β-内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统(讲义-北京修改1).ppt

内酰胺类抗生素快速鉴别系统 内酰胺类抗生素的结构特点和分类 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的具体方法与步骤 内酰胺类抗生素的操作要点及注意事项 内酰胺类抗生素包含的品种较多 剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型 内酰胺类抗生素的结构特点 共性 母核含有四元 内酰胺环 结构分类 内酰胺类药物按骈合环可分为青霉素 骈合五元氢化噻唑环 头孢菌素 骈合六元氢化噻嗪环 及碳青霉烯类三类 青霉素类 头孢菌素类 碳青霉烯类 采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分 内酰胺类抗生素与其他药物 且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物 可疑的 内酰胺类抗生素 羟肟酸铁反应 假药 内酰胺类抗生素 青霉素类 头孢类 深红色 桔红色 一 呈色反应 1 羟肟酸铁反应 呈色 内酰胺类 NaOH H2NOH 羟肟酸衍生物 H Fe3 羟肟酸铁反应 H Fe3 3 红 棕 褐 开环分解 似肽键 双缩脲反应 内酰胺类 内酰胺类 碱性酒石酸铜 b 碱性酒石酸铜反应 蓝紫 碱性酒石酸铜反应 蓝紫色 内酰胺类抗生素 口服制剂 注射用粉针剂 片剂 胶囊 颗粒剂 干混悬剂 制剂分类 按辅料不同 内酰胺类抗生素 片剂 胶囊 注射用粉针剂 辅料成分简单 干扰小 制剂特点 几乎不含辅料或仅含少量助溶剂 如精氨酸 碳酸钠 颗粒剂干混悬剂 辅料含量多 成分复杂 干扰大 主药含量少 辅料成分多 头孢氨苄颗粒 规格 0 125g0 05g 香精 色素 严重干扰颜色反应结果 内酰胺类抗生素快检系统方法分类 按制剂中辅料的多少及种类分为三类 注射用粉针剂 几乎不含辅料或仅含少量助溶剂 如精氨酸 碳酸钠片剂 胶囊 辅料成分简单 干扰小颗粒剂 干混悬剂 辅料含量多 成分复杂 干扰大 注射用粉针 青霉素类 头孢菌素类 碱性酒石酸铜反应 三氯化铁反应 H 033 H 033 颜色反应鉴别 薄层色谱系统 碱性酒石酸铜反应 三氯化铁反应 H 036 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路 羟肟酸铁反应 片剂 青霉素类 头孢菌素类 羟肟酸铁反应 碱性酒石酸铜反应 三氯化铁反应 H 033 H 036 颜色反应鉴别 薄层色谱系统 碱性酒石酸铜反应 三氯化铁反应 H 033 颗粒剂 干混悬剂 碱性酒石酸铜 1 5 反应 三氯化铁反应 颜色反应鉴别 薄层色谱系统 H 034 羟肟酸铁反应 内酰胺类抗生素 青霉素类 头孢类 注射用粉针 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的具体方法与步骤 碱性酒石酸铜反应 青霉素钠氯唑西林钠苯唑西林钠 氨苄西林钠 舒巴坦钠阿莫西林钠 克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠 氯唑西林钠 阿莫西林钠 美洛西林钠 青霉素类 三氯化铁反应 氨苄西林钠 舒巴坦钠 阿莫西林钠 克拉维酸钾 氨苄西林钠 氨苄西林钠 氯唑西林钠 氨苄西林钠 舒巴坦钠阿莫西林 克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠 氯唑西林钠 TLC 阿莫西林钠 克拉维酸钾 氨苄西林钠 舒巴坦钠 氨苄西林钠 舒巴坦钠 阿莫西林钠 克拉维酸钾 氯唑西林钠苯唑西林钠 三氯化铁反应 1 醋酸反应 氯唑西林钠 苯唑西林钠 微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀 有颗粒挂壁 碱性酒石酸铜反应 头孢他啶头孢曲松钠头孢唑肟钠头孢拉定 头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠 舒巴坦钠 蓝色变墨绿色溶液 墨绿色变棕黄色 美洛培南亚胺培南 西司他丁 头孢菌类 三氯化铁反应 头孢他啶头孢曲松钠 TLC 头孢曲松钠 头孢他啶 头孢唑肟钠 头孢拉定 头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠 舒巴坦钠 蓝色变墨绿色溶液 三氯化铁反应 头孢唑林钠头孢噻吩钠 TLC 头孢唑林钠 头孢噻吩钠 头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠 舒巴坦钠 H 033 TLC 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠 舒巴坦钠 头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠 舒巴坦钠 H 033 TLC 美洛培南 亚胺培南 西司他丁 H 033 美洛培南亚胺培南 西司他丁 三氯化铁反应 片剂胶囊 内酰胺类抗生素 羟肟酸铁反应 阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾氨苄西林青霉素V钾 头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄 头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯 头孢克洛 阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾氨苄西林青霉素V钾 碱性酒石酸铜反应 青霉素V钾 阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾氨苄西林 三氯化铁反应 氨苄西林 TLC 阿莫西林 阿莫西林 克拉维酸钾 H 035 阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾氨苄西林 头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄 三氯化铁反应 头孢拉定头孢氨苄 头孢羟氨苄 TLC 头孢拉定 头孢氨苄 头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯 碱性酒石酸铜反应 头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯 颗粒剂干混悬剂 内酰胺类抗生素 三氯化铁反应 头孢氨苄 甲氧苄啶头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄头孢克洛阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾头孢克肟 头孢泊肟酯 头孢地尼 头孢氨苄 甲氧苄啶头孢拉定头孢氨苄头孢羟氨苄头孢克洛阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾头孢克肟 碱性酒石酸铜反应 1 5 头孢氨苄 甲氧苄啶 头孢氨苄头孢拉定 头孢克洛阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾 头孢克肟 深蓝紫色 浅墨绿色 头孢羟氨苄 墨绿色 深红色 深棕色 头孢克洛阿莫西林阿莫西林 克拉维酸钾 TLC 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林 克拉维酸钾 H 034 操作要点及注意事项 颜色反应 颜色反应鉴别一些品种 制剂 的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应 反应后溶液的颜色深浅及溶液状态 澄清 浑浊 沉淀等 的判断受实验人员的主观因素的影响较大 为便于判断 标准正文中采用以 或 连接几种颜色 状态的方法进行叙述 举例如下 注射用粉针剂的羟肟酸铁反应 桔红色 深桔红色或浅桔红色混浊或溶液 照片如下 注射用粉针剂的三氯化铁反应 微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀 照片如下 颗粒剂 干混悬剂的三氯化铁反应 桔红色 深桔红色或浅桔红色 照片如下 一些品种 制剂 的碱性酒石酸铜反应 反应现象是颜色渐变的过程 如 深葡萄紫色变深棕色 墨绿色变棕黄色 蓝色变墨绿色 深葡萄紫色变深墨绿色 等 且变化速度的快慢依品种各异 因此 操作该反应时需仔细观察现象 样品的溶解性对颜色结果的影响 注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时 发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊 但不影响反应现象的观察和结果的判断 辅料对颜色反应结果的影响 由于注射剂辅料较少直接溶解即可 不需过滤 片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大 本实验仍以取粉末加溶剂溶解 取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主 颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过滤 辅料对实验结果会产生一定影响 大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解 取上清夜直接加入试剂后观察颜色 参考快检手册的图片仔细观察颜色 薄层色谱 操作要点及注意事项 操作要点 选择参比物的依据 Rf值的计算 Rf值的计算应以UV254nm下检视的斑点位置为准 舒巴坦钠以碘蒸气熏蒸后的斑点位置计 注意从斑点前沿开始测量 以Rf值结合相对Rf值定性的稳定性和重现性比单独以Rf值定性高 展开剂在展开过程的挥发问题 由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸 挥发性较强 在展开过程中一定要注意圆形展开缸的密闭性 解决方案 在展开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂布真空硅脂 且用夹子夹好 注意事项 舒巴坦钠UV254nm下检视无斑点 经碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅 操作时需仔细观察 供试品溶液的制备 参照 取样方法参照表 取本品一包 按标示量加入稀乙醇 振摇2 3分钟 制成每1ml约含25mg阿莫西林的溶液 静置 取上清