肾癌检测循环肿瘤细胞用于预后判断.pdf

1 Ashworth TR A case of cancer in which cells similar to those in the tumors were seen in the blood after death J Aust Med J 1896 14 146 2 Braun S and Naume B Circulating and disseminated tumor cells J Clin Oncol 2005 23 1623 循环肿瘤细胞循环肿瘤细胞 循环系统中存在循环肿瘤细胞循环系统中存在循环肿瘤细胞 circulating tumor cells CTC 的概念已经有的概念已经有 超超 过过100 年的历史年的历史1 在 在1869年 年 Ashworth1报道在 例乳腺癌死亡患者的外周血报道在 例乳腺癌死亡患者的外周血 中发现了类似肿瘤的细胞 并首次提出中发现了类似肿瘤的细胞 并首次提出CTCs的概念 的概念 也称血液稀有细胞 肿也称血液稀有细胞 肿 瘤微小转移病灶 潜伏肿瘤细胞和循环上皮细胞瘤微小转移病灶 潜伏肿瘤细胞和循环上皮细胞 circulating epithelial cell CEC 等等 肿瘤细胞的脱落 侵袭并进入血液循环是实现肿瘤转移的最初阶段肿瘤细胞的脱落 侵袭并进入血液循环是实现肿瘤转移的最初阶段 很大一部很大一部 分发生凋亡分发生凋亡 少数具有高度活力 高度转移潜能的肿瘤少数具有高度活力 高度转移潜能的肿瘤细胞细胞在循环系统中存在循环系统中存 活下来活下来 并为最终形成肿瘤转移灶提供了可能并为最终形成肿瘤转移灶提供了可能 这一程序很 这一程序很可能发生在原发癌可能发生在原发癌 诊断之前诊断之前2 当机体受到内外环境刺激时 微小病灶被激活并且增殖 穿过脉管系统穿过基当机体受到内外环境刺激时 微小病灶被激活并且增殖 穿过脉管系统穿过基 底膜 进入组织 在新的组织中增殖底膜 进入组织 在新的组织中增殖 循环肿瘤细胞与肿瘤进展密切相关循环肿瘤细胞与肿瘤进展密切相关 肿瘤侵犯到血管可能导致转移1 循环肿瘤细胞与肾癌的同时性转移相关2 即使手术切除肿瘤 仍无法迅速清除循环肿瘤细胞3 1 Gupta GP Massague J Cell 2006 127 17 679 695 2 Bluemke K et al Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2009 18 8 2190 2194 3 Yu M et al J Cell Biol 2011 192 3 373 382 CTC Kidney cancer 测定什么物质可以最精确的鉴定出肾癌中存在的循环肿瘤细胞 用什么技术和方法可以检测到肾癌的循环肿瘤细胞 检测出之后有无标准来判断患者预后的情况 J Urol 2012 Jul 188 1 21 6 Epub 2012 May 12 循环肿瘤细胞的检测方法循环肿瘤细胞的检测方法 免疫磁珠 免疫磁珠 可以从可以从106 107个外周血细胞中分离出一个肿瘤细胞个外周血细胞中分离出一个肿瘤细胞 2004年被年被FDA批准用于预测乳腺癌患者的无病生存期和总生存期批准用于预测乳腺癌患者的无病生存期和总生存期 RT PCR技术 技术 以以特异性特异性mRNA 为为靶基因靶基因 方法具有高度的敏感性和特异性 易于开展方法具有高度的敏感性和特异性 易于开展 定量 定量 QPCR 荧光定量 荧光定量 FQ PCR 流式细胞术 流式细胞术 flow cytometry FCM 具有快速 准确的优点 具有快速 准确的优点 不能提供有关细胞形态方面的信息 其在鉴定 计数肿瘤细胞方不能提供有关细胞形态方面的信息 其在鉴定 计数肿瘤细胞方 面比面比RT PCR更可靠 更可靠 其他 其他 CellSearch 系统系统 1 Nagrath S Sequist LV Maheswaran S et al Isolation of rare circulating tumour cells in cancer patients by microchip technology J Nature 2007 450 7173 1235 1239 CellSave Tube CellSearch Circulating Tumor Cell Kit CellSearch 系统 自动化的CTC分离 富集和读取 CellTracks AutoPrep System Magnest CellTracks Analyzer II 96h stability FDA cleared 2007 Circulating Tumor Cell Control Kit Magnetic Capture 使用使用CellSearch 循环肿瘤细胞检测循环肿瘤细胞检测在其他瘤种中的应用价值在其他瘤种中的应用价值 CTCs小于临界值数目的患者发现具有较长的OS和PFS CTCs大于或等于临界值数目的患者含有较短的OS和PFS CTC 临界值 7 5ml MBC 乳腺癌 MCRC 结肠肠癌 MPC 前列腺癌 5 CTCs 3 CTCs 5 CTCs MC Miller GV Doyle LWMM Terstappen 2010 Significance of Circulating Tumor Cells detected by the CellSearch System in Patients with Metastatic Breast Colorectal and Prostate Cancer Journal of Oncology 2010 1 doi 10 1155 2010 617421 3 key points about CTC Kidney cancer 测定什么物质可以最精确的鉴定出肾癌中存在的循环肿瘤细胞 用什么技术和方法可以检测到肾癌的循环肿瘤细胞 检测出之后有无标准来判断患者预后的情况 肾癌中循环肿瘤细胞检测研究肾癌中循环肿瘤细胞检测研究 214例肾癌患者 在手术前后或在辅助治疗过程中抽例肾癌患者 在手术前后或在辅助治疗过程中抽 取血标本 密度梯度离心及磁性细胞分选后进行取血标本 密度梯度离心及磁性细胞分选后进行CK 染色检测染色检测CTCs 结果 结果 80例 例 37 患者检测到 患者检测到CTCs 中位数 中位数 个 范围 个 大约个 范围 个 大约2 3ml外周血检测到外周血检测到 个 个CTCs 随访结果 随访结果 62 的的CTCs 阳性患者在阳性患者在 年内出现转移或死于肾癌 年内出现转移或死于肾癌 结论 肾癌患者检出结论 肾癌患者检出CTCs可能代表了肿瘤较强的侵可能代表了肿瘤较强的侵 袭性 袭性 Bluemke K et al Oncol Rep 2005 14 4 895 899 存