市售陈皮中橙皮甙的含量测定及陈皮质量估定

1 市售陈皮中橙皮甙的含量测定及陈皮质量估定市售陈皮中橙皮甙的含量测定及陈皮质量估定 摘摘 要要 陈皮为芸香科植物橘 Citrus reticulate Blanco 及其栽培变种的干燥成熟果皮 具 有理气健脾 燥湿化痰之功效 其气香 味辛 苦 性温 主要含挥发油 黄酮类 生 物碱 肌醇等成分 黄酮类主要为橙皮甙 Hesperidin 也是陈皮的主要有效成分 由于陈皮药材属临床常用大宗类药材 而采集加工分散 故市场流通 药店贮配的药材 质量参差不齐 1 本实验通过对采购自不同药店的陈皮中橙皮甙含量的测定与分析 对 商品药材陈皮的质量情况进行估定 关键词关键词 陈皮 橙皮甙 黄酮类 分光光度法 1 1 前言前言 陈皮为芸香科植物橘 Citrus reticulate Blanco 及其栽培变种的干燥成熟果皮 又 名橘皮 具有理气健脾 燥湿化痰之功效 药材分为 陈皮 和 广陈皮 两种 其气 香 味辛 苦 性温 主要含挥发油 黄酮类 生物碱 肌醇等成分 其中黄酮类物质 主要为橙皮甙 Hesperidin 橙皮甙是陈皮的主要有效成分 2 在医学上可用于维持 血管正常渗透压 具有抗菌 抗氧化 抗癌等功效 3 4 中华药典2010 中规定陈皮 中橙皮甙含量不得少于3 0 以此参考 橙皮甙含量的多少可作为陈皮质量估定的重要 指标 但是 由于陈皮质量与其原材料 即橘的品种 和保藏时间有关 采集加工分散 加之某些药店为了降低成本 采购质量低下的陈皮出售 导致市场流通 药店贮配的药 材质量参差不齐 2 2 实验目的实验目的 通过对采购自泰安市不同药店的陈皮中橙皮甙含量的测定与分析 对泰安市商品药 材陈皮的质量情况进行估定 3 3 实验原理实验原理 2 橙皮甙 Hesperidin 又名橙皮苷 Hesperidion 柑果苷 Citrus 是由一 分子橙皮素与一分子的芳香二糖缩水结合而成 其结构式如图1 橙皮甙是一种浅黄色 的结晶粉末 几乎无臭无味 分子式为C28H34O15 相对分子量610 55 熔点245 254 旋光度为 70 橙皮甙难溶于水 50L水可溶解1g橙皮甙 几乎不溶于丙酮 乙醚 苯 微溶于乙醇 甲醇及热冰醋酸 可溶于二甲基甲酰胺及甲酰胺 易溶于吡啶 甘油 稀 碱 5 橙皮甙属于双氢黄酮类化合物 存在于柑橘类和中草药 如陈皮 枳实等 中 是维生素P的主要成分 能保持微血管壁正常的渗透性 对心血管疾病有显著疗效 橙 皮甙经甲基化后 可配制成多种防止动脉粥样硬化和心肌梗塞的药物 6 橙皮甙的提取方法有很多 如热水提取法 醇类提取法 超声波强化提取法 高速 逆流色谱法 HSCCC 超临界二氧化碳萃取法等 7 其中碱提酸沉法操作简单 陈本 低 提取率较高 橙皮甙的碱液提取主要是利用其所含的两个酚羟基在碱性条件下 与溶液中的阳离 子反应生成盐而溶出 然后酸化 冷却 使其从溶液中析出 碱液主要是稀氢氧化钠和 石灰水 氢氧化钠水溶液的浸出能力高 但杂质较多不利于纯化 石灰水可以使一些鞣 质或水溶性杂质沉淀生成钙盐沉淀 有利于浸液纯化 但是浸出量不如氢氧化钠水溶液 好 橙皮甙的检测方法有库伦滴定法 HPLC 法 TLCS 法 毛细管电泳 紫外分光光度 法 其中紫外分光光度法是一种简易 灵敏度高的橙皮甙含量测定方法 测定省时省力 高效 8 4 4 实验设备实验设备 4 14 1 仪器仪器 电子天平 pH计 真空泵 紫外 可见分光光度计 电磁炉 布氏漏斗 量 筒 100ml 1000ml 铁架台 漏斗 滤纸 玻璃棒 容量瓶 10ml 4个 50ml 12 3 个 100ml 500ml 烧杯 100ml 2个 1000ml 2个 4 24 2 试剂试剂 DMF溶液 冰醋酸 Ca OH 2 盐酸溶液 乙醇 NaOH 所用试剂均为分析纯 4 34 3 材料材料 购于两个不同药店的陈皮样品 5 5 实验材料及试剂实验材料及试剂 5 15 1 试剂的配制试剂的配制 5 1 15 1 1 Ca OH Ca OH 2 2溶液的配制溶液的配制 分别称取 Ca OH 2固体 3 50g 于两个 1000ml 的大烧杯中 并分别溶解于 500ml 水中 搅匀备用 5 1 25 1 2 1 NaOH1 NaOH 的的 70 70 乙醇液乙醇液 准确称取 NaOH 固体 1 00g 量取 74ml 的 95 乙醇溶液 或 70ml 分析纯标准的乙醇溶液 定容至 100ml 5 1 35 1 3 0 1 NaOH0 1 NaOH 的的 70 70 乙醇液乙醇液 准确称取 NaOH 固体 0 50g 量取 370ml 的 95 乙醇溶液 或 350ml 分析纯标准的乙醇溶液 定容至 500ml 5 25 2 材料的处理材料的处理 陈皮样品置于烘箱 60 烘至恒重 用食品粉碎机粉碎 60 目过筛 然后保存备用 6 6 实验操作步骤实验操作步骤 6 16 1 橙皮甙的粗提橙皮甙的粗提 取两个样品各 50g 室温下分别加入至 500mlCa OH 2 7g L 水溶液 Ca OH 2调 pH 12 0 静置 2h 抽滤取滤液 用盐酸溶液调节 pH 5 0 静置 15h 过夜 抽滤取沉淀 干燥 6 26 2 橙皮甙的精提橙皮甙的精提 取粗品橙皮甙 加入 10 倍的 DMF 溶液溶解 过滤 加入 20 倍的含 醋酸的沸水 醋酸 水 2 5 100 冷却沉淀 过滤 干燥称重 即得橙皮甙纯品 6 36 3 橙皮甙的检测橙皮甙的检测 6 3 16 3 1 橙皮甙标准液的制备橙皮甙标准液的制备 准确称取橙皮甙标准品0 0250g 置于50ml容量瓶中 用 1 NaOH的70 乙醇液10ml溶解后 用0 1 NaOH的70 乙醇液 以下称碱醇液 稀释至刻度 摇匀 取该溶液5ml 置于50ml容量瓶中 用碱醇液稀释至刻度 摇匀 6 3 26 3 2 空白对照液的制备空白对照液的制备 吸取1 NaOH的70 乙醇液1Oml于50ml容量瓶中 用碱醇液稀 释至刻度 摇匀 取该液5ml置于50ml容量瓶中 用碱醇液稀释至刻度 摇匀 6 3 36 3 3 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 准确吸收橙皮甙标准液2 00 4 00 6 00 8 00ml 分别置于 4个10ml容量瓶中 用碱醇液稀释至刻度 摇匀 放置1h后 用同法处理的溶剂作为空 白对照 置1cm石英池中 于波长360nm处测定吸光度 记录数据并用Excel绘制标准曲 4 20C1 50 0 025 m 50 线 拟合得出回归方程 6 3 46 3 4 样品液的制备样品液的制备 准确称取两个样品橙皮甙纯品各0 0250g 分别置于50ml容量瓶 中 用1 NaOH的70 乙醇液10ml溶解后 用碱醇液稀释至刻度 摇匀 取该溶液2 5ml 置于50ml容量瓶中 用碱醇液稀释至刻度 摇匀 每个样品重复两次 6 3 56 3 5 样品中橙皮甙含量的测定样品中橙皮甙含量的测定 在360nm波长下分别测量两个样品的吸光度 记录数 据 7 7 结果及计算结果及计算 7 17 1 数据记录数据记录 表1 标准溶液吸光度记录表 编号 吸光度 表2 样品溶液吸光度记录表 编号 11 22 吸光度 吸光度均值 浓度 产率 7 27 2 数据处理数据处理 陈皮中橙皮甙含量a 100 注 C1为利用所测吸光度数值以及回归方程求得各个样品稀释后的浓度 m为各个样品 所提橙皮甙纯品的质量 7 37 3 结果分析结果分析 若a 3 则陈皮质量合格 否则不合格 8 8 注意事项注意事项 1 在进行所需的试剂的配制时 需要对所取得试剂精确操作 2 对实验所需要的银杏叶进行烘干处理是 需要对其烘干彻底 并研磨充分 3 对实验材料进行浸提提取时 要提取充分 以防对实验结果产生影响 5 4 对分光光度计使用时 所选的波长需精确 9 9 费用预算费用预算 陈皮 15元 橙皮甙标准品 20元 合计 35元 注 未将实验药品以及水电费 仪器损耗计算入内 参参 考考 文文 献献 1 张存龙等 商品药材陈皮的质量情况 J 中药材 1997 20 4 209 210 2 微波技术提取砂糖橘皮中的橙皮甙 J 食品研究与开发 2010 31 8 60 62 3 江纪武 肖庆祥 植物药有效成分手册 M 北京 人民卫生出版社 1986 561 562 4 肖崇厚 中药化学 M 上海 上海科学技术出版社 1999 263 29