第三章-药物杂质检查.ppt

1 第三章药物的杂质检查 2011 3 2 第三章药物的杂质检查法 1 了解药物纯度的概念 明确药物中杂质检查的意义 2 熟悉药物中杂质的来源和杂质检查方法 3 掌握杂质检查中限量的表示方法和计算 4 掌握一般杂质与特殊杂质的定义 第三章 3 第三章药物的杂质检查法 第一节概述第二节一般杂质的检查方法第三节特殊杂质的检查方法 第三章 4 第一节概述 一 药物的纯度要求二 杂质的来源与种类三 杂质的限量检查 第三章 5 第三章 指药物纯净的程度 是反映药品质量的一项重要指标 1 评价 综合考虑药物的外观性状 理化常数 杂质检查和含量测定 综合评定药物的纯度 杂质检查是药物纯度评价的一项重要内容 1 药物的纯度 6 第三章 2 药物纯度与试剂纯度 共同点 均规定所含杂质的种类和限量 不同点 a 药物纯度 又称为药用规格 主要从用药安全 有效和对药物稳定性等方面考虑 只有合格品和不合格品 7 第三章 b 化学试剂的纯度 是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定 它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用 化学试剂 一般分为4个等级 8 9 第三章 例如 硫酸钡 BaSO4 试剂规格对可溶性钡盐不做检查 检查 氯化物 铁 灼烧失重等药用规格如存在可溶性钡盐则导致医疗事故 检查 酸溶性钡盐 重金属 砷盐等 化学试剂不能代替药品使用 10 第三章 是指药物中存在的 无治疗作用或 影响药物的稳定性和疗效 甚至 对人体健康有害的微量物质 2 药物的杂质 为保证药品质量 确保用药安全 有效 必须检查杂质 控制药物纯度 11 第三章 1 对人体有害的如 砷盐和重金属2 影响药物稳定性如 水分 青霉素钾盐 3 虽对人体无害也不影响药物稳定性 但可用于考核生产工艺和生产控制是否正常 指示性杂质 信号杂质 如 Cl SO42 12 第三章 药物中杂质的来源与种类 有针对性地制订杂质检查项目的方法和限度 二杂质来源 药物中可能存在的杂质 决定杂质检查的项目 13 第三章 二杂质来源 药物生产过程引入 药物贮存期间引入 14 第三章 二杂质来源 4 合成工艺中使用的设备 器皿可能引入重金属 以及使用溶剂 有机溶剂 1生产过程中引入 1 所用原料不纯 2 合成工艺中未反应完全的原料 合成中间体 副产物等 3 从药用植物中提取分离过程中引入 15 第三章 二杂质的来源 例 阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 16 第三章 制剂过程中可能产生新物质 二杂质的来源 17 第三章 二杂质来源与种类 1 保管不善或贮存时间过长 2 包装不当 2贮藏过程中引入 18 第三章 二杂质的来源 19 第三章 二杂质的来源 酯 内酯 酰胺 卤代烃 苷类等易发生氧化反应的结构 醚 醛 酚羟基 巯基 亚硝基 双键等 易发生水解反应的结构 20 第三章 二杂质来源 例1 麻醉乙醚在日光 空气及湿气作用下 易氧化分解为醛及有毒的过氧化物 CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO CH3CH OH O O CH OH CH3 二羟乙基过氧化物 药典规定 起封后24小时内使用 21 第三章 二杂质来源 例2 四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应 生成差向四环素 毒性高 活性低 22 第三章 二杂质的种类 按来源可分为2类 一般杂质 指在自然界中分布广泛 在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质 特殊杂质 指在该药物的生产或贮存过程中 根据药物的性质 生产方法和工艺条件 有可能引入的杂质 23 第三章 二杂质的种类 按结构可分为2类 无机杂质 Cl S2 CN As 重金属 有机杂质 中间体 副产物 分解物 异构体 残留溶剂 24 第三章 二杂质的种类 按性质可分为3类 信号杂质 指本身一般无害 但其含量多少可反映药物纯度水平 指示生产工艺是否合理 如 氯化物 硫酸盐等 有害杂质 对人体有毒害的杂质 在质量标准中严加控制 以保证用药安全 如 重金属 砷盐 氰化物 氟化物等 25 第三章 二杂质的种类 a具有立体异构体的药物 其生物活性有很大差异 如 肾上腺素为左旋体 其升压作用是右旋体的12倍 b异构体中 其顺式体与反式体的生物活性也不相同 如 VA以全反式的生物活性为最高 无效或低效杂质 26 第三章 二杂质的种类 c药物的晶型不同 其理化常数 溶解性稳定性 体内的吸收和疗效也有差异 如 驱虫药甲苯咪唑 有A B C三种晶型 其中C晶型的驱虫率90 B晶型的驱虫率40 60 A晶型的驱虫率小于20 27 第三章 二杂质的种类 必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性的影响 控制药物中低效 无效以及具有毒性的异构体和多晶型 在药物纯度研究中日益受到重视 28 第三章 1杂质限量 在不影响药物疗效 稳定性及不发生毒性的前提下 药物中所含杂质的最大允许量 称为杂质限量 三杂质限量检查 百分表示 百万分表示 ppm 限量表示方法 29 第三章 三杂质限量检查 2杂质检查方法 限量检查法limittest 不要求测定具体的量 只检查是否超过限量 30 操作 平行试验 比较两比色管的颜色或浊度 判断杂质限量是否符合规定 管2 对照管 管1 样品管 第三章 取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶液 与一定量供试品配成的供试品溶液在相同条件下处理 比较反应结果 判断供试液中所含杂质限度是否符合规定 标准对照法 平行原则 31 在供试品溶液中加入试剂 在试验条件下反应 不得出现正反应 既以检测条件下反应灵敏度控制杂质限量 第三章 如 蒸馏水中氯化物的检查 5滴1mL 0 2mg 50mL 4 g mL 灵敏度法 32 取一定量供试品 在规定条件下测定待检杂质吸光度 与规定限量比较 判断供试品中杂质限量 第三章 比较法 33 例 肾上腺素中肾上腺酮的检查 第三章 比较法 规定 A310nm 0 05 34 写成 4限量计算公式 三杂质的限量检查 第三章 35 若用ppm表示杂质限量则 注意 单位是否统一 供试品是否有稀释 表示方法 或ppm 第三章 36 例1 对乙酰氨基酚中氯化钠的检查 对照品溶液 标准NaCl溶液 10 gCl ml 方法 取5 0ml 同法操作比较 浊度不得更大 计算 氯化物限量是多少 第三章 37 规定 含重金属 百万分之五 5ppm 计算 应取标准铅溶液 10 gPb ml 多少ml 例2 葡萄糖中重金属的检查方法 第三章 38 例3 溴化钠中砷盐检查 第三章 方法 中国药典规定 取标准砷溶液2 0mL 每1mL相当于1 g砷 制备砷斑规定 含砷量不得超过4ppm计算 应取供试品量 g 39 检查某药物中的砷盐 取标准砷溶液2ml 每1ml相当于1 g的As 制备标准砷斑 砷盐限量为0 0001 应取供试品的量为A 0 20gB 2 0gC 0 020gD 1 0gE 0 10g 40 检查维生素C中的重金属时 若取样量为1 0g 要求含重金属不得过百万分之十 问应吸取标准铅溶液 每1ml 0 01mg的Pb 多少ml A 0 2mlB 0 4mlC 2mlD 1mlE 20ml 41 作业 1 简述药物中杂质的来源及分类 2 高锰酸钾中氯化物的检查 取本品2 0g 加热水60ml溶解后 置水浴上加热 在不断搅拌下滴加乙醇适量 约8ml 移入100ml量瓶中 加水置刻度 摇匀 过滤 分取滤液25ml 依法检查 与标准氯化钠溶液5 0ml 每1ml相当于10 g的Cl 制成的对照液比较 不得更浓 1 解释划线部分的意义 2 计算高锰酸钾中氯化物的限量 3 阿司匹林中重金属的检查 取本品1 0g 加乙醇23ml溶解后 加醋酸盐缓冲液2ml 依法检查 含重金属不得过百万分之十 问应取标准铅溶液多少ml 每1ml相当于10 g的Pb 4 按药典砷盐检查法第一法检查葡萄糖酸钙中的砷盐时 取每1ml含砷1 g的标准砷溶液2ml 制备标准砷斑 规定含砷量不得过0 0002 问应取供试品多少克 42 简述中国药典铁盐检查的原理及过硫酸铵的作用 铁盐检查时 若样品有色 怎么办 第三章 专题小结 43 一般杂质检查 氯化物检查 重点 硫酸盐检查铁盐检查 重点 重金属检查 重点 第三章 44 一氯化物检查法 1 原理利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应 生成氯化银白色浑浊液 与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较 浊度不得更大 Cl Ag H AgCl 第三章 45 2 操作方法 对照法 样品管 对照管 第三章 葡萄糖中氯化物检查 1 0mL 用水稀释至50mL 6 0mL 0 60g 0 010 浓度 10 gCl ml 一氯化物检查法 46 一氯化物检查法 3 结果观察方法暗处放置5min 避免AgCl分解 第三章 47 4 注意事项及讨论 一氯化物检查法 平行试验 加稀硝酸的目的 氯化物的最适检测浓度范围 稀释到40ml后加硝酸银试液的目的 供试品溶液不澄清处理方法 供试品溶液有色时的处理方法 供试品溶液显碱性的处理方法 干扰物的排除 有机药物中氯化物的检查 第三章 48 一氯化物检查法 为了保证样品管与对照管的反应条件一致 要求样品管与对照管要平行操作 平行试验 第三章 平行试验 49 加稀硝酸的目的 一氯化物检查法 加速氯化银混浊的生成 产生较好的乳浊 避免产生碳酸银 氧化银 磷酸银沉淀 50ml供试液含稀硝酸10ml为宜 过多会增大氯化银的溶解度 使浊度降低 第三章 50 一氯化物检查法 氯化物的最适检测浓度范围 50ml供试液中含0 05 0 08mg的Cl 相当于标准氯化钠溶液 10 gCl ml 5 0 8 0ml时 所显浑浊梯度明显 根据限量取用适宜的供试品量 使氯化物的浓度在适宜的范围内 第三章 51 稀释到40ml后加硝酸银试液的目的 一氯化物检查法 使产生的AgCl浑浊均匀 硝酸银加得过早 由于氯化物浓度过大而产生AgCl沉淀而影响比浊 第三章 52 供试品溶液不澄清处理方法 一氯化物检查法 供试品溶解后溶液不澄清 应过滤 过滤时的滤纸要先用含硝酸的水溶液 1 100 洗涤 除去滤纸中含有的氯化物 第三章 53 供试品溶液有色时的处理方法 a 内消色法如枸橼酸铁铵中氯化物的检查 第三章 54 向供试品溶液中加入某种试剂 使溶液颜色褪去后再依法检查 一氯化物检查法 例 高锰酸钾中氯化物的检查因溶液呈紫色 加入适量乙醇 使颜色消失后再检查 第三章 b 外消色法 55 供试品溶液显碱性的处理方法 一氯化物检查法 先中和为中性后再检查 避免硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银 第三章 56 a 碘化物中氯化物的检查 第三章 干扰物的排除 57 b 碘中氯化物的检查 反应原理 根据氨中溶解度不同AgCl 溶解 AgBr 微溶 AgI 不溶 第三章 58 Cl 的氧化电位高 1 35 不能被氧化为Cl2Br 的氧化电位低 1 08 c 溴化物中氯化物的检查 第三章 59 一氯化物检查法 有机药物中氯化物的检查 第三章 a溶于水的有机药物 直接检查 b不溶于水的有机药物 60 d杂质中卤素原子连接于苯环上 先进行有机破坏 使分解后再检查 第三章 氧瓶燃烧进行样品处理 61 硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色浑浊 与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件与生成的浑浊比较 浊度不得更大 SO42 Ba2 BaSO4 第三章 1 原理 二硫酸盐检查法 62 平行试验 加盐酸的目的硫酸盐的最适检测浓度范围标准硫酸钾加入量 氯化钡浓度 供试品溶液不澄清处理方法 供试品溶液有色时的处理方法等自习 第三章 2 注意事项及讨论 二硫酸盐检查法 63 三铁盐检查法 二 巯基醋酸法BP法 一 硫氰酸盐法中国药典和USP法 第三章 64 三铁盐检查法 第一法硫氰酸盐法 1 原理铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配离子 与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较 第三章 65 三铁盐检查法 第三章 2 操作 66 第三章 67 第三章 1 用FeNH4 SO4 2 12H2O 硫酸铁铵 配制标准铁贮备液 加入硫酸防止Fe3 的水解 标准铁溶液临用前稀释而成 标准铁溶液10 gFe3 ml 50ml溶液中含10 50 g的Fe3 显色梯度明显 一般取标准铁溶液1 0 5 0ml 硫氰酸盐法 3 测定条件 68 第三章 硫氰酸盐法 3 测定条件 2 反应需在盐酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜 防止Fe3 水解 避免弱酸 碳酸盐 磷酸盐 干扰 69 第三章 硫氰酸盐法 3 测定条件 3 试剂 硫氰酸铵 加过量硫氰酸铵 使反应向正反应方向进行 提高反应灵敏度 70 第三章 硫氰酸盐法 3 测定条件 4 加过硫酸铵的目的可氧化Fe2 为Fe3 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 也可加硝酸氧化Fe2 为Fe3 但多余的硝酸必需加热除去 因硝酸中含有亚硝酸 能与硫氰酸根生成红色亚硝酰硫氰化物 影响比色 71 第三章 硫氰酸盐法 3 测定条件 5 比色方法 同置于白色背景上 自上向下观察 72 第三章 硫氰酸盐法 4 干扰与排除 1 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时 可用正丁醇提取后 分取正丁醇层比色 2 具环状结构的有机药物 需经700 800 炽灼破坏处理后再依法检查 73 第三章 硫氰酸盐法 4 干扰与排除 3 干扰离子的影响硫氰酸根能与许多金属离子 如汞 银 铜 产生有色配位化合物 某些阴离子与Fe3 反应增加酸度增加硫氰酸铵的量正丁醇提取后比色亚硝酸根加热排除等 74 二 巯基醋酸法BP 1998 对照法 本法灵敏度较高 但试剂较贵 75 示例 硫酸镁中铁盐检查 硫酸镁在生产时用的原料为自然界的苦土粉 所含杂质较多 虽经调节pH值 重结晶 洗涤等 成品中仍可带入微量的铁盐 需检查 方法 取本品2g 加硝酸溶液 1 10 50ml 煮沸1min 放冷 加水稀释成35ml 依法检查药典 2000年版 附录 G 与标准铁溶液3 0ml用同法制成的对照液比较 不得更深 0 0015 76 四重金属检查法 重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属 如 Ag Pb Hg Cu Cd Bi Sb Sn As Ni Co Zn等 重金属存在影响药物的稳定性及安全性 铅易在体内积蓄中毒 以Pb为代表 第三章 1 重金属的概念 77 四重金属检查法 第二法 炽灼后检查法适用于含芳环 杂环以及不溶于水 稀酸及乙醇的有机药物 第一法 硫代乙酰胺法适用于溶于水 稀酸 乙醇的药物 是最常用的方法 第三章 78 四重金属检查法 第三法 硫化钠法适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物 巴比妥类 磺胺类 第四法 微孔滤膜法 适用于重金属限量低 2 5 g 药物 第三章 79 四重金属检查法 适用于溶于水 稀酸和乙醇的药物 第三章 第一法硫代乙酰胺法 80 四重金属检查法 硫代乙酰胺在弱酸性 pH3 5醋酸盐缓冲液 条件下水解 产生H2S 与微量重金属离子 以Pb2 为代表 生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液 与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较 不得更深 第三章 1原理 81 2操作方法 样品管 对照管 82 第三章 结果观察 83 四重金属检查法 标准铅溶液浓度 硫代乙酰胺试液 溶液的pH 供试品溶液有颜色时的处理 干扰物的排除方法 第三章 3 讨论 84 四重金属检查法 标准铅溶液浓度 适宜目视比色的浓度范围Pb2 标准溶液10 g ml1 2ml 第三章 85 四重金属检查法 硫代乙酰胺试液 H2S试液 恶臭和毒性 不稳定 易被空气氧化而析出硫 浓度难以控制 第三章 改用硫代乙酰胺为显色剂 95版药典 硫代乙酰胺在实验条件下水解产生H2S 与重金属离子反应 86 四重金属检查法 pH在3 0 3 5时 呈色较完全 酸度增大 呈色变浅甚至不呈色 第三章 溶液的pH对于金属离子与硫化氢呈色影响较大 溶液的pH 87 四重金属检查法 供试品溶液有颜色时的处理 第三章 a 外消色法b 内消色法 88 四重金属检查法 a 外消色法 稀焦糖溶液调节 指示剂调节 第三章 89 第三章 90 四重金属检查法 干扰物的排除方法 干扰 弱酸性溶液中Fe3 氧化H2S析出S 产生混浊影响检查 a 供试品中微量高价Fe3 存在 第三章 如 葡萄糖酸亚铁中重金属的检查 排除 加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3 还原为Fe2 91 b 供试品为铁盐 大量的Fe3 Fe3 在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醚提取Fe3 HCl HFeCl6 2 黄色 水层加氨试液调至碱性 残存的Fe3 可用KCN掩蔽 按第三法检查 如 枸橼酸铁铵的重金属检查 第三章 四重金属检查法 92 四重金属检查法 c 药物本身能生成不溶性硫化物 加入掩蔽剂消除干扰 加掩蔽剂KCN 使锑 锌形成稳定的配位化合物后 用第三法检查 第三章 如 葡萄糖酸锑钠中重金属的检查 93 四重金属检查法 1 原理供试品先炽灼破坏后 使有机结合的重金属游离 再按第一法检查 第三章 第二法灼烧后检查 适用于含芳环 杂环以及不溶于水 稀酸 乙醇的有机药物 94 四重金属检查法 2 操作 第三章 缓缓炽灼放冷H2SO40 5 1 0ml供试品炭化加热HNO3500 600 H2SO4除尽放冷完全灰化蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法检查蒸干氨试液注意 做空白试验 95 四重金属检查法 a HNO3处理后 必须蒸干除尽NO 第三章 3 讨论 b 炽灼温度严格控制 500 600 c 含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 玛瑙 蒸发皿 如 盐酸氟奋乃静中重金属检查 96 四重金属检查法 1 原理在碱性介质中 以Na2S为显色剂 使Pb2 与S2 作用生成PbS的混悬液 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较 不得更深 第三章 第三法硫化钠法 97 四重金属检查法 适用于难溶于稀酸但能溶解于碱性溶液的药物中重金属的检查 如 磺胺类与巴比妥类药物 第三章 98 四重金属检查法 2 方法 取供试品适量 加NaOH试液5ml和水20ml使溶解后 置纳氏比色管中 加Na2S试液5滴 摇匀 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较 第三章 99 四重金属检查法 3 讨论 Na2S对玻璃有腐蚀性 久置产生絮状物 应临用新配 第三章 100 四重金属检查法 第四法微孔滤膜法 当重金属含量低 2 5 g 时 在比色管中难于目视观察 采用本法 第三章 101 四重金属检查法 1 原理 第三章 同第一法使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上 铅斑 提高检查的灵敏度 102 作业 1 氯化物检查法的原理是什么 若样品有色 怎么办 2 中国药典收载的重金属检查共有几法 各适用于何种情况下 显色剂及条件各是什么 苯巴比妥进行重金属检查时应用第几法 103 二 Ag DDC法 一 古蔡氏法 三 白田道夫法 四 奇列氏法 次磷酸法 第三章 五砷盐检查法 104 第三章 五砷盐检查法 一 古蔡氏法 Gutzeit 1 原理金属锌与酸作用产生新生态的氢与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢 遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑 与同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较 判断砷盐的含量 105 反应式如下 第三章 106 第三章 C 五砷盐检查法 107 2操作 加锌粒2g 立即将装妥的导气管B密塞与A瓶 置25 40 水浴中 反应45分钟 取出溴化汞试纸 比较砷斑 第三章 导气管B中装入醋酸铅棉球 再于旋塞C的平面上放一片溴化汞试纸 样品 对照品分别置于检砷瓶中 加盐酸5ml与水21ml 再加2 5 碘化钾试液5ml与0 3 酸性氯化亚锡试液5滴 在室温放置10分钟 108 3 讨论 1 试剂的作用 a KI的作用 还原剂 As5 As3 五价砷生成AsH3的反应速度比三价砷速度慢 加入KI使五价砷还原为三价砷后再与活泼氢反应 以增大AsH3的生成速度 第三章 五砷盐检查法 109 第三章 五砷盐检查法 还原剂 表现在3方面 将五价砷还原为三价砷 As5 As3 b 酸性SnCl2的作用 110 第三章 进而促进AsH3不断生成 稳定的络离子 将KI被氧化生成的I2再还原为I 111 第三章 五砷盐检查法 SnCl2与Zn粒表面形成Zn Sn齐 起去极化作用 使氢气均匀而连续地发生 112 第三章 五砷盐检查法 c PbAc2棉花的作用 排除硫化物的干扰 1mgS2 113 第三章 五砷盐检查法 d HgBr2试纸的作用 HgBr2试纸与AsH3作用生成砷斑 114 2 反应最佳条件 a Zn粒的大小及用量大小 能通过1号筛 850 2000 m 用量 约2g b 标准砷溶液2ml 1 g ml 第三章 五砷盐检查法 115 a 供试品是硫化物 亚硫酸盐 硫代硫酸盐 排除方法 加入浓硝酸处理 第三章 3 干扰物的排除 五砷盐检查法 116 Fe3 能消耗还原剂 KI SnCl2 并能氧化砷化氢 排除方法 先加酸性SnCl2试液使Fe3 Fe2 第三章 五砷盐检查法 b 供试品是铁盐 Fe3 117 c 共价键结合的砷化物 排除方法 进行有机破坏 酸破坏法或碱破坏法 第三章 五砷盐检查法 118 碱破坏法a加入氢氧化钙500 600 C灼烧例 酚磺酞b加入无水碳酸钠碱融例 苯甲酸钠 第三章 五砷盐检查法 酸破坏法加稀硫酸与溴化钾例 葡萄糖中砷盐检查 119 4 古蔡氏法特点 第三章 五砷盐检查法 120 二 二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag DDC法 silverdiethyldithiocarbamate 第三章 本法不仅用于砷盐的限量检查 而且可用作微量砷盐的含量测定 121 第三章 1 原理 122 2 Ag DDC法的特点 a灵敏度高0 5 gAs 30mlb可仪器测定 还可定量cSb干扰小 第三章 五砷盐检查法 123 第三章 五砷盐检查法 三 白田道夫法 对含锑药物中砷盐的检查不能用古蔡氏法 需用白田道夫法 124 第三章 五砷盐检查法 1 原理 125 2 白田道夫法的特点 优点 不受Sb干扰 缺点 灵敏度低 20 gAs2O3 10ml加入少量HgCl2 灵敏度提高至2 gAs2O3 1 5 gAs 10ml 第三章 五砷盐检查法 126 第三章 五砷盐检查法 四 奇列氏法 次磷酸法 127 2 特点 不受S2 SO32 Sb干扰 灵敏度较古蔡氏法低 第三章 五砷盐检查法 128 六溶液颜色检查法 第三章 控制药物中有色杂质的含量 有色杂质来源 生产中引入 贮藏过程产生 检查原理 1 用规定色号标准比色液与供试液比较 2 在规定波长处测A 129 与标准比色液比较 全波长范围定性测定 样品管加水10ml溶解 标准比色液10ml观察方法 白色背景上颜色较深时平视颜色较浅时从上向下 第三章 一 目视比色法 130 第三章 标准比色液的配制 131 第三章 各种色调标准贮备溶液的配制表 132 第三章 各种色调色号标准比色液的配制表 133 单一波长定量测定供试品加水溶解 必要时可过滤 于规定波长处测A 不得超过规定 第三章 二 分光光度法 134 是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值 对其颜色进行定量表达和分析的方法 第三章 三 色差计法 135 三刺激值 在给定的三色系统中与待测色达到色匹配所需要的三个原刺激量 自然界中每种颜色都是由红 绿 蓝三原色按适当比例混合而成 此混合比例的量为三个原刺激量 第三章 三 色差计法 136 模拟人眼的视觉系统 把光谱光度数据通过积分形式转化为数字表达式 从而计算出对比色的色差 第三章 色差计的原理 特点 定量测定颜色和色差 精确度高 比目测法更科学客观 不随时间 地点 人员变化而变化 137 七易炭化物检查法 检查药物中遇硫酸易炭化或易被氧化而呈色的微量有机杂质 方法 硫酸与供试品液缓慢混合溶解 与对照液比色对照液 3种影响因素较多 严格按操作规定进行 第三章 138 八溶液澄清度检查法 检查药物中微量的不溶性杂质 例 注射用原料1 方法 在室温条件下 供试品溶液与浊度标准液比较 第三章 139 2 浊度标准液的配制 乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛 与肼缩合成甲醛腙白色混浊 浊度标准贮备液浊度标准原液浊度标准液 5个级号0 5 1 2 3 4号 第三章 140 3 判断 澄清 指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂或未超过0 5号浊度标准液 浊度级别 澄清 轻微浑浊 微浑浊 浑浊 重度浑浊 第三章 141 4 溶剂 根据供试品性质选择溶剂 水 酸 碱 有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用 新沸过的冷水 排除CO2的干扰 第三章 142 5 浊度标准液的影响因素 a 温度25 1 b 放置时间硫酸肼溶液应放置4 6h 否则浊度不稳定 c 带乳色供试品不能用本法 应改用标准氯化钠与硝酸银产生的浑浊度比较 第三章 143 九炽灼残渣检查法 炽灼残渣 有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后 高温炽灼 所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐 本检查用于控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质 第三章 144 九炽灼残渣检查法 方法 样品炭化后 硫酸湿润 700 800 炽灼至恒重限量0 1 0 2 一般使炽灼残渣量在1 2mg 第三章 145 十干燥失重 第三章 146 十干燥失重 中国药典采用的测定法常压干燥法干燥剂干燥法减压干燥法热分析法 第三章 147 将供试品置烘箱中 在规定温度下干燥至恒重 适用于受热较稳定的药物 干燥温度 105 2 4h扁称量瓶 厚度5mm 第三章 一 常压恒温干燥法 148 1 有的药物水分105 不易除去 可提高温度 如氯化钠130 2 药物熔点低 表面结成膜水分不易挥发 先低温 如葡萄糖先80 再105 烘到恒重 3 易砐湿 受热相变不易恒重的 可采用一定温度下干燥一定时间所减失的重量代表干燥失重 不用恒重 第三章 149 适用于受热易分解或易于挥发的药物 亚硝酸钠 消心痛干燥剂 P2O5 硫酸 硅胶变色硅胶 加氯化钴 第三章 二 干燥剂干燥法 150 适用于受热不稳定及较难赶除水分的药物 如硫酸长春新碱压力应在2 67kPa 第三章 三 减压干燥法 151 在程序控制温度的情况下 测定物质的物理 化学变化与温度关系的一类仪器分析方法 一 热重分析法 二 差示热分析法 三 差示扫描量热法 第三章 十干燥失重 四 热分析法 152 测量物质的质量随温度变化的热分析技术 可计算出样品在相应温度范围内减失质量的百分率 第三章 一 热重分析法 thermogravimetric TGA 153 c 测定速度快 第三章 TGA的特点 分析样品少 适用于贵重药材或在空气中容易氧化药物干燥失重测定 d 可用于判断结晶水或吸附水 并推断结晶水含量 b 灵敏度高 可达1 g以下 154 第三章 供试品TGA热重曲线 W W 1测定曲线上平台之间的质量差值计算出样品相应温度范围内减失质量的百分率 结晶水失重台阶 2可用于药物结晶水与吸附水的区分 155 测量供试品和惰性参比物 常用石英砂 煅制MgO 之间的温度差与温度 或时间 关系的热分析技术 第三章 二 差示热分析法 differentialthermalanalysis DTA 156 第三章 供试品发生放热反应温度高于参比物质从而产生放热峰 供试品发生吸热反应温度低于参比物质从而产生吸热峰 差示热分析法 DTA 曲线 157 DTA用途 1 熔点测定 熔程 T T 0 第三章 158 DTA用途 2 定性和纯度检定 根据峰的数目 形状 位置对供试品进行纯度判别 T 0 T 第三章 供试品 对照品 159 测量保持供试品和惰性参比物的温度相同 系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度 或时间 变化的热分析技术 第三章 三 差示扫描量热法 differentialscanningcalorimetry DSC 160 97 2 98 6 标准品 不同纯度苯甲酸的DSC曲线 第三章 DSC用途 熔点测定 晶型鉴别和纯度测定 峰在横轴上位置 形状 数目与物质的性质有关 161 检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂的方法 如 苯 甲苯 氯仿 环氧乙烷等 ChP采用GC法 第三章 十一有机溶剂残留量 162 色谱条件固定相 GDX二乙烯苯 乙基乙烯苯高分子多孔小球流动相 氮气检测器 氢火焰离子化检测器柱温 80 170 第三章 十一有机溶剂残留量 163 色谱系统适应性 1 用待测物的色谱峰计算的理论塔板数应大于1000 2 用内标法测定时 内标物与待测物色谱峰的分离度应大于1 5 3 内标法RSD 5 外标法RSD 10 第三章 十一有机溶剂残留量 164 第一法溶液直接进样法供试液标准液结果判断 内标法定量A供 A内标平均值不得 A标 A内标平均值外标法A供平均值不得 A标平均值 第三章 十一有机溶剂残留量 165 第二法顶空进样法适用挥发性大的组分分析样品置顶空取样瓶 60 加热 残留溶剂挥发达饱和 进样 特点 1 免去样品箤取 浓集2 避免非挥发性组分污染3 要求待测组分有足够的挥发性 第三章 十一有机溶剂残留量 166 第三章 特殊杂质 167 第三章 特殊杂质 是指在该药物生产和储藏过程中 根据其生产方法 工艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质 阿司匹林 水杨酸盐酸普鲁卡因 对氨基苯甲酸 168 特殊杂质的检查法 二 化学性质的差异 一 物理性质的差异 第三章 三 光学性质的差异 四 色谱性质的差异 169 臭味及挥发性差异颜色差异溶解行为差异旋光性质的差异吸附或分配性质的差异对光吸收性质的差异 一物理性质差异 第三章 170 第三节特殊杂质检查 2 杂质无挥发性利用药物在室温或加热挥发后 遗留残渣于一定温度加热至恒重 其重量不得超过规定 例 乙醇中不挥发物的检查 碘片 一物理性质差异 第三章 一 嗅味及挥发性差异 1 杂质有特殊气味乙醇中的杂醇油 异臭 麻醉乙醚 171 第三节特殊杂质检查 药物自身无色生产中引入有色的有关物质或分解产物 一物理性质差异 第三章 例 磺胺嘧啶原料药颜色检查 磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物 二 颜色差异 172 第三节特殊杂质检查 根据药物与杂质溶解度的差异例 葡萄糖中糊精的检查 一物理性质差异 第三章 三 溶解行为的差异 173 第三节特殊杂质检查 1 药物有旋光度而杂质没有 例 黄体酮在乙醇中比旋度 186 198 一物理性质差异 第三章 四 旋光性质的差异 2 杂质有旋光度而药物没有 例 硫酸阿托品中莨菪碱的检查 供试品水溶液50mg mL不得过 0 4 174 1酸碱性的差异1 规定消耗滴定液的体积2 pH值法3 指示剂法例 苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查甲基橙不得显红色 第三章 二化学性质差异 175 2氧化还原性的差异例 氯化物中碘化物检查供试品与含亚硝酸钠的淀粉指示剂不得显蓝Cl 的氧化电位高 1 35 不能被氧化为Cl2 I 的氧化电位低 0 53 能被氧化为I2蒸馏水中易氧化物检查 加高锰酸钾溶液 在一定时间内红色不得消退 第三章 二化学性质差异 176 3杂质与一定试剂反应产生沉淀间苯二酚中邻苯二酚检查 4杂质与一定试剂反应产生颜色阿司匹林中游离水杨酸的测定 5杂质与一定试剂反应产生气体盐酸乙基吗啡中胺盐检查 第三章 二化学性质差异 177 二化学性质差异 例1 阿司匹林中游离水杨酸的检查 杂质来源 a 生产过程中反应不完全 b 贮存过程中阿司匹林水解 第三章 178 紫堇色 有酚羟基 检查原理 阿司匹林 Fe3 无酚羟基 水杨酸 Fe3 第三章 179 例2 对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 杂质来源生产中引入 反应不完全 贮存中样品脱羧 第三章 180 第三章 检查原理与方法对氨基水杨酸钠 乙醚中不溶间氨基酚 乙醚中溶解采用双相滴定法测定 控制间氨基酚的限量 181 色谱法 一 薄层色谱法 TLC 二 高效液相色谱法 HPLC 三 气相色谱法 GC 三色谱行为差异 第三章 p54 182 根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同 Rf值的差异 加以分离和检查 三色谱行为差异 第三章 一 薄层色谱法 TLC Thinlayerchromatography 183 三色谱行为差异 第三章 本法灵敏 简便 快速 不需特殊的设备 费用低 分离和鉴定同步进行 1 TLC法特点 184 三色谱行为差异 我国药典2000年版一部458个中成药品种中薄层色谱鉴别方法341种 高达75 第三章 185 2 薄层色谱法应用1 杂质对照品法 适用于杂质已知并有杂质对照品的情况 方法根据杂质限量 取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液 分别点于同一薄层板上展开 定位后进行检查 第三章 三色谱行为差异 186 第三章 三色谱行为差异 适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况 2 供试品自身对照法 187 例 氢化可的松中 其他甾体 检查供试液 3mg ml对照液 60 g ml 供试液稀释50倍 判断 供试液的杂质斑点数 3个 且供试液的杂质斑点颜色 对照液主斑点颜色 第三章 188 选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为对照品 3 标准药物对照法 第三章 三色谱行为差异 189 根据供试品与杂质的对照品保留时间相同测定各杂质峰面积 第三章 三色谱行为差异 二 高效液相色谱法 HPLC Highperformanceliquidchromatography 特点分离效能高 应用范围广 能准确 快速 分离分析同时进行 190 1 峰面积归一化法2 不加校正因子的主成分自身对照法3 加校正因子的主成分自身对照法4 加校正因子的内标法5 外标法 第三章 三色谱行为差异 191 三 气相色谱法 GC Gaschromatography 检查方法 同高效液相色谱法 用于药物中挥发性杂质的检查 如药物中残留溶剂 农药残留量等 第三章 三色谱行为差异 192 一 紫外分光光度法 二 原子吸收分光光度法 三 红外分光光度法 四 荧光分析法 第三章 四光谱行为差异 光谱法 193 肾上腺素 肾上腺酮 紫外分光光度法 利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行 四光谱行为差异 例1 肾上腺素中肾上腺酮的检查 第三章 194 例 肾上腺素中肾上腺酮的检查 第三章 195 规定 A310nm 0 05 2 方法 第三章 3 限量计算肾上腺酮的 196 作业 1 简述古蔡氏法检砷的原理及试剂酸性氯化亚锡 碘化钾 醋酸铅棉花的作用 2 中国药典干燥失重测定法共收载几法 各适用于何种情况 3 简述残留溶剂测定法的意义 中国要点残留溶剂共分几类 测定法共有几法 各适用于何种情况 197 第三章药物的杂质检查 第三章 1 药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列三种类型 2 药物中存在的杂质 主要来源于两个方面 即和 3 药物中微量的氯化物在酸性条件下与反应 生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊 与一定量的标准氯化钠溶液 浓度为 在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较 判断供试品中氯化物是否符合限量规定 4 肾上腺素中肾上腺酮的检查 称取肾上腺素0 250g 置于25mL量瓶中 加0 05mol L盐酸液至刻度 量取5mL置另一25mL量瓶中 用0 05mol L盐酸液稀释至刻度 用此液照分光光度法 在310nm处测定吸收度 不得大于0 05 问肾上腺素的限量是多少 以百分表示 肾上腺素Ecm1 453 198 第三章药物的杂质检查 第三章 5 胃复康中检查二苯羟基乙酸的方法如下 取本品0 5g 酸性下用乙醚提取后蒸干 残渣用无水乙醇10mL溶解后 在258nm波长处测定吸收度 不得超过0 02 求胃复康中二苯羟基乙酸的限量 以百分表示 二苯羟基乙酸在258nm波长处的E1 cm 19 7 6 溴化钠中硫酸盐检查法如下 称取溴化钠0 5g 置50mL纳氏比色管中 加水使成约40mL 加稀盐酸2mL 加入25 氯化钡溶液5mL 用水稀释至刻度 精密吸取硫酸钾标准溶液 100 gSO42 mL 2 0mL 依法检查 求溴化钠中的硫酸盐的限量为百分之