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课题33:凝血因子检验(二)授课班级:授课日期:学 时 数:2学时一、目的要求:1. 掌握血浆凝血酶原时间测定。2. 熟悉简易凝血活酶生成试验及其纠正试验,蝰蛇毒时间测定。3. 了解凝血因子活性测定,组织因子测定、可溶性纤维蛋白单体复合物测定、纤维蛋白原定量测定、因子筛选试验。二、讲授重点:1 血浆凝血酶原时间测定。三、讲授难点:1 简易凝血活酶生成试验及其纠正试验四、教学方法:运用多媒体课件,以讲授为主,解释课本中的难点五、教学内容概要与学时分配:第二十八章 凝血因子的检验第一节 内源凝血系统的检验七、简易凝血活酶生成试验及其纠正试验(20分钟)八、凝血因子活性测定(10分钟)第二节 外源凝血系统的检验(40分钟)一、血浆凝血酶原时间测定二、蝰蛇毒时间测定三、组织因子测定第三节 共同凝血途径第三阶段的检验(20分钟)一、可溶性纤维蛋白单体复合物测定二、纤维蛋白原定量测定三、因子筛选试验六、授课内容:第二十八章 凝血因子的检验第一节 内源凝血系统的检验七、简易凝血活酶生成试验(STGT)本试验主要是测定凝血活酶生成所需要的时间,以检查内源凝血系统凝血活酶的形成有无障碍。方法及参考值 混合稀释血液孵育612min时生成的凝血活酶可使正常基质血浆在11.990.72s内凝固,范围1014s,若延长超过15s作为异常。临床意义 1.STGT延长15s,见于缺乏因子C,如血友病A、血管性血友病(vWD)、DIC和血循环中有抗因子抗体存在等。 2.缺乏因子C,如血友病B、DIC、血循环中有抗因子抗体存在、肝脏疾病和口服抗凝药、肝素等。 3.缺乏因子C,如因子缺乏症、肝脏疾病、DIC、血循环中有抗因子抗体存在等。简易凝血活酶生成纠正试验用含因子、和的正常吸附血浆及含因子、和的正常血清以正常新鲜血浆作纠正材料,进行STGT纠正试验,以确定缺乏凝血因子的类型。临床意义 1.患者标本+正常血浆:STGT异常得以纠正,说明凝血因子缺陷。 2.患者标本+正常血清:STGT异常得不到纠正,为血友病A、因子缺乏。 3.患者标本+吸附血浆:STGT异常得不到纠正,为血友病B、因子缺乏。 4.因子和的鉴别:需借助于因子和的测定,若都不能纠正,应考虑血液中有抗凝物质存在。八、凝血因子的筛选试验方法及参考值 正常人血浆凝块置于5mol/L尿素溶液中24h内凝块不溶解,若溶解则为因子缺乏。临床意义 若24h凝块溶解,尤其在2h内溶解者,表示因子有先天性或获得性缺乏,先天性因子缺乏症往往在1h内溶解,获得性缺乏见于肝脏疾病、淋巴瘤、恶性贫血和DIC等。注意事项 1.抽血应顺利,不要溶血或凝血。 2.抽血后应立即检测,不宜久置。第二节 外源性凝血系统的检验一、血浆凝血酶原时间测定(PT) 反映血浆中凝血因子、水平的试验,是外源性凝血系统的筛选试验。此外,常利用本试验对口服抗凝剂治疗进行监控。方法及参考值Quick一期法:1.以测定秒数表示:男性1113s;女性1114.3s。超过正常对照3s为延长。 2.凝血酶原 受检者凝血酶原时间(s) 时间比值(PTR) 正常对照凝血酶原时间(s) 参考值:0.821.15。3.国际标准化比值(INR)PTRISI(式中ISI为国际敏感度指数)。ISI值愈低,INR愈准确。临床意义 1.PT延长:见于先天性因子、缺乏症和低(无)纤维蛋白原血症,获得性肝脏疾病、DIC、原发性纤维蛋白溶解症、维生素K缺乏症等。血循环中有抗凝物质,如口服抗凝剂、肝素和纤维蛋白降解产物(FDP)等。 2.PT缩短:见于先天性因子增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。医学决定水平 1. 14.5s,测定值超过此时间,且已知有肝病的患者,至少有50%的可能与凝血因子缺乏有关,应测定凝血因子水平,APTT等项目。 2. 16s,对用香豆素类抗凝药“华法林”进行抗凝治疗的病人,若测定值低于此值,则说明抗凝不足,应加大用药剂量。对即将进行大手术的病人,若PT测定值大于此值,则应考虑更改治疗方案。 3. 30s,用“华法林”进行抗凝治疗的病人,若PT测定值大于此值,提示治疗剂量过大,应考虑减低剂量注意事项 1.血和抗凝剂(109mmol/L的枸橼酸钠)19的比例一定要准确。 2.抽血不应有气泡和溶血,应及时送检。 3.抗凝血不能久置,时间延长,活动度降低。 4.本试验较凝血时间敏感,重复性好,故作为出血性疾病的常规筛选试验。血浆凝血酶原时间延长纠正试验 利用贮存血浆中含因子,正常吸附血浆中含因子,正常血清含因子和,正常新鲜血浆含所有血浆凝血因子,来纠正延长的PT,从而找出凝血酶原时间延长的原因。二、蝰蛇毒时间测定(RVVT) 主要是观察富含血小板的受检血浆在蝰蛇毒作用下的复钙时间。本试验用于鉴别因子和:缺乏因子时本试验正常,而血浆凝血酶原时间延长;缺乏因子时,本试验和血浆凝血酶原时间均延长。方法及参考值 RVVT:1314s;超过正常对照3s以上为异常。临床意义 1.主要用于鉴别因子VII或X是否缺乏: RVVT正常而PT延长,表示缺乏因子; RVVT、PT均延长,表示缺乏因子X 。2.RVVT延长:见于纤维蛋白原、因子和、PF3缺乏,血小板减少,血循环中有抗凝物质,如肝素和FDP等。3.R
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