MM_FS_CNJ_0080 出口禽肉中尼卡巴嗪残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0080出口 禽肉 尼卡巴嗪 残留量 液相色谱法 外标法定量 MM_FS_CNJ_0080 出口禽肉中尼卡巴嗪残留量检验方法1.适用范围 本方法适用于出口鸡肉中尼卡巴嗪残留量的检验。2.原理概要 以乙腈提取，并用正己烷液-液萃取以分离脂肪。经氧化铝柱净化后用配有紫外检测器的液相色谱仪测定，外标法定量。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂 乙腈：紫外级； 正己烷； 三氯甲烷； 甲醇：紫外级； 氧化铝：氧化铝90，活性型，碱性(pH1010.5)； 尼卡巴嗪标准品：纯度99.9%； 尼卡巴嗪标准溶液：准确称取适量的尼卡巴嗪标准品，用乙腈配成浓度为100 g/mL的标准储备溶液。根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。3.2.仪器 液相色谱仪，配有紫外线检测器； 玻璃柱：200mm10mm(内径)； 均质器：3000r/min； 旋转蒸发器； 离心机：5000r/min； 梨形瓶：150mL； 分液漏斗：250mL； 微量注射器：25L、100L； 净化柱：将5.0g氧化铝加入25mL三氯甲烷中，移入玻璃柱内，备用。4.试样的抽取与制备4.1.检验批 以不超过2500件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量批量，件最低抽样数，件1251261005101250102515001550110001710012500204.3.抽样方法 按条规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取500g(或一袋)作为原始样品，原始样品总量不得少于2kg。加封后，标明标记，及时送实验室。4.4.试样制备 从原始样品中取部分代表性样品，用绞肉机绞碎，混匀后按四分法缩分出不少于500g试样，装入洁净容器内，密封，并标明标记。4.5.试样保存 将试样于18以下冷冻保存。注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.1.提取 称取试样约10.0g(精确至0.1g)于均质瓶中，加入100mL乙腈，均质1min，以5000r/min离心5min。移取上清液置分液漏斗中。再用50mL乙腈同样操作，与前述上清液合并于同一分液漏斗中。加入乙腈饱和的正己烷75mL，振摇3min。静置分层后将下层乙腈排放于另一分液漏斗中，并加入10mL乙腈饱和的正己烷，振摇3min。静置分层后将下层乙腈排放于梨形瓶中，在旋转蒸发器上浓缩至干。残留物用5mL三氯甲烷溶解。在氧化铝柱中加入30mL三氯甲烷，流速2mL/min。当三氯甲烷流至床面时将样品提取液移入柱内，梨形瓶用三氯甲烷洗二次，每次5mL，并将洗液加入柱内。用150mL三氯甲烷洗柱，弃去流出液。然后用25mL甲醇-三氯甲烷(19)洗脱尼卡巴嗪，洗脱液收集于梨形瓶中。在旋转蒸发器上除去溶剂，残留物用1.0mL甲醇-乙腈混合液(73)溶解，供液相色谱测定。5.2.测定5.2.1.色谱条件色谱柱：Finegel 110，250mm4.6mm(内径)；检测器：UV340nm；流动相：乙腈-甲醇混合液(37)；流速：1mL/min。色谱柱温度：室温。5.2.2.色谱测定 分别将等体积的标准工作溶液和试样溶液注入液相色谱仪，尼卡巴嗪的出峰保留时间约4min。标准工作液及样液中尼卡巴嗪的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。样液测定过程中要参插注入标准工作溶液，以便准确定量。5.3.空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。6.结果计算 用色谱数据处理机或按下式计算试样中尼卡巴嗪残留量： Xhcshsc式中：X试样中尼卡巴嗪残留量，mg/kg；h样液中尼卡巴嗪峰高，mm；hs标准工作溶液中尼卡巴嗪峰高，mm；cs标准工作溶液中尼卡巴嗪浓度，g/mL；c最终样液所代表的试样浓度，g/mL。注：计算结果需扣除空白值。7.低限、回收率的测定7.1.测定低限 本方