化学药品检验的规范要求和注意点

1,化学药品检验的规范要求和注意点 浙江省食品药品检验研究院 金瓯,2,药品质量标准,国务院药品管理部门颁布的中国药典和药品标准同属国家药品标准，是国家为保证药品质量所制订的具有约束力的技术法规，属于强制性标准。国家药品标准是药品监督管理的技术依据，指导药品科研与生产、控制药品质量、保证用药安全有效，并作为促进对外贸易的重要手段。 国家药品标准的制订与修订原则如下:,3,a.坚持保障药品质量、维护人民健康的原则。b.坚持继承、发展、创新的原则。 c.坚持科学、实用、规范的原则。 d.坚持质量可控性原则。标准的建立，应根据“专属、准确、灵敏”的原则 。,4,中国药典国家药品监督管理局地标升国标标准国家药品监督管理局新药转正标准国家药品监督管理局新药试行标准国家药品监督管理局药品注册标准国家药品监督管理局进口药品注册标准国内上市的药品的质量必须符合上述标准之一，企业的产品应制定该产品的企业标准。,应在关键项目、易降解的项目的指标上与国家标准拉开适当的差距（熔点、水分、溶出度、有关物质、含量）国家标准是最低标准，是药品在整个有效期内所必须符合的标准。而内控质量标准是针对近期刚生产的产品的，所以为了确保产品在整个有效期内符合国家标准，内控质量标准必须高于国家标准。,国家标准欠完善，缺少应进行控制的项目（如在生产工艺中所用的一、二类有机溶剂），在内控标准中应给予增定。原因：已颁布的国家标准往往是在数家上报的各自的试行标准的基础上综合制定的标准，由于不同的厂家的产品工艺不同，各自使用的有机溶剂不同，故在国家标准中往往无法统一残留有机溶剂的测定种类，而暂不定入。但若在工艺使用到一、二类有机溶剂，则必须在内控标准中给予控制。,7,国外药典,美国药典（USP36）英国药典（BP2013）欧洲药典（EP8.0）日本药局方（JP16）,8,药品标准正文各论构成与编排顺序,1、药品名称（中文名、汉语拼音、英文名）2、有机药物的结构式 3、分子式和分子量4、来源或有机药物的化学名称，以及含量或效价的限度规定 5、 处方 6、 制法7、 性状8、鉴别9、检查10、含量或效价测定11、类别12、规格13、贮藏14、制剂,9,药品名称（中文名、汉语拼音、英文名）有机药物的结构式、分子式和分子量,包括中文名、汉语拼音和英文名。中、英文名称参见国家药典委员会编纂的中国药品通用名称。有机药物的结构式按照世界卫生组织（WHO）拟订的“药品化学结构式书写指南”绘制。,10,分子式和分子量,有机化合物分子式中的元素符号按国际上的惯例 排列，除C排在首位，H排在第二位外，其他元素（包括金属元素）均应按元素符号的英文字母顺序Br、Ca、Co、F、I、K、N、Na、O、P、S、Si、Zn依次排在其后，原子数写在该元素符号的右下侧；有结晶水的，将结晶水写在后面，并用逗号隔开。无机化合物的分子式按习惯写法。 分子量按最新国际原子量表计算，最终数值书写至小数点后第二位；前加空格使与分子式隔开。,11,含量或效价的限度,含量（或效价）限度，是指按规定的测定方法测得本品应含“有效物质”的限度。为了能正确反映药品的含量，一般应换算成干品的含量，并按检查项下所规定的“干燥失重”或“水分”，分别写成“按干燥品计算”或“按无水物计算”；如含挥发性有机溶剂，也应写明扣除，但所含挥发性有机溶剂如已包括在干燥失重之内，则仅需写明“按干燥品计算”而不再扣除溶剂；在检查项下规定有“炽灼失重”的无机药品，应写成“按炽灼至恒重后计算”。但检查项如没有上述“干燥失重”等规定时，则直接写含量限度。,12,含量（或效价）限度，除用“效价测定”的抗生素或生化药品采用效价单位表示外，其他用“含量测定”的药品均以含有效物质（以分子式表示）的百分数表示；所含有效物质非单一成分，而其测定方法又不专属时，可写成“含以计算”。含量限度一般应规定有上、下限，其数值一般应准确至0.1；当含量的高限规定不得超过101.0时，可不写出上限。含量限度的百分数均系指重量百分数，不必再写上“（gg）”，但对液体或气体药品，其含量百分数之后宜加注“（gg）”或“（mlml）”，使之更为明确。,13,性状：外观,外观：主要描述药品的颜色与外形，遇光、空气变质等情况描述；一些固体制剂也对内容物进行描述如除去包衣后片芯的颜色，胶囊内容物的性状；溶液剂也要对其颜色、澄清、澄明、混悬和粘稠等情况进行描述。两个色阶相邻用“或”，色阶之间相隔两个或以上，应采用“至”,14,外观,除了正文中对外观的描述药典附录相应制剂项下的外观的描述也是判断的依据如：片剂: 应完整光洁，色泽均匀；胶囊剂：应整洁、不得有黏结、变形、渗漏或囊壳破裂，无异臭；软膏：应无酸败、异臭、变色、变硬、乳膏剂无油水分离及胀气；颗粒剂：应干燥、颗粒均匀，色泽一致、无吸潮、结块、潮解；口服溶液剂：不得有发霉、酸败、变色、异物、产气或其他变质,15,检验者要靠自己的眼睛正确掌握对外观的判断如：注射液的颜色的确定：一般以黄色或黄绿色各号标准比色液为基准：浅于1号稀释一倍的为“无色”，介于2号以下为“几乎无色”，介于4号以下的为“微黄色”，介于6号以下的为“淡黄色”，介于8号以下的为“黄色”。,药典附录“溶液的颜色”：品种项下规定的“无色或几乎无色”，其“无色”系指供试品溶液的颜色与所用溶剂相同，“几乎无色”系指浅于用水稀释 1倍后的相应色调1号标准比色液。国药典化发2012444号，当性状与检查不一致时，以检查为准。,17,臭：是指药品本身固有的或应有的臭味；不包括因混有不应有的残留有机溶剂而带入的异臭。味：具有特有味觉的药品，应加以记述，但毒、剧、麻药和外用药不作“味”的记述。 化学药品不主张检验者用嘴去尝试。,18,溶解度,在溶剂品种的选择上，应尽量采用与该药品溶解特性密切相关，配制制剂、制备溶液或精制等所需用的常用溶剂，应列出在水中溶解度；品种应简化，不要罗列过多，并应尽量避免使用昂贵或毒性较大的溶剂。溶剂的体积与样品量应与溶解度的要求相匹配。,19,由于溶解度在一定程度上可反映药品的纯杂程度，因此对溶解度的描述一定要核实，切不可照抄一般参考资料。 文字叙述的顺序，按溶解度大小依次排列，即：“极易溶解”、“易溶”、“溶解”、“略溶”、“微溶”、“极微溶解”和“几乎不溶或不溶”,20,其中溶解度相似的溶剂，则按其极性大小依次排列：（水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、乙醚或环已烷等）；热水或热乙醇（不用其他的热溶剂）放在同一溶解度的各溶剂之前；在酸或碱性溶液中的溶解度放在最后，并在其前用分号“；”使与前述溶剂中的溶解度相隔开，要注明所用酸或碱性溶液的名称（不要用“矿酸”或“氢氧化碱”等名词）和浓度 。,21,物理常数：相对密度,相对密度一般用于液体原料药，其数值范围应书写至小数点后第3位；需明确指定附录中所载方法之一时，或测定温度不同于附录所规定的20时，应加注明。对某些没有含量测定，而以相对密度控制其含量的药物，其数值可根据需要书写至小数点后第4位。,22,比重瓶法,操作：比重瓶重量的称定-供试品重量的测定-水重量的测定洗净并干燥，操作顺序为先称量空比重瓶重，再装供试品称重，最后装水称重避免产生气泡比重瓶从水浴中取出时，应用手指拿住瓶颈，而不能拿瓶肚，以免液体因手温影响体积膨胀外溢室温高于20或各品种项下规定的温度时，必须设法调节环境温度至略低于规定的温度,23,韦氏比重秤,操作：仪器的调整-用水校准-供试品的测定韦氏比重秤应安装在固定平放的操作台上，避免受热、冷、气流及震动的影响玻璃圆筒应洁净，在装水及供试液时的高度应一致，使玻璃锤沉入液面的深度前后一致玻璃锤应全部浸入液体内,24,熔点,附录中收载有三种测定方法，其中最常用的为测定易粉碎固体药品的“第一法”，因此除必须采用“第二法”或“第三法”的个别品种、并在标准中注明者外，均系指用“第一法”。由于方法中采用传温液，因而收载的熔点宜在200以下。熔点在200以上的，可视需要而订。熔点数值的精度一般为1，也可书写至0.5；限度范围要包括该品种的初熔温度和全熔温度，一般为24。,25,熔点,熔点测定仪：升温、搅拌、预设温度、鸣示温度计: 校正值温度范围最小刻度传温液：水硅油液状石蜡毛细管：内径.壁厚. .长度分割后c以上 洁净干燥熔点标准品温度范围研细干燥 五氧化二磷干燥器中避光保存,26,实验操作,样品的处理:研细-干燥-填装-放置传温液升温速度的调节升温速度一般.每分钟；注明有“熔融时同时分解”的样品.每分钟，温度升至规定的熔点低限尚低时装有供试品的毛细管浸入传温液使贴附（或用毛细管夹或橡皮圈固定）在温度计上，要求毛细管的内容物部分适在汞球的中部,27,控制结果的判断,1 初熔和终熔的判断 以供试品开始局部液化出现明显液滴或开始产生气泡时的温度作为初熔温度，以供试品的固相消失、全部液化时的温度作为全熔温度（全熔时毛细管内的液体应完全澄清）；无法分辨的记录一个产生突变的温度数据。2 都要估读到0.1，至少重复测定3次3 读数的校正与修约 测定结果的数据按修约间隔为0.5进行修约，即0.10.2舍去，0.30.7修约为0.5，0.80.9进为1,28,比旋度,凡具有光学异构体的药品，在其性状项下的物理常数中，应 尽可能对其比旋度作出明确规定。由于在附录“旋光度测定法”的计算公式下已说明“按干燥品或无水物计算”，因此正文中一般可不再写“按干燥品计算”，但必须写明供试品溶液的浓度及其所用的溶剂。,29,操作,1 供试品溶液的配置：精密称量 定量稀释 在规定的温度放置平衡2 在标准规定的波长和光源处测定供试品溶液旋光度（环境温度尽量控制在测定温度附近，供试品溶液必须控制规定温度的0.5以内），注意空白管的同法测定。含量测定2份平行读数差值在0.02以内。3 测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，应滤清后再用。,30,测定管不可置干燥箱中加热干燥，因为玻璃管与两端的金属螺帽的线膨胀系数不同，加热易造成损坏，用后可晾干或用乙醇等有机溶剂处理后晾干。按规定或根据读数精度配制浓度适当的供试品溶液，通常是读数误差小于1%。如供试品溶解度小，应尽量使用2dm 的长测定管，以提高旋光度，减小测定误差。供试液配制后应及时测定。,31,折光率,1 用标准折光率玻璃或水校正仪器2 大多数供试品的折光率受温度影响较大，一般是温度升高折光率降低，但不同物质升高或降低的值不同，因此在测定时温度恒定至少半小时后进行测定，注意：气泡不能进入样品。3，上下棱镜必须清洁，滴加供试品时注意棒或滴管尖不要触及棱镜，防止棱镜造成划痕。测定完后及时清洁镜面测定结束时，必须用能溶解供试品的溶剂如水、乙醇或乙醚将上下棱镜擦拭干净,黏度,附录“黏度测定法”中并列有三种方法，其中第一法用于测定牛顿流体（包括纯液体、低分子物质溶液、高聚物的稀薄溶液、低黏度液体等）的运动黏度，第二法用于测定非牛顿流体（包括混悬液、高聚物溶液、乳剂和表面活性剂的溶液等）的动力黏度，第三法用于测定特性黏数，以间接控制分子量。,引用第一法时，还应注明毛细管的内径（请注意要与其限度范围相适应，一般控制流出时间约为100秒）；引用第二法时，还应注明仪器型号、转动角速度、轴速度、转子号数、转速以及除附录规定外的测定温度,34,吸收系数,供试品溶液的配置：精密称量 定量稀释 正确配置空白溶液（背景）取供试品溶液在适当的波长内以空白溶液为背景进行扫描以进一步确定最大吸收波长在确定的最大吸收波长处测定供试品溶液吸光度。,35,结果计算与判断：1 正确理解吸收系数E1cm 1%的意义 E=A/CL L 为1cm的光路长度 C 为1%的供试品溶液浓度 A 为供试品溶液吸光值 2 计算浓度时样品的称样量应按干燥品或无水物折算,36,鉴别,指用理化或生物学方法来证明已知药品的真实性进行的定性分析主要的定性分析方法化学分析 仪器分析应用于药品的定性鉴别的化学分析方法主要有：呈色（显色或显荧光）、沉淀、火焰法、溶液或固体加热产气和测衍生物熔点等化学鉴别法。主要针对药品的母核基团、及一些特性基团（氟、氯、溴、碘、硫或一些金属元素和具有氧化还原性的基团）标准各论中鉴别项下有的操作步骤详细给出，有的注明采用附录中一般鉴别项下的方法。,37,操作,1 采用合适的用具并在合适的背景下进行2 按药典附录或相应的药品标准正确配置试药试液3 按标准或药典附录中一般鉴别项下的规定量和规定顺序取样、溶样和加试药试液结果：仔细观察 正确合理的判断,38,光谱法,红外分光光度法（IR） 校正用聚苯乙烯膜 压片模具和吸收池 玛瑙研钵 红外灯样品处理干燥箱 在中红外区（药物分析常用区4000-400cm1）几乎无吸收的溴化钾或氯化钾（研细，过200目筛，120干燥4小时）,操作,1 检查灯源能量，扫描起始点透过率应在75%以上。2 选溴化钾或氯化钾与样品的合适比例（一般200：1）。使制成的图谱的最强吸收峰透过率在10%以下。3 制备空白片和样品片及对照品片，均应透明无明显颗粒状4 对空白片和样品片和对照品片分别以相同的速度在4000-400cm1波长段进行扫描，注意必须进行对空白片的背景补偿或空白校正,结果分析：若与对照品图谱或对照图谱不一致时，应排除外界干扰1 大气的吸收 2 二氧化碳 2350 cm1 1 667 cm1 3 水气 3900-3300cm 1 1800-1500cm 1 4 其他有机溶剂5 样品与对照图谱使用的仪器分辨率不同 6 晶型不同,41,紫外-可见光分光光度法（UV）,操作：1 正确配置供试品溶液和空白溶液（不得有浊度和荧光）2 合理选择扫描范围、速度、狭缝和阈值3 图谱分析：最大吸收波长（既吸收峰处的波长） 最小吸收波长（既吸收谷处的波长） 除标准另有规定外一般允许与标准规定波长相差2nm,42,色谱法：薄层色谱法（TLC）,1 标准中指定的薄层板 硅胶G 硅胶H 硅胶GF254 硅胶GF360 硅胶HF254 硅胶HF360 硅胶GF2543602 微量注射器3 显色装置（显色剂喷雾装置、密闭的碘蒸汽缸 紫外灯254、360nm）,43,操作,1 活化薄层板2 正确配置展开液3 正确配置供试品溶液和对照品溶液4 点样 展开5 取出 晾干6 显色 比较,注意,1 注意展开液配置的方法，展开液不得分层2 点样处不得浸入到展开液3 应展开到合理的高度4 供试品溶液和对照品溶液必须在同一板上点样，且浓度和点样体积相近5 点样点应以冷风吹干,45,图谱分析：比较供试品溶液和对照品溶液的斑点的颜色和位置当位置不一致时应考虑：1展开过程中薄层板是否放置不平 2边缘效应造成展开前沿呈弧度通过采用交叉点样、换位点样或增加一个供试品和对照品混合溶液的点样点可排除假阴性现象,46,高效液相色谱法（HPLC）,1 正确配置流动相（注意水相盐的浓度，特别在使用两元泵要注意两项混合后是否有盐析出从而堵塞柱子；有pH值要求的，用pH酸度计测定流动相的pH值 ；注意调节pH的顺序；过滤时正确选择过滤膜的类型和型号）,47,2 应在仪器的系统适应性实验通过后方可进样 3 供试品溶液和对照品溶液应在完全相同的色谱条件下测定（ 仪器 流动相 柱子 流速 柱温 波长）,结果分析,出现供试品溶液和对照品溶液保留时间不一致时应考虑：1 两者在进样时色谱条件是否完全相同的，2 流动相是否含有一些特殊成分使得样品或对照品的保留时间不断的漂移 3 若使用双泵进行流动相混合 ，是否有泄露，或有堵塞现象使得两相的比例失调。,解决方法：1 供试品溶液和对照品溶液交替反复进样 2 供试品溶液和对照品溶液混合后进样 以此排除假阴性,50,氟检查,1 充氧量充沛，燃烧完全 （应无灰色、黑色颗粒）2 在燃烧和吸收液进行振摇吸收时决不能漏气3 应正确配置对照品溶液和供试品溶液，本法反应灵敏度高，要严格按标准规定量和顺序加入各个试剂 ，空白试液要正确配置4 对照品溶液和供试品溶液显色和暗处放置时间要尽量一致,51,溶液的澄清度与颜色,1 标准管与样品管用的比色管管壁薄厚、管径、色泽、刻度标线基本一致 2 注意观察的角度与方向，应以合适的背景进行比对 3 检查时光线要明亮，澄清度检查时最好在伞棚灯下，光强度为1000lx,52,4 配置各类标准储备液和标准液时要准确量取各类试剂，按规定制备5 检查颜色时标准管与供试品管的颜色非常接近或色调不一致时应改用色差计法。,酸碱度 pH,根据测定方法和pH值的规定范围分为酸度、碱度和酸碱度。滴定法若采用碱性滴定液滴定的、pH值法中pH值规定范围低于7.0、采用的指示液法的指示液的变色范围在pH7.0以下的，其检查项的小标题应称为酸度。滴定法若采用酸性滴定液滴定的、 pH值法中pH值规定范围高于7.0、采用的指示液法的指示液的变色范围在pH7.0以上的其检查项的小标题应称为碱度。,54,滴定法若先后用酸性滴定液和碱性滴定液滴定的、pH值法中pH值规定范围包括7.0上下两侧的、指示液法采用两种指示液，一种变色范围pH7.0以下，一种变色范围pH7.0以上的，其检查项的小标题称为酸碱度。当样品是液体，并不加任何试剂或水进行稀释，而是直接测定pH值的，其检查项的小标题称为pH值。,注意,酸碱滴定法：以消耗酸碱滴定液的体积作为限度指标。注意点：所用的水应是煮沸冷却的；所用的有机溶剂应是中性的。消耗的酸碱滴定液的体积应按F值进行校正折算。pH值法 ：取样品或取在规定的制备方法中制得规定浓度的供试品溶液，按药典附录测定pH值。注意应在每次使用前以两种pH值的标准缓冲液及时校正pH酸,度计，且样品的pH值应于这两种pH值的标准缓冲液之间。校正pH酸度计时注意斜率的调节是否超出规定范围指示液法 滴入一定量的指示液后即显规定的颜色；注意点：按标准规定量加入指示液的量。注意指示液的有效性。,注意,斜率的测量值在90-105%范围内，则可接受。样品测定两次。使用完毕后，将电极用去离子水冲洗干净，滤纸吸干电极上的水份。浸于3M KCl溶液中保存。,58,干燥失重,1 空扁形称量瓶的干燥称重至恒重。除另有规定外，样品和空称量瓶一般第一次干燥2小时左右，第二次、第三次均干燥1小时左右，直到前后两次称量差异小于0.3mg（恒重）2 精密称取样品适量（取样量一般1g左右，或在扁形称量瓶底部成约不超过5mm厚的样品量）于已干燥称重至恒重的空扁形称量瓶内 3 样品干燥称重至恒重,注意,1 若是恒温真空减压干燥法或真空减压干燥法，不宜使用带空心盖的扁形称量瓶。2 干燥失重量在1%以下的应取双份样品进行测定。3 当样品和空称量瓶从烘箱或恒温真空干燥箱取出后应立即移入干燥器中，冷却后（30-60分钟）称重，放置于干燥器内冷却的时间前后要尽量一致。,60,水分,1 费休氏试液的标定 F（每1ml费休氏试液相当于水的重量（mg）=称取水的重量（mg）（滴定所耗费休氏试液容积（ml）-空白所耗费休氏试液容积（ml），取三分进行标定，3次标定的差值应在1%以内。注意微量水的称量方法。2 空白液的测定3 准确称取样品，加入标准规定的溶剂，震摇使样品溶解后，用费休氏试液滴定。,61,注意,1 微量水的称量方法2 样品的称样量要合适，使得约消耗费休氏试液1-5ml3 所有的容器与管路要保持干燥和无水4 样品应完全溶解,注射用无菌粉末或冻干品的干燥失重或水分可参考其原料药的要求和对稳定性的影响，加以制订 。冻干制剂一般都非常容易吸湿，如碰到不合格情况，建议（1）控制环境湿度到40%以下（库伦法的湿度要求）；（2）进行TGA测定，排除是否是方法的不科学造成的误差，如经常碰到含羟基多的物质（一些紫杉醇类的抗肿瘤药），易导致测定结果偏高。,63,炽灼残渣,1 样品的炭化和灰化均应在通风柜进行，炭化和灰化中样品切不得益出坩埚外2 干燥器内不宜放置过多的坩埚冷却3 分子式中含氟或含钠的样品应使用铂金坩埚，坩埚钳头上用锡纸包裹4 若高温炉内易脱落灰尘，坩埚在炉内需盖上坩埚盖,5 炽灼残渣一般限度为0.1-0.2%，取样1g；若限度较高的，可调节取样量，使残渣的量为1-2mg，但若残渣要继续进行重金属的应取样1g以上。,65,氯化物,1 正确配置标准管与供试品管，标准管与供试品管使用的比色管的管壁薄厚、管径、色泽、刻度标线基本一致 2 观察比较标准管与供试品管的角度与方向一致，应在黑色的背景下进行比对，检查时光线要明亮，3 当供试品液有色泽和在未加入沉淀剂时就有浑浊时应按药典附录所指明的方法进行排除干扰,66,1 要严格按标准（药典附录）顺序加入各类试液，特别是沉淀剂硝酸银溶液必须在供试品液稀释成40ml后才能加入并且摇匀，否则易造成局部过浓而产生块状沉淀，使得产生的浑浊不均匀，影响判断。2 需滤过取滤液检查氯化物时，使用的滤纸中可能含有氯离子，必须用稀硝酸冲洗净滤纸中的氯离子。3 由于肉眼观察灵敏度的限制，以5.0-8.0ml标准氯化钠溶液制备的标准管最为合适。,67,硫酸盐,1 要严格按标准（药典附录）顺序加入各类试液，特别是沉淀剂25%氯化钡溶液必须在供试品液稀释成40ml加2ml稀盐酸后才能加入，加水至50ml并且摇匀，否则易造成局部过浓而产生块状沉淀，使得产生的浑浊不均匀，影响判断。,2 当供试溶液需滤过取滤液检查硫酸盐时，使用的滤纸中含有硫酸根离子，必须用稀盐酸冲洗净滤纸中的硫酸根离子后方可使用3 由于肉眼观察灵敏度的限制，以2.0-8.0ml标准硫酸钾液制备的标准管最为合适,69,重金属,第一种方法适用于在水或乙醇中溶解且溶液无色的样品；（甲、乙、控制管）第二种方法适用于不溶于水和乙醇的，或因自身的颜色或因其能与重金属结合的样品；（甲、乙管）第三种主要是用于能溶解于碱而不溶于酸的样品；,70,注意,1 正确配置标准管与供试品管，标准管与供试品管使用的比色管的管壁薄厚、管径、色泽、刻度标线基本一致。 2 观察比较标准管与供试品管的角度与方向一致，应在白色的背景下进行比对，检查时光线要明亮。 3 当供试品液自身有微量色泽时可在加入显色剂前用稀焦糖溶液调至标准管与供试品管的颜色一致，再加入显色剂。 4 当供试品液自身有色泽而稀焦糖溶液无法调节排除干扰时排除干扰时应按药典附录所指明的方法进行排除干扰。,71,注意,1 由于肉眼观察灵敏度的限制，一、二法的标准铅液的取样量应1-2ml， 2 进行第二法， 若取炽灼残渣项下的残渣进行，则必须取在500-600的灼残渣，炽灼残渣经硝酸处理时必须蒸干 3 样品中含有高铁盐时会严重影响检查，要加入抗坏血酸将高铁还原为亚铁离子排除干扰,4 当检验结果超标时应考虑，制备供试品溶液时使用的试剂（盐酸、硝酸、硫酸、氨试液等）可能夹杂重金属，在制备对照品溶液时，应取同样量试剂蒸干后，同法操作，以排除可能存在的干扰。,73,砷盐,1 定砷仪（1 定砷瓶 2 定砷管） 2 无砷锌粒（能通过1号筛的为宜） 3 按药典附录正确配置和制备的醋酸铅棉花、溴化汞试纸（应以定量滤纸制得）、酸性氯化亚锡（3个月效期）、碘化钾试液（临用新配）、标准砷储备溶液（效期不得过一年）、标准砷溶液（临用新配）,74,1 醋酸铅棉花塞得不宜过松或过紧，药典附录所规定的量只能参考要根据实验情况进行调节 2 定砷瓶与定砷管连接处切不得漏气 3 溴化汞试纸必须完全覆盖定砷管顶部的孔并必须旋紧盖子 4 标准管与样品管要同步进行（同一个水裕锅、同一时间、同一试剂,75,1 标准砷斑与样品制得的砷斑的比较要在实验结束后尽快进行 2 标准砷斑的制备必须以2ml的标准砷溶液制得3 标准砷斑应该呈均匀的姜黄色，若呈显褐色和黑色的斑斑点点或黄色和淡黄色不均匀的斑点说明醋酸铅棉花塞得过松或过紧，实验失败，重做。 4 对所使用的仪器试液、试纸和醋酸铅棉花进行空白实验均不得生成砷斑。,76,有关物质,合成工艺中的中间体、副产物、残留的有机溶剂、储存过程中的降解产物检查对象明确为某一物质时，应以该杂质名称为标题。如吗啡、水杨酸等检查对象不能明确为莫一物质，而仅知为莫一类物质时，则标题可采用其他甾体、其他生物碱、其他氨基酸、还原糖、脂肪酸、残留溶剂量或有关物质等。未知杂质，仅根据检测方法而选用标题，如杂质吸收度、易氧化物、易炭化物、不挥发物或挥发性杂质等。,77,薄层色谱法（TLC）,1 原点处若有斑点显示，当排除辅料、溶剂可能产生的斑点外应归属于杂质斑点（既Rf=0的杂质）2 若对照斑点未显色，无法见到对照斑点，不管样品杂质斑点是否显色，均属实验失败，要查找原因（层析板是否选择的正确、显色方法是否选择的正确、浓度和点样体积是否选择的正确、展开前对照点是否经历强光和高温致使底浓度的对照分解等可能），重新检验。,高效液相色谱法（HPLC）,系统适应性实验包括：重现性 分离度 灵敏度 理论塔板数配置流动相的和供试品溶液和对照品溶液的试剂应使用色谱级或光谱级的试剂，如果目前尚无次级别的，应使用其他的最高级别的试剂，必要时照紫外-可见 分光光度法，在液相测定波长处应无吸收,79,1 正确判断辅料峰和溶剂峰（应附图谱） 2 图谱的测定时间要适当长于标准规定的保留时间，以避免应各个方面的耐用性（柱子长度与型号、流速的差异、温度的差异、流动项比例和pH的差异、样品溶剂的差异）问题可能带来的杂质峰和主峰保留时间的变化，而可能使得杂质漏检3 对于出现在规定保留时间以外的杂质峰，决不能因其不在标准规定范围内而不计，应严格查找原因，弄清来源，力争排除，或及时上报申请修订标准,80,4 同样对于出现在标准规定波长以外的含量较大的杂质应同上述情况一样处理图谱分析与结果判断：5 当样品和对照品（含生物碱或有机碱的盐）都有两个主峰时，对照品的主峰面积应以活性成分峰计，因为大部分的杂质来源于活性成分的降解。,含量测定 容量法,1 精密称定两份或两份以上的样品（重量低于50mg以下的应使用十万分之一的电子分析天平），严格按标准进行前处理（定量溶解、定量稀释、定量量取或定量提取、回馏、水解等），得供试品溶液 2 选择合适体积的洁净而干燥的滴定管（一般10ml的滴定管消耗体积5-8ml为宜； 25ml的滴定管消耗体积10-20ml为宜；50ml的滴定管消耗体积20-40ml为宜；滴定液若是硝酸银、碘、硫代硫酸钠等，应使用棕色玻璃滴定管），用滴定液反复冲洗三次后，加入滴定液至刻度以上，准确调至0刻度线（注意滴头活塞上下不得有气泡）,82,3 将供试品溶液（除了电位滴定法外，均应按标准规定及时加入指示剂）用标准规定的滴定掖以正确的滴定速度进行滴定，准确读取所消耗的体积（注意观察刻度线的角度、位置应与0刻度线读取时保持一致。） 4 正确配置和量取空白溶液（若是采用回滴定法必须精密量取两分或两分以上空白溶液进行滴定，同上准确读取空白溶液所消耗的体积 ）,83,注意,1 各个实验环节都要注意定量操作，如滤过时，当溶剂为易挥发物时，应及时将滤过后的滤液补足至滤前的体积（注意应以从滤渣上加入溶剂清洗滤渣后的滤液为补充液），摇匀后再精密量取该滤液适量进行下步操作。另外，当不溶于溶剂的辅料占有相当比例时（10ml、20ml的体积中有1g以上的不溶于溶剂的辅料等）不宜使用10ml、20ml量瓶加溶剂至刻度的方法，应使用精密加入10ml、20ml溶剂的方法更为准确、定量。,84,2 标准中的样品的滴定度与滴定液的浓度是相对应相匹配的，若使用的滴定液的浓度高于或低于标准规定浓度，计算含量时不能使用标准给出的滴定度，而应根据实际使用的浓度与标准规定的浓度的比例重新计算滴定度。3 回滴定法中，标准中往往给出的是精密加入的反应液的浓度与滴定度，但根据等当量反应原理，在计算时应以滴定过量剩余的反应液的滴定液的浓度与滴定度计算。,4 原料药若未经复杂的前处理，同批号平行两份样品间的偏差应小于0.2%；制剂同批号平行两份样品间的偏差应小于0.4% ；若经复杂的前处理，同批号平行两份样品间的偏差原料应小于0.3% 、制剂应小于0.6%（或视易难程度适当调整）,含量测定的仪器分析法 紫外-可见 分光光度法（对照品法 比色法 吸收系数法）,1 准确称取样品和对照品（吸收系数法不需使用对照品）各两份或两份以上（重量低于50mg以下的应使用十万分之一的电子分析天平），2 严格按标准进行前处理（定量溶解、定量稀释、定量过滤、定量量取或定量提取、回馏、水解、显色、衍生等），制备供试品溶液和对照品溶液。,3 正确制备空白（背景）溶液 4 通过对供试品溶液在一定波长范围内的扫描（除比色法外），测定本台仪器测得的最大吸收波长与标准规定的测定波长的差异（不得过2nm），按实际测得的最大吸收波长，测定溶液的吸收值。,注意,1 紫外-可见分光光度法含量测定供试品溶液和对照品溶液测定的吸光度应在0.3-0.7范围内2 供试品溶液若使用滤纸或滤膜进行滤过后的续滤液进行测定，注意滤纸或滤膜是否会吸附主成分3 用于紫外-可见分光光度法含量测定供试品溶液和对照品溶液必须是澄清、无浊度和荧光的,4 如果所用溶剂有挥发性，测定过程中比色杯应加盖防挥发，并且要快速测定，装入供试品溶液和对照品溶液、空白溶液后不宜的久置于仪器的样品室。5 对照品是否要进行干燥、干燥方法如何等应严格按照标准或该对照品所附的说明书进行操作。,6 若未经复杂的前处理，同批号平行两份样品间的偏差原料药应小于1%；制剂应小于1.5%，若经复杂的前处理，应视易难程度适当调整。,含量测定的仪器分析法 高效液相色谱法（HPLC）,1 准确称取样品和对照品各两份或两份以上（重量低于50mg以下的应使用十万分之一的电子分析天平），2 严格按标准进行前处理（定量溶解、定量稀释、定量过滤、定量量取或定量提取、回馏、水解、显色、衍生等），制备供试品溶液和对照品溶液，3 进行系统适应性实验：取对照品溶液一份或两份进样5次以上，各峰面积或响应应子的RSD应小于2%,4 正确配置流动相（注意水相盐的浓度，特别在使用两元泵要注意两项混合后是否有盐析出从而堵塞柱子；有pH值要求的用pH酸度计测定流动相的pH值； 注意调节pH的顺序；过滤时正确选择滤膜的类型和型号） 5 供试品溶液和对照品溶液应在完全相同的色谱条件下测定（ 仪器 流动相 柱子 流速 柱温 波长）,注意,1 供试品溶液和对照品溶液进样前最好以0.45m的滤膜过滤(注意滤膜的类型)，同时要注意滤膜是否对主成分是否有吸附作用2 配置流动相的和供试品溶液和对照品溶液的试剂应使用色谱级或光谱级的试剂，如果目前尚无此级别的，应使用其他的最高级别的试剂，必要时照紫外-可见分光光度法，在液相测定波长处应无吸收,3 对照品是否要进行干燥、干燥方法如何等应严格按照标准或该对照品所附的说明书进行操作4 若未经复杂的前处理，同批号平行两份样品间的偏差原料药和制剂均应小于2%，若经复杂的前处理，应视易难程度适当调整。,含量均匀度,片剂、硬胶囊剂或注射用无菌粉末，每片（个）标示量不大于 25m g 或主药含量不大于每片（个）重量25%者；内容物非均一溶液的软胶囊、单剂量包装的口服混悬液、透皮贴剂、吸入剂和栓剂，均应检查含量均匀度。凡检査含量均匀度的制剂，一般不再检查重（装）量差异。,注射液的装量,所用注射器及量具必须洁净、干燥并经定期校正；其最大容量应与供试品的标示装量相一致，或使待测体积至少占其额定体积的40% 。注射器应配上适宜号数的注射针头，其大小与临床使用情况相近为宜。,97,实验室基础工作的规范化要求,精密仪器 设备强制性校验 自校程序 维护保养 环境 操作SOP,天平,（1）经常使用天平，应使天平连续通电，以减少预热时间使天平处于相对稳定状态，如果天平长期不使用，应关闭电源。（2）轻放、轻拿、轻开、轻关，不要碰撞操作台