个月，应高度怀疑肝癌，同时应有医学影像学好的证据参与诊断低浓度（50200g/L）持续时间超过2个月的好患者，应视为肝癌的高危人群当谷丙转氨酶（ALT）正常，用AFP来诊断肝 h1癌，可取性可达100,12,在进行肝癌诊断时，应排除由妊娠、活动性肝炎、生殖腺胚胎癌、继发性肝癌和少数消化道肿瘤等引起的AFP升高，通常由非原发性肝癌引起的AFP升高，一般都不会高于400g/L3.65.2的胆管上皮癌、84以上的肝母细胞癌和70左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现AFP低浓度的异常升高,13,良性病变中的AFP升高升高一般是散在的和暂时的肝炎病人，10升高 水平50g/L肝硬化病人，30升高 水平100 kU/L 时，肯定有转移，敏感性高于CEA、TPA胰腺癌、肺癌、卵巢癌、直肠癌、肝癌中也可见到CA15-3的升高5.5的正常人、一些良性肝病和良性乳腺病也可见有 CA15-3的升高,33,是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶，主要存在于精液中，正常人血清内含量极微。分为少量的游离型PSA（f-PSA），大量的复合型PSA（c-PSA）。,34,临 床 意 义,PSA对前列腺癌具有高度的特异性，PSA测定对包膜内癌的敏感性为70、转移癌为100前列腺肥大、前列腺息肉、前列腺炎时PSA也可轻度升高f-PSA和t-PSA的比例具有重要的诊断价值。血清中f-PSA/t-PSA比值为0.15可作为前列腺肥大和前列腺癌的鉴别临界点，比值0.15时前列腺癌的可能性较大。临床上常用血清中f-PSA/t-PSA的比值来鉴别良、恶性前列腺肿瘤临床分期和预后的判断监测前列腺癌的复发,35,是烯醇化酶的一种同工酶，目前认为它是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。,36,临 床 意 义,用于小细胞肺癌患者的疗效观察、复发预测和预后评估用于神经母细胞瘤的诊断、鉴别诊断、疗效观察、复发预测和预后评估作为精原细胞瘤的肿瘤标记，68.7%的转移性精原细胞瘤患者在行睾丸切除术前血清NSE水平可见升高,2微球蛋白（2-microglobulin, 2M）,从肾病患者尿中分离出的一种蛋白质分子量仅为1.2kD，电泳时显于2M区带，故被命名为2微球蛋白2M是人类白细胞抗原（HLA）的轻链部分，链内含有一对二硫键，2M可与HLA 类分子的重链非共价的结合，而存在于细胞膜上。,8,来源,2M是人体有核细胞，主要是浆细胞，产生的一种由100个氨基酸组成的单链多肽低分子蛋白。体内来源于人体间质上皮和造血系统的正常细胞及恶性细胞均能合成2M。,在相关肿瘤中的应用,淋巴系统肿瘤如慢性淋巴细胞白血病、淋巴细胞肉瘤、何杰金病、非何杰金淋巴瘤、多发性骨髓瘤等中升高尤为明显检测脑脊液中的2M的水平有助于对脑膜白血病的诊断在78的胆管癌、53的原发性肝癌、48的胃癌、45的大肠癌、35的肺癌、33的食管癌和33的膀胱癌中也可见有升高在一些非肿瘤性疾患如肾脏疾病、肝炎、肝硬化、风湿性关节炎以及一些传染病中也可见有2M的升高。,血清铁蛋白（SF）,分子量为43-45万的大分子蛋白，作为储存铁，存在于肝、脾和骨髓中。临床为诊断隐性贫血较灵敏的指标。癌细胞具有较强合成SF的能力，可协助对肿瘤的诊断和预后估计。,9,41,是由在妊娠期有胎盘滋养细胞分泌的糖蛋白。含145个氨基酸，分子量45kD，半衰期1220小时。HCG由和两个亚基组成，亚基也是其它激素如卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和促甲状腺素（TSH）的组成部分，亚基仅存在于HCG中。,42,临 床 意 义,早孕诊断可以作为睾丸肿瘤和胎盘肿瘤即绒毛膜上皮癌或葡萄胎的标记物100滋养体瘤和绒毛膜上皮细胞癌-HCG异常升高，可达100万IU/L 非精原细胞性睾丸癌和精原细胞瘤-HCG也有升高乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肝癌、肺癌、白血病和淋巴瘤患者肝硬化、十二指肠溃疡和一些炎症中也可见有HCG升高此外，由于-HCG无法穿过血脑屏障，所以一旦脑脊液中出现-HCG，并且和血清中-HCG的比例超过1：60，常预示着出现脑转移,多种肿瘤标记物联合应用,肿瘤标记物的现实：1.肿瘤标记物非常之多 2.单个标记物的敏感性或特异性偏低，不能满足临床要求。3.理论上和实践上都提倡一次同时测定多种标记物，以提高敏感性和特异性。,主要肿瘤的常用多标记组合,肝癌首选AFP、CEA和CA19-9，AFP是原发性肝癌诊断、鉴别诊断、疗效及预后评估的必测指标。CEA对于继发性肝癌具有良好的诊断率。其他如-谷氨酸转肽酶(-GT)、CD24。近年来开展了应用RT-PCR技术扩增AFP基因转录RNA来进行诊断原发性肝癌，其阳性率为36%。,肺癌小细胞肺癌(SCLC)一般首选CEA和SccAg；非小细胞性肺癌 (NSCLC)一般首选NSE、CEA和降钙素(CT)。 乳腺癌首选CA15-3和CEA，其他的TM对乳腺癌的早期诊断阳性率较低。,前列腺癌首选PAP、PSA和F-PSA。近年来又提出PSA密度、 PSA升高的速率、以年龄调整参考值范围的上限和f-PSA和t-PSA的比例等指标，以提高诊断前列腺癌的阳性率此外开展了PCR检测PSA RNA和RT-PCR检测前列腺特异性膜抗原(PSM)等的研究工作。,胰腺癌首选CA19-9和CEA等。在胰腺癌病人中CA19-9、CA242和CA50的阳性率