五.葡萄糖的质量检查(3).ppt

药品检验技术葡萄糖的质量检验 熟练掌握本品外观 鉴别 杂质检查的操作 正确判断检测结果 能合理选择仪器 试药与配制试液 规范书写检验原始记录及检验报告书 掌握药品质量检验的程序 能科学合理地解释检验中的现象 处理检验中的异常情况 掌握葡萄糖杂质来源 检查的目的 方法与原理 掌握结果处理方法 知识目标 拓展目标 技能目标 葡萄糖的质量检验 p52 一 葡萄糖的化学结构 C6H12O6 H2O198 17D 吡喃葡萄糖一水合物 H2O 费歇尔投影式 依据费歇尔投影式 氧化度高的碳原子在上方 最下面的手性碳原子上的横向基团 在右侧为D型 在左侧为L型 哈沃斯式C5取代基在环面上方为D型 在下方为L型 哈沃斯式 葡萄糖的结构特点1 多羟基化合物 极性大 2 四个手性碳原子 具旋光性 3 含醛基4 含一分子结晶水 葡萄糖的质量检验 二 葡萄糖的理化性质 一 性状 无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末 无臭 味甜 易溶于水 微溶于乙醇 不溶于氯仿或乙醚 二 旋光性 有4个手性碳原子 具旋光性 24个光学异构体 天然葡萄糖1个 显右旋光 比旋度为 52 9 变旋现象 水溶液中主要呈半缩醛的环状结构 D 葡萄糖 113 4 D 葡萄糖 19 7 p52 葡萄糖水溶液为两构型的衡态混合液 新配制溶液的比旋度 112 随时间降至 52 9 6h达平衡 加热 加酸 加弱碱可加速平衡 二 葡萄糖的理化性质 三 还原性 含醛基 具还原性 可被碱性酒石酸铜试液 费林试剂 氧化 生成葡萄糖酸和氧化亚铜 显红色沉淀 其他氧化剂 托伦试剂 溴水 稀硝酸等 2 OH 葡萄糖酸钠 酒石酸钾钠 Cu2 OH 2 Cu2O 砖红色 二 葡萄糖的理化性质 四 氧化性 含醛基 具氧化性 可被还原剂还原为葡萄糖醇 五 缩合反应 醛基可与苯肼缩合生成腙 苯肼过量时可成脎 不同糖脎的晶型和熔点不同 可用于鉴别不同的糖类 六 高温加热脱水分解 温度越高 加热时间越长分解越快 弱酸性条件下相对稳定 葡萄糖输液制备需用药用稀盐酸调pH4 2以下 3 5 5 5 115 热压灭菌30分钟 葡萄糖注射液需检查5 羟甲基糠醛杂质 聚合 显黄色 3H2O 糠醛 别名 呋喃甲醛 5 羟甲基糠醛无色 有紫外吸收 对人体有害 注射剂检查其限量 ppt66 S 双键转移成醛基 三 葡萄糖的质量标准 中国药典2010年版二部 葡萄糖 本品为D 吡喃葡萄糖一水合物 性状 本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末 无臭 味甜 本品在水中易溶 在乙醇中微溶 比旋度取本品约10g 精密称定 置100ml量瓶中 加水适量与氨试液0 2ml 溶解后 用水稀释至刻度 摇匀 放置10分钟 在25 时 依法测定 附录 E 比旋度为 52 6 至 53 2 鉴别 1 取本品约0 2g 加水5ml溶解后 缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中 即生成氧化亚铜的红色沉淀 2 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 光谱集464图 一致 检查 酸度取本品2 0g 加水20ml溶解后 加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液 0 02mol L 0 20ml应显粉红色 溶液的澄清度与颜色取本品5 0g 加热水溶解后 放冷 用水稀释至10ml 溶液应澄清无色 如显浑浊 与1号浊度标准液 附录 B 比较 不得更浓 如显色 与对照液 取比色用氯化钴液3 0ml 比色用重铬酸钾液3 0ml与比色用硫酸铜液6 0ml 加水稀释成50ml 1 0ml加水稀释至10ml比较 不得更深 乙醇溶液的澄清度取本品1 0g 加90 乙醇30ml 置水浴上加热回流约10分钟 溶液应澄清 H2O 氯化物取本品0 60g 置50ml纳氏比色管中 加水溶解使成25ml 再加稀硝酸10ml 加水使成约40ml 摇匀 即得供试溶液 另取标准氯化钠溶液6 0ml同法制成对照液 于供试液与对照液中分别加入硝酸银试液1 0ml 用水稀释成50ml 摇匀 在暗处放置5分钟 同置黑色背景上 从比色管上方向下观察 比较 不得更浓 0 0l 硫酸盐取本品2 0g 置50ml纳氏比色管中 加水溶解使成40ml 再加稀盐酸2ml 摇匀 即得供试溶液 另取标准硫酸钾溶液2 0ml同法制成对照液 于供试液与对照液中分别加入25 氯化钡溶液5ml 用水稀释成50ml 摇匀 放置10分钟 同置黑色背景上 从比色管上方向下观察 比较 不得更浓 0 0l 亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1 0g 加水10ml溶解后 加碘试液1滴 应即显黄色 干燥失重取本品约1g 在105 干燥至恒重 损失重量为7 5 9 5 附录 L 炽灼残渣不得过0 1 附录 N 蛋白质取本品1 0g 加水10ml溶解后 加磺基水杨酸溶液 1 5 3ml 不得发生沉淀 钡盐取本品2 0g 加水20ml溶解后 溶液分成两等份 一份中加稀硫酸1ml 另一份加水1ml 摇匀 放置15min 两液均应澄清 钙盐取本品1 0g 加水10ml溶液后 加氨试液1ml与草酸铵试液5ml 摇匀 放置1h 如发生混浊 与标准钙溶液 精密称取碳酸钙0 1250g 置于500ml量瓶中 加水5ml与盐酸0 5ml使溶解 用水稀释至刻度 摇匀 1ml相当于0 1mg钙 1 0ml制成的对照液比较 不得更浓 0 01 铁盐取本品2 0g 加水20ml溶解后 加硝酸3滴 缓缓煮沸5分钟 放冷 加水稀释使成45ml 加硫氰酸铵溶液 30 100 3ml 摇匀 如显色 与标准铁溶液2 0ml用同一方法制成的对照液比较 不得更深 0 001 重金属取本品4 0g 置25ml纳氏比色管中 加水23ml溶解后 加醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml制成供试液 另取标准铅溶液2ml 同法制成对照液 于供试液与对照液中分别加入硫代乙酰胺试液2ml 摇匀 放置2分钟 同置白纸上 自上向下透视 供试管显示的颜色与对照管比较 不得更深 含重金属不得过百万分之五 砷盐取本品2 0g 加水5ml溶解后 加稀硫酸5ml与溴化钾溴试液0 5ml 置水浴上加热约20分钟 使保持稍过量的溴存在 必要时 再补加溴化钾溴试液适量 并随时补充蒸散的水分 放冷 加盐酸5ml与水适量使成28ml 依法检查 附录 J第一法 应符合规定 0 0001 微生物限度 性状 色 香 味 形 溶解性 物理常数等 鉴别 化学法 光谱法 色谱法 检查 杂质检查 微生物限度检查 含量测定 为什么葡萄糖的质量标准中没有含量测定 检验项目中 任何一项不符合规定 则不可药用 葡萄糖的质量检验 比旋度取本品约10g 精密称定 置100ml量瓶中 加水适量与氨试液0 2ml 溶解后 用水稀释至刻度 摇匀 放置10分钟 在25 时 依法测定 附录 E 比旋度为 52 6 至 53 2 溶液浓度C应按无水物计算 W 180 16 198 17 100C6H12O6 H2O198 17 约10gC6H12O6180 16 X 葡萄糖的质量检验 实验准备 1 仪器 分析天平 约10g 称量范围9 11g8 5 11 4g保留四位有效数100ml量瓶 烧杯 玻棒 滴管 旋光仪2 试液 氨试液 0 2ml可用滴管加入4滴 加少许氨试液促进其 两种构型的平衡 比旋度恒定在 52 6 至 53 2 之间 计算式 C L C 供试品溶液的浓度 g mlC W 180 16 198 17 100L 溶液厚度 即测定管的长度 dm 重复读数三次 取平均值 示数 红色为左旋 黑色为右旋 整数读大盘示值小数读小盘示值 葡萄糖的质量检验 开机 电源 光源 示数关机 示数 光源 电源 示数 鉴别 1 取本品约0 2g 加水5ml溶解后 缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中 即生成氧化亚铜的红色沉淀 准备 天平 量筒 试管 滴管 水浴锅碱性酒石酸铜试液 2 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 光谱集464图 一致 检查 杂质 微生物限度检查 葡萄糖的质量检验 四 杂质的概念 58 ywfx 杂质的分类 T 氯化物硫酸盐铁盐重金属砷盐酸碱水分易炭化物炽灼残渣等收载在附录中 某一个或某一类生产或贮藏过程引入的杂质收载在正文项下 杂质来源 生产中引入原料中间体副产物降解产物 两大来源 贮藏过程中产生水解氧化分解异构化 五 杂质检查方法 药典规定的杂质检查均为限量检查杂质限量 药物中所含杂质的最大允许量表示方法 或ppm 对照法 灵敏度法 比较法 检查方法 一 对照法 限量检查法 1 取一定量被测杂质的对照品配成标准溶液2 取一定量供试品配成供试液3 相同条件处理 比较二者反应结果注意 平行原则计算 杂质限量允许杂质存在的最大量供试品量注意单位一致 管1 样品管 管2 对照管 二 灵敏度法 不需对照物质以该检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量 在供试品溶液中加入试剂 在一定条件下反应以不出现正反应为合格 三 比较法 不需对照物质供试液测定某些数值 如PH值 吸收度 旋光度 干燥失重等 要求不得超越其限量值 如 葡萄糖氯化钠注射液 检查 pH值应为3 5 5 5 六 一般杂质检查 一 氯化物检查 信号杂质 葡萄糖中氯化物取本品0 60g 依法检查 附录 A 与标准氯化钠溶液6 0ml制成对照液比较 不得更浓 0 0l 准备 称量范围 0 595 0 605g天平 量筒 50ml纳氏比色管 10ml刻度吸管 标准氯化钠溶液 稀硝酸 1 原理 对照法氯化物在硝酸酸性条件下与AgNO3反应 生成AgCl白色浑浊液 与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的AgCl浑浊程度比较 浊度不得更大 Cl AgNO3 AgCl 2 操作方法 对照法 葡萄糖中氯化物检查 0 60g 样品管 对照管 6 0mL 浓度 10 gCl ml 1 0mL 用水稀释至50mL 3 结果观察方法暗处放置5min 避免AgCl分解 黑色的背景自上而下的观察 结果判断 供试溶液所显乳光浅于对照溶液 符合规定 不符合规定 4 测定条件 1 标准NaCl溶液 0 01 Cl ml Cl 0 05 0 08 50ml 2 酸度 稀HNO310ml 50ml 3 沉淀剂 AgNO3 4 避光 暗置5分钟 5 比浊方法 同置于黑色背景上 自上向下观察 5 干扰的排除 1 供试液混浊 可用洗净滤纸过滤 2 若供试液有色 可用内消色法 取一定量的供试液 分成两等份 供试液 AgNO3试液 过滤滤液 NaCl标准液 对照液 供试液 AgNO3试液 供试管 杂质限量计算 0 01mg ml 6 0ml 100 0 60g 1000 0 01 或10 g ml 6 0ml0 60g 100ppm注意 单位换算 二 硫酸盐检查 信号杂质 SO42 Ba2 BaSO4 自学 葡萄糖中铁盐取本品2 0g 加水20ml溶解后 加硝酸3滴 缓缓煮沸5分钟 放冷 加水稀释使成45ml 加硫氰酸铵溶液 30 100 3ml 摇匀 如显色 与标准铁溶液2 0ml用同一方法制成的对照液比较 不得更深 0 001 三 铁盐检查法 三 铁盐检查法 1 原理 对照法铁盐在盐酸酸性条件下与硫氰酸铵反应 生成红色硫氰酸铁配离子 与一定量的标准硫酸铁铵溶液在相同条件下产生的硫氰酸铁配离子进行比色 颜色不得更深 Fe3 6SCN Fe SCN 6 3 2 测定条件 1 标准硫酸铁铵溶液 0 01 Fe3 ml 2 酸度 稀HCl4ml 50ml 3 显色剂 NH4SCN 4 氧化剂 过硫酸铵 氧化亚铁离子 5 比色方法 同置于白色背景上 自上向下观察 结果观察 3 干扰的排除若供试液与对照液色调不一致 或所呈颜色太浅 可用正丁醇或异戊醇提取 比较提取液 4 杂质限量计算 0 01mg ml 2 0ml 100 2 0g 1000 0 001 注意 单位一致 四 重金属检查 葡萄糖中重金属取本品4 0g 加水23ml溶解后 加醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml 依法检查 附录 H第一法 含重金属不得过百万分之五 四 重金属检查重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质 重金属影响药物的稳定性及安全性 铅易在体内积蓄中毒 重金属检查以铅为代表 药典收载的检查方法有四种 重金属检查法 测 定 法 硫代乙酰胺法 微孔滤膜法 炽灼检查法 硫化钠法 第一法 硫代乙酰胺法 重点 适用于溶于水 稀酸和乙醇的药物 是最常用的方法 1 原理 硫代乙酰胺在弱酸性 pH3 5 条件下水解 产生H2S 与微量重金属离子 以Pb2 为代表 生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液 与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较 不得更深 CH3CSNH2 H2O CH3CONH2 H2SH2S Pb2 PbS 2H 第一法 硫代乙酰胺法 附录 H第一法 除另有规定外 取25ml纳氏比色管三支 甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml后 加水或各品种项下规定的溶剂稀释成25ml 乙管中加入按各品种项下规定的方法制成的供试液25ml 丙管中加入与甲管相同量的标准铅溶液后 再加入与乙管相同量的按各品种项下规定的方法制成的供试液 加水或各品种项下规定的溶剂使成25ml 再在甲乙丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml 摇匀 放置2分钟 同置白纸上 自上向下透视 当丙管中显出的颜色不浅于甲管时 乙管中显出的颜色与甲管比较 不得更深 2 操作方法甲管 标准液 乙管 供试液 丙管 标准液 供试液 结果观察当丙管中显出的颜色不浅于甲管时 乙管中显出的颜色与甲管比较 不得更深 2 测定条件 1 标准硝酸铅溶液 0 01 Pb2 ml 2 酸度 PH3 5 醋酸盐缓冲液 3 沉淀剂 硫代乙酰胺 3 干扰排除 1 供试品有色 可用外消色法 在对照管中加稀焦糖溶液或其它有色溶液 2 若供试品有微量高铁盐 氧化硫化氢 析出硫 加V C使其还原为为亚铁盐 以除去干扰 葡萄糖中重金属取本品4 0g 加水适量溶解后 加醋酸盐缓冲液 pH3 5 2ml 依法检查 附录 H第一法 含重金属不得过百万分之五 准备 称量范围 3 95 4 05g标准铅溶液应取多少ml 5ppm 10 g ml V 4 0g 天平 量筒 25ml纳氏比色管 2ml移液管标准铅溶液 醋酸盐缓冲液 第二法 将供试品炽灼破坏后再按第一法检查 适用于在水 乙醇中难溶或能与重金属离子形成配位化合物而干扰检查的有机药物 第三法 在碱性条件下 NaOH 加硫化钠 与一定量标准铅溶液经同样处理后 进行比较 适用于难溶于稀酸但能溶于碱性水溶液的药物 第四法 微孔滤膜法 通过微孔滤膜过滤 使试验条件下生成的硫化铅沉淀富集于滤膜上 形成铅斑 比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色 适用于含2 5微克重金属杂质的检查 五 砷盐的检查 古蔡法 重点 1 原理 金属锌与酸作用产生新生态氢 氢与微量砷盐反应生成砷化氢气体 砷化氢遇溴化汞产生黄至棕色砷斑 同样条件下制备标准砷斑 比较二者砷斑AsO33 3Zn 9H AsH3 3Zn2 3H2OAsH3 3HgBr2 3HBr As HgBr 3 黄色 AsH3 2HgBr2 2HBr AsH HgBr 2 棕色 2 装置检砷瓶A导气管B具孔塞C C 3 操作 导气管B中装入醋酸铅棉球 再于旋塞C的平面上放一片溴化汞试纸 样品 对照品分别置于检砷瓶中 加盐酸5ml与水21ml 再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴 在室温放置10分钟 加锌粒2g 立即将装妥的导气管B密塞与A瓶 置25 40 水浴中 反应45分钟 取出溴化汞试纸 比较砷斑 4 测定条件 1 标准砷溶液 1 gAs ml As 2 g 33ml 2 盐酸条件下 酸为反应物 应足量 3 酸性氯化亚锡及碘化钾的作用还原五价砷为三价砷 4 醋酸铅棉花的作用 消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰 醋酸铅棉花装量约60 装管高度为60 80 注意 由于砷斑的颜色不稳定 在反应中应保持干燥及避光 反应完毕 立即与标准砷斑比较 平行原则 六 干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定的条件下 经干燥后所减失的重量 以百分率表示 减失质量 100 取样量主要指水分 也包括其它挥发性物质 测定方法 1 常压恒温干燥适用于受热较稳定的药物 恒重 供试品连续两次干燥或炽灼后 重量差异在0 3 以下 称量取4位小数 温度 105 除另有规定外 时间 首次2h以上 以后为1h 注意 干燥时打开称量瓶盖 取出时盖好 干燥器中放冷再称重 2 干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的药物 3 减压干燥法适用于熔点低 受热不稳定或水分难赶除的药物 七 澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质 用作注射剂的原料药应作此项检查检查方法 将一定浓度的供试品溶液与等量的规定级号的浊度标准液进行比较 注意 1 需用配对的比浊用玻璃管 2 暗室内伞棚灯下 1000lx 水平方向观察 比较 p70 八 溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质的限量 1 目视比色法取一定量的供试品 加水溶解至10ml 与规定色调色号的标准比色液比较 注意 选用25ml纳氏比色管 白色背景下观察 色深时可平视观察 2 分光光度法3 色差计法 九 易炭化物检查法 检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而显色的微量有机杂质 方法 取一定量供试品于比色管中 缓缓加入5ml硫酸 振摇溶解 与规定的对照液比较 颜色不得更深 含量测定 为什么葡萄糖的质量标准中没有含量测定 药典中规定了葡萄糖的比旋度 为 52 6 53 2 则均值为 52 9 含量范围 99 4 100 6 52 6 52 9 100 99 4 53 2 52 9 100 100 6 CL 5 葡萄糖注射液含量测定 取本品 依法测定旋光度 附录 E 与2 0793相乘 即得供试量中含有C6H12O6 H2O的重量 g 测定管长1dm CLC 2 0793 为什么 198 17 100 52 9 1 180 16C 每100ml中含葡萄糖的质量 g 5 葡萄糖注射液杂质检查 5 羟甲基糠醛 特殊杂质 精密量取本品适量 约相当于葡萄糖0 1g 置50ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 照紫外 可见分光光度法 附录 A 在284nm的波长处测定 吸光度不得大于0 25 七 原料药的质量检验 原料药 用于制剂生产的活性物质 制剂方可用于临床 起始原料原料制剂儿茶酚盐酸肾上腺素盐酸肾上腺素注射液 化工原料或农产品无药用标准 化学合成药或天然化学药需纯化除杂质 必须符合药用标准未达标时可返工 不需纯化控制污染控制变质反应必须符合药用标准未达标时不可返工 化学过程 物理过程 酰化胺化还原 杂质肾上腺酮 原料药检验项目 1 性状2 鉴别3一般杂质4 有关物质 特殊杂质 5 有机溶剂残留6 晶型7 粒度 8 溶液的澄清度与颜色9 溶液的酸碱度10 干燥失重和水分11 异构体12 其他 微生物 细菌内毒素 异常毒性等 13 含量测定 药物安全性 有效性 稳定性 八 特殊杂质检查 是指在该药物生产和储藏过程中 根据其生产方法 工艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质 如葡萄糖注射液中的5 羟甲基糠醛 物理法化学法分光光度法色谱法 检查方法 一 物理法 利用药物与杂质在物理性质上的差异 如臭味及挥发性 颜色 溶解行为 旋光性质等进行检查 阿司匹林中苯酯类杂质的检查 硫酸阿托品中莨菪碱的检查 旋光度不得超过 0 40 50mg ml 二 化学法 利用药物与杂质在化学性质上的差异1 比色法和比浊法 同一般杂质 2 容量法 以消耗滴定液的体积 控制杂质限量 三 分光光度法 紫外 利用药物与杂质对光吸收性质的差异检查杂质限量 如 肾上腺素中的酮体 310nm处A不得大于0 10青霉素钠中的青霉噻唑多肽 280nm处A不得大于0 10 四 色谱法 利用药物与杂质在吸附或分配性质上的差异薄层色谱法TLCThinLayerChromatography高效液相色谱法HPLCHighPerformanceLiquidChromatography气相色谱法GCGasChromatography 1 薄层色谱法 TLC 优点 灵敏 简便 快速 无需特殊设备 分离 检查同时完成 特别适合结构性质与药物相近的杂质检查 如 盐酸普鲁卡因中检查对氨基苯甲酸 所以 药典中常用于特殊杂质检查 1 杂质对照品法a 根据杂质限量 分别配制已知杂质的对照品溶液和供试品溶液 b 分别点加在同一硅胶 或其它吸附剂 薄层板上 展开和定位 c 供试品中所含该杂质的斑点 不得超过相应的杂质对照斑点 颜色或荧光 本法较为理想 但需杂质对照品 盐酸普鲁卡因注射液 检查 对氨基苯甲酸精密量取本品 加乙醇稀释制成每lml中含盐酸普鲁卡因2 5mg的溶液 作为供试品溶液 另取对氨基苯甲酸对照品 加乙醇制成每1ml中含30 g的溶液 作为对照品溶液 照薄层色谱法 附录VB 试验 吸取上述两种溶液各l0 l 分别点于含有羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上 用苯 冰醋酸 丙酮 甲醇 14 1 l 4 为展开剂 展开 晾干 用对二甲氨基苯甲醛溶液 2 对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml 加冰醋酸5ml制成 显色 供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点 其颜色与对照品溶液的主斑点比较 不得更深 2 高低浓度对比法a 将供试液按限量要求稀释至一定浓度作为对照液 b 将供试液与对照液分别点加于同一薄层板上 展开 c 供试液所显杂质斑点不得深于对照溶液所显主斑点颜色 数目不得超过规定数 本法不需对照品 使用率最高 咖啡因 检查 有关物质取本品 加三氯甲烷 甲 3 2 溶解制成每lml中约含20mg的溶液 作为供试品溶液 精密量取适量 加上述溶剂定量稀释成每1ml中约含0 01mg的溶液 作为对照溶液 照薄层色谱法 附录VB 试验 吸取上述两种溶液各l0 l 分别点于同一硅胶GF254薄层板上 以正丁醇 丙酮 三氯甲烷 浓氨溶液 40 30 30 10 为展开剂 展开 晾干 在紫外灯 254nm 下检视 供试品溶液如显杂质斑点 与对照溶液的主斑点比较 不得更深 3 在一定供试品及检查条件下 不允许有杂质斑点出现 4 选用可能存在的某种物质作为杂质对照品 异烟肼片 检查 游离肼照薄层色谱法 附录VB 测定 取本品细粉适量 加丙酮 水 1 1 使异烟肼溶解并制成每1ml中约含100mg的溶液 滤过 取续滤液作为供试品溶液 另取硫酸肼加丙酮 水 1 1 制成每1ml中约含0 080mg 相当于游离肼20 g 的溶液 作为对照品溶液 吸取上述两种溶液各5 l 分别点于同一硅胶G薄层板上 以异丙醇 丙酮 3 2 为展开剂 展开 晾干 喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液 15分钟后检视 在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上 不得显黄色斑点 对乙酰氨基酚 检查 有关物质 TLC 供试液 供试品1 0g 5ml乙醚0 2ml点样对照液 对氯乙酰苯胺乙醚液 50 g ml 0 04ml点样展开剂 氯仿 丙酮 甲苯 13 5 2 结果 供试品如显杂质斑点 不得比对照液主斑点更大 更深 2 高效液相色谱法柱色谱流动相 高压恒速与检测器联用数据处理系统使用本法测定含量的药物 可同时进行杂质检查3 气相色谱用于挥发性物质的测定 色谱图 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图 纵坐标为信号强度 横坐标为保留时间 异烟肼 检查 有关物质照高效液相色谱法 附录VD 测定取本品 加水溶解并稀释制成每1ml中含0 5mg的溶液 作为供试品溶液 精密量1ml 置100ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 作为对照溶液 照含量测定项下的色谱条件 精密量取供试品溶液与对照溶液各10 l 分别注入液相色谱仪 记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰 单个最大杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0 35倍 各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 1 药物的杂质检查法有几种 2 采用对照法检查杂质时应注意什么问题 3 杂质限量如何计算 允许杂质存在的最大量在数值上等于什么 4 对照法与灵敏度法 比较法的最大不同点是什么 5 铁盐检查法中加入过硫酸铵的目的是什么 6 重金属检查最常用的方法是什么方法 7 硫代乙酰胺法检查重金属的酸度要求是多少 8 古蔡法检查砷盐时 反应液中加入氯化亚锡和碘化钾的主要目的是什么 9 古蔡检砷装置的导气管中为什么要加醋酸铅棉花 加多少 10 何谓恒重 恒重干燥时间一般是多少 考证题 1 分光光度法检查药物中的杂质是A 利用吸附或分配性质的差异B 利用对光吸收的差异C 利用溶解行为的差异D 利用旋光性