第一节 酶的制备及活力测定

1 / 6 第一节 酶的制备及活力测定 第一节酶的制备及活力测定 【课标要求】 研究酶的存在和简单制作方法，尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 【知识梳理】 背景知识 1、酶在活细胞内合成，在细胞内起催化作用，称为 _。 1、生物细胞产生的酶 2、由细胞内产生然后分泌到细胞外发挥作用，称为_。 1、提取胞内酶，需要破碎 _，可用破碎仪、研磨器或匀浆机 2、提取酶的方法使酶从中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤 、离心制备成 _。 2、提取胞外酶，可直接从 _中提取。在酶的提取过程中， _、 _等多种环境条件都可能影响酶的空间结构导致酶变性直至丧失活力。因而，提取出的酶首先需要检测酶的 _。（ 1）定义：通常以单位时间内 _或者单位时间内 _3、酶的活力（ 2）测定方法： _和 _ 实践案例：植物淀粉酶的制备及活力测定 材料器具：略 2 / 6 活动程序 ： 1、提取酶液 2 、滴加酶液 ：取 4 支试管编号后均 加 入 PH=的_缓冲溶液。 向 1、 2 试管中各加入未煮过的 _1ml 向 3、 4 试管中各加入已煮过的 _1ml 3、恒温处理：为什么要进行恒温 40c 处理？答：保证酶在 _温度下充分发生反应。 4、钝化处理：钝化处理的原因？答：使酶的活性 _，从而使反应减慢或停止。 5、测定吸光值：用分光光度计在波长 _处 进行比色。 6、绘制标准曲线 7、结果分析：（ 1）从标准曲线中查出 _。 （ 2）计算淀粉酶的活力。 探究活动： 1、制备过氧化氢酶粗酶液 以新鲜 _、 _为材料经过粉碎、研磨、离心，取 _即可得到过氧化氢酶粗酶液。 2、用分光光度法测定过氧化氢酶的活力 在过氧化氢酶存在时，过氧化氢将愈创木酚氧化生成_色产物，这种产物在波长 470nm处有最大吸收峰，通过 测定 _可以计算出过氧化氢酶的活力。 3 / 6 3、用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力 如果在反应系统中加入 _的过氧化氢溶液，经酶促反应后，在酸性条件下，用高锰酸钾溶液滴定 _的 H2o2，然后根据消耗的 H2o2量计算出过氧化氢酶的活力。 高锰酸钾滴定时：当出现 _色并不再消退时标志着滴定达到终点。 【复习指要】 1、学法指导：本节课应初步学会酶的制备及活力测定。学会使用滴定法的具体操作，并运用所学知识和方法去进行酶的活力的测定。 本节课的酶的相关知识和酶的活力测定技术的知识应引起重视，在高考选择题和实验题中都有可能体现。 2、疑难解析：在温度、 pH影响酶活性的实验中，始终都贯穿着对照原则，而在设置对照实验时最重要的是运用单一变量原则，其中的变量就是我们所研究的对象，所以在分析实验问题时，要紧紧抓住研究变量，把其他可能影响实验结果的变量变为常量，才能保证对照实验结果的严密性和准确性。对于温度对酶活性影响的关系曲线，在低于最适温度时，活性受温度影响比高于最适温度时的小。【典题解析】 1.在生物体内，各种化学反应之所以能有条不紊地进行，是因为（） A.酶的催化效率具有高效性 B.酶的种类具有多样性 c.酶的催化作用具有专一性 D.酶的空间结构具有稳定性 4 / 6 解析 生物体内同时进行很多化学反应，这些化学反应是互不干涉的，因为催化各种化学反应的酶不同，对一种酶来讲，只能催化一种或一类化学反应，即酶的专一性特点保证了各种化学反应互不干涉。 答案 c 2.下列关于酶的叙述错误的是（） A.有些酶是核酸 B.酶的数量因与化学反应而减少 c.酶的活性与 pH有关 D.酶的催化效率很高 解析 本题考查了酶的性质，酶是活细胞产生的一类具有催化作用的有机物，绝大多数的酶是蛋白质少数酶是 RNA。酶既具有无机催化剂的特点，又有本身的特点，高效性和专一性，并且需要适宜的条件。 答案 B 【聚焦高考】 1.（ XX 年全国高考题）将小麦种子分别置于 200c 和 300c培养箱中培养 4 天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液I 和提取液 。取 3 支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图加入等 5 / 6 量的提取液和蒸馏水， 450c 水浴保温 5 分钟，立即在 3 支试管中加人等量斐林试剂并煮沸 2 分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是（ D） A、甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色 B、甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 c、甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色 D、甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 2.(上海高考题 )右图为某酶在不同温度下反应曲线和时间的关系，从图中不能获得的信息是（ D） A、酶反应的最适温度 B、酶 因热而失活 生 成 物 时间 70 60 20 50 6 / 6 30 40 c、酶反应生成物量与时间的关系 D、酶反应速度和酶量的关系 第一节酶的制备及活力测定 【知识梳理】 胞内酶、胞外酶、生物组织细胞、粗酶液、动物分泌物或细胞外的组织间隙、温度、 PH、活