中药化学-3.糖和苷.ppt

第3章糖和苷类化合物 一 概述糖类又称作碳水化合物 carbohydrates 是植物光合作用的初生产物 除了作为植物的贮藏养料和骨架成分外 还是天然产物生物合成的前体 第1节糖类化合物 糖类及其衍生物在自然界广泛存在 在植物中占其干重的80 90 和核酸 蛋白质 脂质一起合称为生命活动所必需的四大类化合物 糖 saccharides 是多羟基醛或酮及其衍生物 聚合物的总称 通式为Cx H2O y 所有生物均含糖及其衍生物 二 糖的结构和分类按能否水解和分子量大小分为 单糖 monosaccharides 不能再被水解 最小单位 低聚糖 oligosaccharides 2 9个单糖聚合而成 多糖 polysaccharides 10个以上单糖聚合而成 植物多糖 菌类多糖 动物多糖 Fischer式 Haworth式 单糖结构表示方法 一 单糖单糖是多羟基醛或酮类化合物 已发现200多种 天然单糖以五碳糖 六碳糖最多 多数在生物体内呈结合状态 只有葡萄糖 果糖等少数单糖游离存在 一 五碳醛糖 aldopentose L 阿拉伯糖 L arabinose Ara D 核糖 D ribose Rib D 木糖 D xylose Xyl 二 甲基五碳醛糖 L 鼠李糖 L rhamaose Rha L 夫糖 L fucose 三 六碳醛糖 aldohexoses D 葡萄糖 D glucose Glc D 甘露糖 D mannose Man D 半乳糖 D allose All D 果糖 D fructose Fru L 山梨糖 L sorbose 四 六碳酮糖 ketohexose hexulose 五 六碳糖醛酸 uronicacid 单糖中的伯醇基被氧化成羧基的化合物 D 葡萄糖醛酸 D glucuronicacid D 半乳糖醛酸 D galactocuronic 六 七碳糖含有7个碳的单糖 碳霉糖 L mycarose 七 去氧糖 deoxysugars NH3 2 氨基 2 去氧 D 葡萄糖 D glucosaming 八 氨基糖 aminosugar 九 支碳链单糖 D 芹糖 D apiose L 链酶糖 L rhamaose Rha 十 糖醇单糖中的羰基被还原成羟基的化合物 D 甘露醇 D mannitol D 山梨醇 D mannitol 单糖在水溶液中形成半缩醛环状结构 即成呋喃糖和吡喃糖 五元氧环糖称为呋喃型糖 furanose 六元氧环糖称为吡喃型糖 pyranose D Glc D Glc D 葡萄糖的Fischer式与Haworth式之间的转变 Fischer式 距离羰基最远的手性碳原子上的羟基在右侧的称为D型糖 在左侧的称为L型糖 D 葡萄糖 L 鼠李糖 糖的绝对构型 D L Haworth式五碳吡喃型糖 C4 OH在面下为D型糖 在面上为L 型糖 D 木糖 D xylose Xyl 甲基五碳 六碳吡喃型糖 C5 R在面下时为L 型糖 在面上为D型糖 L 鼠李糖 L rhamaose Rha D 葡萄糖 D glucose Glc 五碳呋喃型糖 C4 R在面下时为L型糖 在面上时为D 型糖 D 核糖 D ribose Rib 端基碳 anomericcarbon 单糖成环后形成了一个新的手性碳原子 该碳原子形成的一对异构体为端基差向异构体 anomer 有 两种构型 糖的相对构型 端基碳上H被称为端基H OH被称为端 OH Fischer投影式 新形成的羟基与距离羰基最远的手性碳原子上的羟基在同侧时为 构型 在异侧时为 构型 构型 构型 五碳吡喃型糖 C4 OH与端基碳上的羟基在同侧的为 型 在异侧为 型 D 木糖 D 木糖 Haworth投影式 五碳呋喃型糖 C4 R与端基羟基在同侧为 型 异侧为 型 D 核糖 D 核糖 甲基五碳 六碳吡喃型糖 C5 R与端基羟基在同侧为 构型 异侧为 构型 D 葡萄糖 D 葡萄糖 仅表示端基碳的相对构型 从糖的端基碳绝对构型来看 D和 L D和 L构型是一样的 D 糖 D 糖 L 糖 L 糖 D 糖 L 糖 D 糖 L 糖 二 低聚糖 oligosaccharides 1 按含有单糖的个数分为二糖 三糖 四糖等 2 按是否含有游离的半缩醛羟基分为还原糖和非还原糖 具有游离半缩醛羟基的糖为还原糖 由半缩醛或半缩酮上的羟基通过脱水缩合而成的聚糖没有还原性 为非还原糖 由2 9个单糖通过苷键结合而成的直链或支链聚糖 槐糖 还原糖 蔗糖 非还原糖 D Glcp 1 2 D glcp D Fruf 1 1 D Glcp 植物中的三糖大多是以蔗糖为基本结构再接上其它单糖而成的非还原性糖 四糖和五糖是三糖结构再延长 也是非还原性糖 二糖 蔗糖 三糖 棉子糖 四糖 水苏糖 五糖 毛蕊糖 由十个以上单糖通过苷键连接而成的糖称为多聚糖 三 多聚糖类 polysaccharides 3 按来源 植物多糖 动物多糖 1 按功能 不溶于水的作为动植物的支持组织的多糖 溶于水的作为动植物的贮存养料的多糖 2 按单糖组成 均多糖 homosaccharide 由同种单糖组成 和杂多糖 heterosaccharide 由多种单糖组成 分类 1 植物多糖 1 纤维素 直链葡聚糖 不易被稀酸或碱水解 2 淀粉 直链的糖淀粉 1 4连接的D 葡萄吡喃糖 聚合度300 350 可溶于热水成透明溶液 支链的胶淀粉 1 4连接的D 葡萄吡喃糖 但有1 6的分支链 平均支链长25个单位 不溶于冷水 溶于热水成粘胶状 糖淀粉遇碘显兰色 胶淀粉显紫色 淀粉在制剂中作赋形剂 工业上作生产葡萄糖的原料 3 植物树胶及粘液质 2 菌类多糖猪苓多糖 茯苓多糖 灵芝多糖 抗肿瘤3 动物多糖 1 肝素 含有硫酸酯的粘多糖 为天然抗凝血物质 预防血栓 2 甲壳素 是螃蟹 虾等动物外壳的主要成分 可作药物的载体 具有缓释优点 也可用于人造皮肤 血管 手术缝合线等 3 透明质酸 为天然保湿因子 用于化妆品 4 硫酸软骨素 硫酸软骨素A能增强脂肪酶活性 抗凝 抗血栓形成 一 概述苷是由糖或糖的衍生物与另一非糖物质 苷元 通过糖的端基碳连接而成的化合物 新生成的化学键即为苷键 苷类化合物的组成 苷元 配基 非糖的物质 常见的有黄酮 蒽醌 三萜等 苷键 将二者连接起来的化学键 可通过O N S等原子或直接通过N N键相连 糖 或其衍生物 如氨基糖 糖醛酸等 苷类 第2节苷类化合物 二 苷的结构与分类1 按苷元的结构类型 甾苷 黄酮苷2 按苷在生物体内存在的形式 原生苷 次生苷3 按连接单糖的数目 单糖苷 双糖苷4 按连接糖的链数 单糖链苷 双糖链苷5 按苷键原子分类 氧苷 硫苷 氮苷 碳苷 根据苷元成苷官能团的不同将氧苷分为以下几类 醇苷 酚苷 氰苷 酯苷 吲哚苷 1 氧苷 苷元通过氧原子与糖相连而成的苷 一 氧苷 1 醇苷 苷元上的醇羟基与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 红景天苷 甘草酸 2 酚苷 苷元上的酚羟基与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 天然药物中为数很多 如 天麻苷 3 氰苷 是一类羟基腈与糖分子的端基羟基间缩合的衍生物 具有水溶性 不宜结晶 易水解 水解生成的苷元 羟基腈很不稳定 立即分解为醛 酮 和氢氰酸 苦杏仁苷 亚麻氰苷 4 酯苷 酰苷 苷元上的羧基与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 苷键既有缩醛性质又有酯的性质 易被稀酸和稀碱水解 山慈菇苷A 5 吲哚苷 是吲哚醇羟基与糖脱水生成的苷 靛苷 菘蓝苷 苷元上的巯基与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 萝卜苷 二 硫苷 芥子苷是存在于十字花科植物中的一类硫苷 其通式如下 几乎都是以钾盐的形式存在 经其伴存的芥子酶水解 生成的芥子油含有异硫氰酸酯类 葡萄糖和硫酸盐 具有止痛和消炎作用 苷元上的氨基与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 腺苷 巴豆苷 三 氮苷 苷元碳上的氢与糖或糖的衍生物的半缩醛或半缩酮羟基脱一分子水缩合而成的化合物 异牡荆素 芦荟苷 四 碳苷 碳苷类化合物具有溶解度小 难以水解的特点 碳苷的苷元多为黄酮 蒽醌等化合物 水溶性小 难水解 例如 牡荆素 抗肿瘤 降压 抗炎 芦荟苷 致泻 三 苷类的一般通性 1 性状 固体 小分子连糖基少的苷为结晶态 大分子连糖基多的多为无定型粉末 有吸湿性 含糖基多的苷 一般无味 有的有苦味 也有的为甜味 糖 小分子极性大 水溶性好 聚合度增高 水溶性下降 多糖难溶于冷水 或溶于热水成胶体溶液 不溶于乙醇 单糖极性 双糖极性 与羟基和碳的分担比有关 即按 OH C的分担情况而定 2 溶解性 苷 亲水性 与连接糖的数目 位置有关 一般随着糖基的增多而增大 大分子苷元 如甾醇等 的单糖苷常可溶解于低极性的有机溶剂 如果糖基增多 亲水性增加 在水中的溶解度也就增加 苷元 亲脂性 可溶于氯仿 乙醚 乙酸乙酯 醇等溶剂 因此 用不同极性的溶剂顺次提取药材时 在各提取部分都有发现苷类化合物的可能 碳苷与氧苷不同 无论在水中还是在其他溶剂中溶解度一般都较小 3 旋光性 定义 当光通过含有某物质的溶液时 使经过此物质的偏振光平面发生旋转的现象 可通过存在镜像形式的物质显示出来 这是由于物质内存在不对称碳原子或整个分子不对称的结果 由于这种不对称性 物质对偏振光平面有不同的折射率 因此表现出向左或向右的旋光性 利用旋光性可以对物质 如某些糖类 进行定性或定量分析 多数苷类化合物呈左旋 但水解后 由于生成的糖常是右旋的 因而使混合物呈右旋 因此 比较水解前后旋光性的变化 也可以用以检识苷类化合物的存在 有些二糖或多糖的分子中也都有类似的苷键 因此一定在水解产物中找到苷元 才能确认有无苷类的存在 苷结构中糖的部分表现出与糖相同的性质 可以利用糖的一些化学性质对其进行检识 4 苷的检识反应 糠醛 R H5 甲糠醛 R CH35 羟甲糠醛 R CH2OH 1 糠醛形成反应单糖在浓酸加热作用下 失去三分子水 生成具有呋喃环结构的化合物 多糖在酸存在下先水解成单糖 再行脱水生成相同的产物 一些具有活性亚甲基并有不饱和共轭系统的化合物 如苯酚 间苯二酚 萘酚 苯胺 二苯胺 联苯胺 氨基酚 蒽酮等均可与糠醛反应形成不同颜色的产物 可用作糖类和苷类的检识 糠醛与芳胺和酚类缩合的位置通常是邻 对位 糠醛衍生物 芳胺或酚类 缩合 显色 苯酚 萘酚 苯胺 蒽酮等 1 Molish试剂反应 浓硫酸和 萘酚 检查糖和苷类 糠醛与 萘酚缩合物 紫红色 样品 浓H2SO4 萘酚 紫红色环 注意 1 检识苷类要排除糖的干扰 正丁醇萃取苷类 2 碳苷和糖醛酸反应阴性 2 苯胺盐类试剂反应 与糠醛反应形成不同颜色的产物 可用作糖类和苷类的检识 5 羟甲基糠醛与二苯胺的缩合物 蓝色 1 菲林反应Fehling 红砖色沉淀 含有还原糖2 多伦反应Tollen 银镜 还原糖 具有还原性的糖在与菲林试剂和多伦试剂反应时呈阳性 而非还原糖和苷类则呈阴性 2 氧化反应 四 苷键的裂解反应 苷键的裂解反应是一类研究多糖和苷类化合物的重要反应 通过该反应 可以使苷键切断 从而更方便地了解苷元的结构 所连糖的种类和组成 苷元与糖的连接方式 糖与糖的连接方式 按照所用催化剂的不同可分为 酸催化水解 碱催化水解 酶水解和氧化裂解等 苷键的裂解方法有以几种分类方法 按裂解的程度可分为 全裂解和部分裂解 按所用的方法可分为 均相水解和双相水解 1 酸催化水解 苷键属于缩醛结构 易为稀酸催化水解 反应一般在水或稀醇溶液中进行 常用的酸有HCl H2SO4 乙酸和甲酸等 以氧苷为例 其机理为 质子化 脱苷元 互变 溶剂化 脱质子 这主要包括两个方面的因素 1 苷键原子上的电子云密度 2 苷键原子的空间环境 由上述机理可以看出 影响水解难易程度的关键因素在于苷键原子的质子化是否容易进行 有利于苷键原子质子化的因素 就可使水解容易进行 N 苷 O 苷 S 苷 C 苷 1 按苷键原子的不同 酸水解难易程度不同 其水解易难顺序为 酸水解难易程度规律 N易接受质子 最易水解 而C上无游离电子对 不能质子化 很难水解 从碱度比较也是上述顺序 2 按苷上糖的种类不同 酸水解的易难成度 1 呋喃糖苷 吡喃糖苷 2 酮糖苷 醛糖苷 因为五元呋喃环的平面性使各取代基处在重叠位置 形成水解中间体可使张力减小 故有利于水解 酮糖多为呋喃结构 而且酮糖端基碳原子上有 CH2OH大基团取代 水解反应可使张力减小 3 吡喃糖苷中 水解速度为 五碳糖苷 甲基五碳糖苷 六碳糖苷 七碳糖苷 糖醛酸苷 在吡喃糖苷中 由于C5 上取代基R会对质子进攻苷键造成一定的位阻 故取代基R越大 则越难水解 五碳糖 甲基五碳糖 六碳糖 糖醛酸 空间位阻 羧基 羟基 甲基吸电子作用 羧基 羟基 甲基 C5 4 氨基取代的糖较 OH糖难水解 OH糖又较去氧糖难水解 2 6 二去氧糖苷 2 去氧糖苷 6 去氧糖苷 2 羟基糖苷 2 氨基糖苷 由于吸电子诱导效应 使氨基和羟基均可与苷键原子争夺质子 特别是2 NH2和2 OH糖 当2位被质子化后 使端基碳原子的电子云密度降低 不利于苷键原子的质子化 故氨基糖 尤其是C 2上取代的氨基糖苷最难水解 当羟基 氨基乙酸化后 水解又变得容易了 2 氨基糖苷 6 去氧糖苷 2 去氧糖苷 2 6 二去氧糖苷 2 羟基糖苷 C6 C2 C2 C6 氨基和羟基具有吸电子诱导效应 可使端基碳原子的电子云密度降低 不利于苷键原子的质子化 且吸电子诱导效应强弱 NH3 OH CH3 H 3 按苷元的种类不同 酸水解的易难成度 1 芳香属苷 脂肪属苷 如 酚苷 萜苷 甾苷 因p 共轭作用 芳香苷元部分在苷键原子质子化时 芳环或双键对苷键原子有一定的有供电作用 而脂肪属苷元无供电结构 关于a键和e键的概念 观察环己烷的椅式构象 六个碳原子分别处于两个相互平行的平面上 即C1 C3 C5在一个平面上 C2 C4 C6在另一个平面上 两个平面互相平行 第一类的六个C H键与上述平面垂直 即与对称轴平行 叫做直立键 竖键 又叫a键 axialbonds 其中三个 C 1 C 3 C 5 方向朝上用实线表示 另外三个 C 2 C 4 C 6 方向朝下用虚线表示 第二类的六个C H键略与环平面平行 实际上形成约19 5 的角度 叫做平伏键 横键 又叫e键 equatorialbonds 其中三个键 C 1 C 3 C 5 方向朝下用虚线表示 另外三个 C 2 C 4 C 6 方向朝上用实线表示 可以将环己烷分子中十二个C H键分成两类 2 当苷元为小基团时 横键 e键 比竖键 a键 易水解 由于分子空间作用 横键 e键 所处位置易于质子化 易水解当苷元为大基团时 竖键 a键 比横键 e键 易水解 由于在分子结构中 竖键 a键 所处位置不稳定性 促使其易水解 a键 e键 3 N 苷处于共轭体系中 难水解 当N处于苷元中酰胺N或嘧啶N位置时 N 苷也难水解 由于N原子可与结构中的羰基 双键 形成共轭体系 使N上的电子云密度降低 不易于质子化 1 N 苷 O 苷 S 苷 C 苷 8 N原子为酰胺或出于嘧啶环上时 则很难水解 6 芳香苷 脂肪苷 苷键原子 糖 5 2 6 二去氧糖苷 2 去氧糖苷 6 去氧糖苷 2 羟基糖苷 2 氨基糖苷 2 呋喃糖苷 吡喃糖苷 3 酮糖苷 醛糖苷 4 五碳糖苷 甲基五碳糖苷 六碳糖苷 糖醛酸 苷元 7 苷元小 e a 苷元大 a e 水解由易到难顺序小结 通常苷键对碱稳定 不易被碱水解 但某些特殊的苷易为碱水解 易被碱水解 如 酯苷 酚苷 羰基共轭的烯醇苷和苷键 位有吸电子基团的苷 二 碱催化水解 常用的苷键水解酶 麦芽糖酶 水解 D 葡萄糖苷键转化糖酶 水解 果糖苷键纤维素酶 水解 D 葡萄糖苷键杏仁苷酶 水解 六碳醛糖苷键芥子苷酶 水解芥子苷键 S 苷键 三 酶催化水解反应 1 反应条件温和 特点 2 用酶水解苷键可以获知苷键的构型 3 可保持苷元结构不变的真正苷元 4 酶专属性高 选择性地催化水解某一构型的苷 特点 1 反应条件温和 易得到原苷元 2 可通过产物推测糖的种类 糖与糖的连接方式以及氧环大小 四 氧化裂解反应 Smith降解法 所用试剂为 过碘酸 HIO4 四氢硼钠 NaBH4 稀酸 适用范围 苷元不稳定的苷和碳苷 得到连有一个醛基的苷元 不适合 苷元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的苷 反应过程 Simth裂解反应分三步 水或稀醇溶液中 用HIO4 在室温条件下将糖氧化裂解为二元醛 将二元醛用NaBH4还原为醇 以防醛与醛进一步缩合而使水解困难 调节PH2左右 室温放置让其水解 由于这种醇的中间体具有真正的缩醛结构 比苷的环状缩醛更容易被稀酸所催化水解 氧化 还原 水解 应用于碳苷的情况 C 苷用酸 碱都难以水解 若加剧条件 会使苷元破坏 而用此法水解 则可以得到连有一个醛基的完整的苷元 第3节糖及苷的提取分离 一 糖和苷的提取 单糖为多羟基衍生物 易溶于水 难溶于低极性有机溶剂 低聚糖与单糖的物理性质类似 苷类化合物随着分子中糖基的增多 极性增大 极性低的苷元如萜醇 甾醇等单糖苷往往可溶于低极性有机溶剂 随着糖基的增多 苷元所占比例相应变小 亲水性随之增加 主要为溶剂法 水 醇 1 糖的提取根据它们对乙醇和水的溶解度不同 而采用冷热水 冷热稀醇等条件 单糖 低聚糖 水 稀醇 醇 1 易溶于冷水和乙醇 用醇温浸 除去其他物质后结晶 易溶于温水 难溶于冷水 不溶于乙醇 温水浸 加酸沉淀蛋白质 易溶于冷水不溶于乙醇 水提后 乙醇沉淀 2 3 多糖 热水提取 不包括纤维素和半纤维素 2 苷的提取 由于中药中原生苷 次生苷 苷元的存在状态和性质不同 其提取方法有较大的差别 因此 苷类的提取 首先要明确提取的目的和要求 然后根据要求进行提取 连糖基多苷类 醇或稀醇提取连糖基少苷类 CHCl3或EtOAc提取 苷类分子的极性随着糖基的增多而增大 需根据其极性大小 来选择相适应的溶剂 1 提取原生苷时 必须设法抑制或破坏酶的活性 防止酶解产生次生苷 方法是 1 采集新鲜材料 迅速加热干燥 冷冻保存等 2 用甲醇 乙醇 沸水提取 3 在药材中拌入CaCO3 并在提取过程中要避免与酸碱接触 尽可能保持中性 2 提取次生苷时 可利用发酵 酶解酸碱水解等方法处理药材 提高目标产量 3 提取苷元时 先用适当方法彻底水解苷类 酶解或酸水解 再用乙酸乙酯 氯仿 石油醚等有机溶剂提出苷元 也可先提取总苷 再水解成苷元 各种苷类分子中 由于苷元结构的不同 所连接糖的数目和种类也不一样 很难有统一的提取方法 如果用极性不同的溶剂循极性由小到大次序进行提取 则在每一提取部分 都可能有苷的存在 苷类化合物常用提取流程 二 糖和苷的分离与精制 1 糖的分离与精制 1 除蛋白 2 脱色 3 分离和纯化1 分级沉淀法2 超速离心法3 透析 超滤法4 分子筛色谱法5 纤维素柱色谱法 采用醇沉或其他溶剂所得多糖常混有较多的蛋白质 脱蛋白质的方法有 1 除蛋白 1 Sevag法 氯仿 丁醇2 三氟三氯乙烷法3 三氯醋酸法4 酶解法 2 脱色 主要是除去色素类成分 1 离子交换法2 氧化法3 金属络合物法4 吸附法 3 分离和纯化 1 分级沉淀法在糖的水溶液中 逐步加入乙醇 即逐渐增大EtOH浓度 可得到各部分的沉淀物 为使多糖稳定 多糖通常在pH 7时进行酸性多糖在pH 2 4时进行处理酸性多糖时 为防酸水解苷键 操作宜迅速 2 超速离心法分子量大小不同 在超速离心状态下 沉淀速率不同 3 透析 超滤法利用不同规格高分子膜 按分子大小 将糖进行分离 4 分子筛色谱法利用凝胶的分子筛作用 分离糖 5 纤维素柱色谱法 原理与PC相同 既有吸附色谱的性质 又有分配色谱的性质 洗脱剂 水和不同浓度乙醇的水溶液出柱先后 水溶性先出柱 与分级沉淀相反 1 溶剂法酸碱溶剂法溶剂分配法2 大孔吸附树脂法大孔吸附树脂具有吸附性 适合从水中分离低极性或非极性化合物 2 苷的分离与精制 3 柱色谱法 苷类的结构测定一般程序 1 测定各种物理常数2 确定分子式3 苷水解 糖的鉴定 苷元结构的鉴定4 糖连接位置的确定5 糖的连接顺序确定6 苷键构型的确定 第4节糖和苷的结构研究 一 物理常数的测定 二 分子式的测定 熔点 沸点 旋光度 折光率 元素分析法 质谱法 三 组成苷的苷元和糖的鉴定 1 苷元的结构鉴定 专属试剂反应 2 糖的种类确定 低聚糖 多糖的结构分析 首先要了解由哪些单糖所组成 各种单糖之间的比例如何 一般是将苷键全水解 用PC检出单糖的种类 经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比 也可用TLC或GC对单糖定性定量 1 硅胶色谱展开系统 正丁醇 醋酸 水 4 5 1上层 氯仿 甲醇 水 65 35 10下层 显色剂 硫酸 茴香醛硫酸 苯胺 邻苯二甲酸等 2 纸色谱展开系统 正丁醇 醋酸 水 4 5 1上层 正丁醇 乙醇 水 4 2 1 显色剂 苯胺 邻苯二甲酸 间苯二酚 盐酸等 3 气相色谱将糖制备成三甲基硅醚 增加其挥发性 将醛糖用NaBH4还原成多元醇 避免形成端基异构体 制成乙酰化物或三氟乙酰化物 3 苷中糖的数目的测定近年 测定苷中糖的数目大多是通过波谱测定完成的 四 苷元和糖 糖和糖之间连接位置的确定 1 化学方法将糖链全甲基化 水解 甲基化单糖的定性和定量 气相层析 甲基化单糖中游离 OH的部位就是连接位置 2 NMR法13C NMR测定 主要归属各碳信号 以确定产生苷化位移的碳 五 糖和糖之间连接顺序的确定 1 部分水解缓和水解法 将糖链水解成较小的