影响血液凝固因素.ppt

14影本一班张琛201452623 血液实验 影响血液凝固的因素 实验目的 了解血液凝固的基本过程及影响血液凝固的一些因素实验原理 血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过程称为血液凝固 本质是可溶性纤维蛋白原转换为不可溶性纤维蛋白多聚体 纤维蛋白交织成网 从而形成血凝块 血液凝固过程 凝血酶原酶复合物形成凝血酶原凝血酶纤维蛋白质纤维蛋白 凝血酶原酶复合物的形成中有两个途径 内源性和外源性 内源性是指参与凝血的全部物质均在血液中 外源性是指在凝血的过程中有其他组织的凝血物质 Ca2 在血液凝固中的作用 FII FVII FIX FX这四个因子的生化特征是分子上都有Ca2 结合的部位 通过与Ca2 结合发生变构 暴露出与磷脂结合的部位来参与凝血 因此Ca2 在血凝过程中具有很重要的作用 血小板在凝血过程中的作用 1 激活的血小板为凝血因子提供磷脂表面 参与内外源性凝血途径因子X和凝血酶原的激活 2 血小板质膜表面结合有许多凝血因子 如纤维蛋白原 FV FXI FXIII 这些因子的相继激活可加速凝血过程 3 血小板激活后 释放颗粒的内容物 如 颗粒内纤维蛋白原的释放 可增加纤维蛋白的形成 加固凝块 肝素在凝血过程中的作用 肝素在体内和体外都有抗凝作用 主要通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用 使血液不凝 温度对血液凝固的影响 适宜酶发挥效能的温度 37 左右 环境中 血凝速度加快 接触面光滑程度对血液凝固的影响 接触面越粗糙血液凝固速度越快 实验材料动物 家兔 2 3kg 雌雄均可药品 20 乌拉坦溶液 肝素 草酸钾 0 025mol L氯化钙溶液 肺组织浸液 富血小板血浆 少血小板血浆 生理盐水 石蜡油器材 小烧杯 带橡皮刷的玻璃棒或竹签 清洁小试管9支 水浴装置一套 冰块 棉花 移液器 1ml 0 2ml 实验方法1 观察内源性与外源性凝血的过程取干净小试管3支 编号后按表7 2加入各种成分摇匀后静置 在加入0 025mol LCaCl2溶液的同时开始计时 每15 倾斜一次 观察是否开始凝血 并分别记录3支试管的血凝时间 比较3个管的血液凝固时间 比较血液凝固的时间 1与2比 2与3比 分析产生差别原因 2 观察影响血液凝固的理化因素取小试管7支 编号并按表7 4准备后 取家兔颈动脉血 每管2ml立即计时 每15 倾斜试管一次 以观察血液是否凝固 至血液呈凝胶状不再流动时记录血凝时间 3 观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用取血10ml 注入两个小烧杯中 一杯静置 另一杯用试管刷轻轻搅拌 几分钟后试管刷上结成红色血团 用水冲洗 观察纤维蛋白的形状 比较两杯的血凝情况 注意事项1 每试管口径大小及取血量应基本一致 判断试管倾斜角度 45 间隔时间 30s 次 标准 血液不见流动 都应一致 2 采血有先有后 计时不应统一要求 各组和个人应分别单独计时 3 棉花不要压试管太紧 要松软 4 用石蜡油将试管表面全部润滑后 将石蜡油倒入水池中 5 取血前先准备好冰块 取完血后立即把第3号试管放入水浴锅 4号试管放入装有冰块的烧杯中 出血时间和凝血时间的测定 实验目的 学习出血时间和凝血时间测定的方法实验原理 出血时间是指从针刺使毛细血管破损 血液自行流出到自行停止的时间 当毛细血管受损时 受伤血管可立即引起收缩反应 从而局部血流减慢 有利于血小板粘着并聚集于血管的破损处 形成松软止血栓 接着部分血小板破裂 释放出血小板因子 在局部迅速出现血凝块 使出血停止 出血时间的测定可以反映毛细血管及血小板功能正常与否 凝血时间是指血液流出体外至凝固所需要的时间 它反应的是血液本身的凝血过程是否正常 凝血时间的延长常见于一些凝血因子缺乏或异常的疾病 实验材料对象 人药品 75 酒精棉球器材 采血针 载玻片 滤纸条 秒表 实验方法 1 出血时间的测定 1 以75 酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧 待酒精自然挥发后 用消毒采血针刺入上述部位2 3mm深 让血液自然流出 切勿挤压 从血流流出算起计算时间 2 每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次 直到吸不到血液为止 3 记录开始出血到止血的时间 或以滤纸上的血点数 0 5分钟来计算 其结果即为出血时间 分 2 凝血时间的测定 1 以75 的酒精棉球消毒 待酒精自然挥发后用消毒采血针刺入上述部位2 3mm深 让血液自然流出 用棉球轻轻拭去第一滴血液 待血液重新自然流出即开始计时 2 将第二滴血置于玻片上 每隔半分钟用大头针挑血一次 直到挑起细纤维状的血丝 即表示开始凝血 从开始流出到挑起细纤维状的血丝所需要的时间即为凝血时间 注意事项1 各种用具严格消毒 2 针刺手指或耳垂不宜过浅 深度2 3mm使血可自然流出为宜 如针刺部位深度不够 流血量太少不能用力挤压局部 应重新针刺 3 用滤纸吸血时 注意不要用滤纸触及皮肤伤口 以免影响结果的准确性 4 测定凝血时 应严格每隔半分钟用大头针挑血一次 不可太频繁 同时每次挑动血液要按一定方向和顺序进行 以免破坏纤维蛋白的网状结构而造成不凝的假象 ABO血型的鉴定 实验目的 学习ABO血型鉴定的实验方法 加深对ABO血型划分的理解实验原理 是指红细胞膜上特异性抗原的类型 根据红细胞膜上是否有A或B抗原可分为四种血型 A型 B型 AB型和O型 当凝集原遇到与其相对抗的凝集素会发生凝集 根据抗原抗体反应原理 利用已知的血清凝集素 抗A凝集素 抗B凝集素 来确定未知的红细胞膜上的凝集原 A凝集原和B凝集原 的种类 从而鉴定ABO血型 含B抗原的红细胞 抗B抗体 红细胞凝集反应 抗B 血型的抗原和抗体分布情况 实验材料对象 人药品 抗A抗体和抗B抗体 生理盐水器材 采血针 凹玻片 75 酒精棉球 显微镜 实验方法1 取双凹片一块 用蜡笔在两端分别写上A B字样 在两侧凹内分别滴一滴抗A抗体和抗B抗体 2 用镊子夹取75 酒精棉球 消毒指端或耳垂及采血针 用采血针采一滴血 用玻片一角刮取少许血液在抗A抗体中摇匀 在再用玻片另一角刮取少许在抗B抗体中摇匀 3 将玻片轻轻转动数次 使血液血清充分混合 放置10 15min后肉眼观察有无凝集现象 若肉眼不能判断是否凝集 应放在显微镜下观察 鉴定结果 Rh血型系统人类红细胞含有一种与恒河猴的红细胞相同的凝集原称为Rh因子含Rh因子 Rh阳性不含Rh因子 Rh阴性输血原则1当给人体输入血型不相容的血液时 在血管内会发生红细胞凝集反应 且在补体作用下 凝集红细胞破裂 发生溶血反应 甚至危及生命 因此血型鉴定是安全输血的前提 2即使在ABO系统血型相同的人之间进行输血 输血前还必须进行交叉配血试验 cross matchtest 注意事项1 用于刮取血液的玻片的两角不能混用 否则会使双凹片中A B血清相混 2 注意区分红细胞凝集和聚集 后者加生理盐水可分散 前者不能分开