甲基莲心碱纳米脂质体对小鼠脑缺氧以及脑栓塞的疗效观察

1 / 5甲基莲心碱纳米脂质体对小鼠脑缺氧以及脑栓塞的疗效观察【摘要】 目的 研究甲基莲心碱(Nef)纳米脂质体(NefNL)对小鼠脑缺氧及脑栓塞的治疗作用。方法 用亚硝酸钠制造小鼠脑缺氧模型，诱导剂制造小鼠脑栓塞模型。观察 NefNL 对这两种小鼠病模的治疗效果，并与生理盐水组、同剂量 Nef 注射液组、普通 Nef 脂质体组进行比较。结果 与生理盐水组相比，Nef 3 种制剂均能显著延长小鼠亚硝酸钠中毒后的存活时间，提高小鼠对抗脑栓塞的能力(P 【关键词】 甲基莲心碱;纳米脂质体;小鼠;脑缺氧;脑栓塞;疗效(Department of Pharmacy,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan,Hubei 430060,China)Abstract:Objective To study the effects of neferine nanoliposomes (NefNL) on cerebral anoxia and cerebral embolism in NaNO2 was used to induce cerebral anoxia in mice. Cerebral embolism in mice was induced by the revulsant. The effects of NefNL was observed compared with physiological saline (negative control group),Nef injection and the common Nef liposomes at the same 2 / 5concentration (positive control groups).Results Compared with the negative control group,all the three Nef preparations had significant effects on the two mice with the two positive control groups,NefNL could enhance the effects significantly. Conclusion NefNL had promising preventative effects on cerebral anoxia and cerebral embolism in mice.Key words:nerefine; nanoliposomes; mice; cerebral anoxia; cerebral embolism; effects甲基莲心碱(neferine,Nef)是从莲子心中提取的双苄基异喹啉类生物碱，具有心血管保护、中枢保护、解毒等诸多药理活性。其中，Nef 能够重活化有机磷中毒小鼠被抑制的脑胆碱酯酶，可能与其能通过血脑屏障(BBB)在脑内分布有关1。而理想的脑靶向制剂应具有的性质之一为粒子粒径100 nm2。为进一步提高 Nef 的脑靶向性，本实验研制了 Nef 的纳米脂质体(NefNL)，并探讨其对小鼠急性脑缺血以及脑栓塞的影响，为脑靶向性研究提供实验依据。1 试药与动物试药Nef 纯品(武汉大学人民医院中药制剂实验室自制，3 / 5质量分数经归一化法测定98%);卵磷脂(Sigma 公司);胆固醇(上海政翔化学试剂研究所);?生育酚(Sigma 公司);海藻糖(南宁中诺生物工程有限责任公司);亚硝酸钠(天津市博迪化工有限公司，批号：XX0216);脑栓塞诱导剂(自制，含胶原蛋白和肾上腺素，批号：20160318);其他试剂为分析纯。动物昆明种小鼠，体质量 1822 g，雌雄各半，武汉大学中南医院实验动物中心提供，合格证号：SCXK(鄂)XX?0001。广东药学院学报 第 26 卷 第 4 期 谈弋，等.甲基莲心碱纳米脂质体对小鼠脑缺氧以及脑栓塞的疗效观察2 方法与结果Nef 各种制剂的制备Nef 注射液的制备 称取 Nef 原料，用 mol/L 的 HCl溶解， mol/L 的 NaOH 调 pH 至，加蒸馏水至足量，用 m的微孔滤膜过滤，115 高压灭菌 30 min 即得。Nef 普通脂质体的制备 根据预试验结果及NefNL 的制备 按“”项下操作，最后将脂质体初悬液经高压均质机在 20 kpsi( 106 kPa )压力下经 50 nm 膜挤压乳匀 58 次，直至脂质体粗悬液由浑浊变为较澄4 / 5清的微带蓝色乳光的纳米脂质体悬液。亚硝酸钠所致小鼠脑缺氧实验4取小鼠 40 只，随机分为 4 组，每组 10 只。分别为生理盐水阴性对照组、Nef 注射液阳性对照组、普通 Nef 脂质体阳性对照组、NefNL 组。于实验前 3 d 开始，每天尾静脉注射给药 1 次，给药剂量为 30 mg/kg，第 4 天最后 1 次给药 15 min 后,腹腔注射 NaNO2 溶液(质量浓度 25%)250 mg/kg。记录从注射亚硝酸钠开始至死亡时间，记为小鼠存活时间。结果见表 1。表 1 可见，与生理盐水组相比，3 种Nef 制剂均可显著延长小鼠亚硝酸钠中毒后的存活时间(P 小鼠脑栓塞实验5取小鼠 40 只，随机分为 4 组，每组 10 只。分组方法及前 3 d 给药方法同“” ，第 4 天最后 1 次给药 15 min后，尾静脉注射诱导剂(胶原蛋白 225 g /只;肾上腺素 9 g/只) mL/10 g，以诱发动物急性脑栓塞形成。观察每组动物给予诱导剂后 15 min 内出现偏瘫、死亡及 15 min 内偏瘫后恢复正常的动物数，计算保护率(保护率=恢复数/10)。结果见表 2。用简化直接概率法4进行统计比较，与生理盐水组相比，3 种 Nef 制剂均能显著提高小鼠对抗脑栓塞的能力(P 3 讨论一种药物只有通过 BBB 并在中枢保持有效浓度，才能在中枢发挥药效。Nef 注射液已被证实能够通过小鼠 BBB5 / 5进入脑组织，且在脑组织中的浓度随给药剂量的增加而增加1。