拓展视野　多利羊猜想.pptx

从动物机体中取出相关的组织 将它分散成单个细胞 然后 放在适宜的培养基中 让这些细胞生长和增殖 原理 细胞增殖 动物细胞培养 动物细胞培养 胚胎或幼龄动物的组织器官 分散成单个细胞 制成细胞悬浮液 10代细胞 50细胞 无限传代 癌细胞 剪碎 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 洗涤 稀释 分离 原代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 注意关键词 细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养 原代培养 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养 传代培养 将原代细胞从培养瓶中取出 配制成细胞悬浮液 分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养 称为传代培养 解答概念 动物细胞培养条件 1 无菌 无毒的环境 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 2 营养 葡萄糖 氨基酸 无机盐 微量元素 动物血清 血浆等 3 温度和PH36 5 0 5度 PH为7 2 7 4 4 气体环境 O2和CO2 95 空气和5 CO2 补充合成培养基中缺乏的物质 1 生产蛋白质生物制品 病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体等 2 获得大量自身的皮肤细胞 用于植皮 3 用于检测有毒物质 4 用于生理 病理 药理等方面的研究 为治疗和预防疾病提供理论依据 动物细胞培养技术的应用 概念 将动物的一个细胞的细胞核 移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中 使其重组并发育成一个新的胚胎 这个新的胚胎最终发育成动物个体 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 核移植 难度高 受体细胞 M 期的卵母细胞 二 动物体细胞核移植技术和克隆动物 细胞分化程度低 恢复全能性容易 细胞质 细胞核 细胞核移植 多莉羊的培育过程 动物的克隆与植物克隆一样吗 用动物体细胞进行克隆的过程 其实际操作过程是什么 动物克隆过程的实际是细胞核移植 不 思考题 供体细胞 供核 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞 M 中期 供质 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳 1 共分成两大阶段 核移植和胚胎移植2 取卵细胞作受体细胞的原因是 它是最大的细胞 易操作 它发育可直接表达性状同时其可为细胞核的全能性表达提供物质基础3 严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 核移植过程 动物细胞融合与单克隆抗体 动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 2 诱导动物细胞融合的方法 3 动物细胞融合的用途 制备单克隆抗体 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性 不感染细胞 保留融合活性 诱导细胞融合 物理法化学法生物法 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 主要用途 物理 化学方法 同左 灭活的病毒 物理 离心 振动 电刺激 化学 聚乙二醇 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 细胞融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 思考 1 请概括单克隆抗体的概念 2 为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段 制备过程为何要经过两次筛选 单克隆抗体 提出问题 长期以来 人们为了获得抗体 采用的是把某种抗原反复注射到动物体内 然后从动物血清中分离出所需抗体的方法 用这种方法获得的抗体 不仅产量低 而且抗体的特异性差 纯度低 反应不够灵敏 1 概括单克隆抗体的概念 1 为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 思考 2 单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段 3 制备过程为何要经过两次筛选 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 选择培养基上培养 专一抗体检验阳性 专一抗体检验阳性 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 克隆杂交细胞 分开不同杂交细胞 克隆专一抗体 检验阳性细胞 单克隆抗体制备过程示意图 多种杂交细胞 单克隆抗体的制备 抗原 小鼠 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 细胞融合 筛选 细胞培养 筛选 继续培养 体外培养 体内培养 单克隆抗体 单克隆抗体有何应用 主要用于疾病的诊断 治疗和预防 与常规抗体相比 具有特异性强 灵敏度高的优点 如 各种癌症 肝炎病毒 SARS病毒 细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断 在疾病治疗方面 单克隆抗体犹如人体卫士 能识别 自己 与 异己 一旦发现致病因素便与之结合将其杀死 若在单抗上带上抗癌药物制成 生物导弹 将药物定向带到癌细胞所在部位 既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞 克隆动物的研究意义 1 克隆动物作为生物反应器 生产医用蛋白