第07章--杂环类药物的.ppt

第七章杂环类药物的分析 杂环化合物 指环状有机化合物的碳环中夹杂有非碳元素原子 如O S N等 的化合物 第一节吡啶类药物的分析 异烟肼 isoniazid 吡啶 pyridine 尼可刹米 nikethamide 异烟腙 ftivazide 丙硫异烟胺 protionamide 一 结构与性质 1 吡啶环弱碱性pKb 8 8 非水碱量法含量测定或沉淀反应鉴别吡啶环可发生开环反应 可用于吡啶类药物的鉴别 2 取代基 1 异烟肼 位上酰肼基弱酸性非水酸量法还原性鉴别或氧化还原滴定法含量测定可与某些羰基试剂发生缩合反应鉴别或比色法含量测定酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼 2 尼可刹米 位上酰胺基易水解 遇碱水解后 释放出具有碱性的二乙胺 能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色 故可以此进行鉴别 3 丙硫异烟胺 位上硫代甲酰胺基易水解 加酸水解后 释放出硫化氢 能使湿润的醋酸铅试纸显黑色 故可以此进行鉴别 3 UV和IR 二 鉴别试验 一 吡啶环的反应 1 沉淀反应 1 与氯化汞的反应 2 与铜盐的反应尼可刹米ChP 2000 鉴别 3 取本品2滴 加水1ml 摇匀 加硫酸铜试液2滴与硫氰酸胺试液3滴 即生成草绿色沉淀 2 吡啶环的开环反应 适用于吡啶 未取代 以及 为烷基或羧基的衍生物 1 戊烯二醛反应 K nig反应 尼可刹米ChP 2000 鉴别 2 取本品1滴 加水50ml 摇匀 分取2ml 加溴化氰试液2ml与2 5 苯胺溶液3ml 摇匀 溶液渐显黄色 异烟肼 2 二硝基氯苯反应 异烟腙ChP 2000 鉴别 取异烟腙约50mg 加2 4 二硝基氯苯50mg与乙醇3m1 置水浴中煮沸2 3min 加10 氢氧化钠溶液2滴 静置后 即显鲜明的红色 异烟肼不经处理的反应 二 酰肼基团的反应 1 还原反应 异烟肼ChP 2000 鉴别 2 取异烟肼约10mg 置试管中 加水2ml溶解后 加氨制硝酸银试液1m1 即发生气泡与黑色浑浊 并在试管壁上生成银镜 2 缩合反应 异烟肼ChP 2000 鉴别 1 取本品约0 1g 加水5ml溶解后 加10 香草醛的乙醇溶液1m1 摇匀 微热 放冷 即析出黄色结晶 滤过 用稀乙醇重结晶 在105 干燥后 测定熔点 其熔点为228 231 熔融时同时分解 三 分解产物的反应 1 尼可刹米ChP 2000 鉴别 1 取本品10滴 加氢氧化钠试液3ml 加热 即发生二乙胺的臭气 能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色 2 丙硫异烟胺ChP 2000 鉴别 1 取本品约50mg 加盐酸溶液 9 100 3ml 缓缓加热 发生的气体可使湿润的醋酸铅试纸显黑色 四 紫外吸收光谱特征 丙硫异烟胺ChP 2000 鉴别 1 取本品 加乙醇制成每1ml中含20 g的溶液 照分光光度法 附录 A 测定 在291nm的波长处有最大吸收 吸收度约为0 78 五 IR 尼可刹米ChP 2000 鉴别 4 本品的红外吸收图谱应与对照的图谱 光谱集135图 一致 三 杂质检查 杂质来源原料引入 降解产生 一 异烟肼中游离肼的检查 1 薄层色谱法 TLC 1 ChP 2000 杂质对照品法 取本品 加水制成每1ml中含50mg的溶液 作为供试品溶液 另取硫酸肼加水制成每1ml中含0 20mg 相当于游离肼50 g的溶液 作为对照溶液 吸取供试品溶液10 l与对照溶液2 l分别点于同一硅胶薄层板 用羧甲基纤维素钠溶液制备 上 以异丙醇 丙酮 3 2 为展开剂 展开后 晾干 喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液 15min后检视 在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上 不得显黄色斑点 2 BP 1998 游离肼杂质对照品法有关物质高低浓度对比法 2 比浊法JP 13 检查方法灵敏度法反应原理游离肼 水杨醛 水杨醛腙 优点 不用对照品 价廉 简单易行缺点 准确度差 3 差示分光光度法 游离肼 对二甲氨基苯甲醛 黄色缩合物于456nm波长处有最大吸收异烟肼 对二甲氨基苯甲醛 缩合物于456nm波长处无吸收游离肼 3 丙酮 无色的二甲基甲酮连氮 参比 异烟肼 游离肼 对二甲氨基苯甲醛 3 丙酮样品 异烟肼 游离肼 对二甲氨基苯甲醛测定 对照法定量 二 尼可刹米中有关物质的检查 ChP 2000 TLC高低浓度对比法配制两种不同浓度的对照溶液 四 含量测定 一 异烟肼的含量测定 1 氧化还原滴定法 1 溴酸钾法ChP 2000 原料及制剂 反应摩尔比3 2 取本品约0 2g 精密称定 置100ml量瓶中 加水使溶解并稀释至刻度 摇匀 精密量取25m1 加水50m1 盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴 用溴酸钾滴定液 0 01667mo1 L 缓缓滴定 温度保持在18 25 至粉红色消失 每1ml的溴酸钾滴定液 0 01667mol L 相当于3 429mg的C6H7N3O 2 溴量法反应摩尔比1 4 3 剩余碘量法反应摩尔比1 4 2 非水溶液滴定法 1 非水酸量法 2 非水碱量法 二 尼可刹米的含量测定 1 非水溶液滴定法ChP 2000 原料2 紫外分光光度法ChP 2000 注射液内容量移液管 用内容量移液管精密量取本品1m1 置100ml量瓶中 用0 5 硫酸溶液分次洗涤移液管内壁 洗液并入量瓶中 加0 5 硫酸溶液稀释至刻度 摇匀 精密量取适量 加0 5 硫酸溶液稀释成每1ml中约含尼可刹米20 g的溶液 在263nm的波长处测定吸收度 按C10H14N2O的吸收系数 为292计算 即得 三 异烟腙的含量测定 非水溶液滴定法电位法指示终点ChP 2000 原料及片剂 四 丙硫异烟胺的含量测定 1 非水溶液滴定法ChP 2000 原料2 银量法ChP 2000 片剂 取本品20片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于丙硫异烟胺0 3g 置具塞锥形瓶中 加丙酮20ml使丙硫异烟胺溶解 精密加入硝酸银滴定液 0 1mo1 L 50m1 摇匀 放置15min 加水50m1 硝酸3m1 硝基苯5ml与硫酸铁铵指示液2m1 用硫氰酸铵滴定液 0 1mo1 L 滴定 并将滴定的结果用空白试验校正 每lml的硝酸银滴定液 0 1mo1 L 相当于9 014mg的C9H12N2S 99 79 下列药物中 哪一个药物加氨制硝酸银能产生银镜反应A 地西泮B 阿司匹林C 异烟肼D 苯佐卡因E 苯巴比妥 97 132 用于吡啶类药物鉴别的开环反应有A 茚三酮反应B 戊烯二醛反应C 坂口反应D 硫色素反应E 二硝基氯苯反应 例1 ChP 2000 异烟肼的测定方法为A 溴酸钾滴定法B 溴量法C TCLD NaNO2E 比色法 例2 能和2 4一二硝基氯苯发生呈色反应的药物是A 异烟腙B 硫酸奎宁C 阿莫西林D 四环素E 炔孕酮 例3 能和硫酸铜及硫氰酸铵反应 生成草绿色沉淀的药物为A 对乙酰氨基酚B 异烟肼C 尼可刹米D 地西泮E 维生素E 例4 经高锰酸钾或溴水氧化后 可发生开环形成戊烯二醛反应的药物为A 葡萄糖B 皮质酮C 维生素CD 土酶素E 异烟肼 例5 溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是A 属于氧化还原滴定法B lmol溴酸钾相当于3 2mol的异烟肼C 采用永停滴定法指示终点D 在HCl酸性条件下进行滴定E 还可以用于异烟肼制剂的含量测定 例6 异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的降解反应而引入哪种杂质A 间氨基酚B 水杨酸C 对氨基苯甲酸D 游离肼E 其他甾体 例7 可用于异烟肼鉴别的反应有A 与氨制硝酸银的反应B 戊烯二醛反应C 坂口反应D 硫色素反应E 二硝基氯苯反应 第二节吩噻嗪类药物的分析 吩噻嗪类药物的基本结构 奋乃静 癸氟奋乃静 盐酸氟奋乃静 盐酸三氟拉嗪 盐酸二氧丙嗪 一 结构与性质 一 结构分析 1 硫氮杂蒽母核 1 含S N的三环共轭的大 体系 S N与苯环形成p 共轭 具有紫外吸收光谱特征 2 硫氮杂蒽环上硫原子为 2价 具有还原性 易氧化呈色 3 硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子 易与金属离子络合呈色 2 取代基R 脂烃胺基 哌嗪基 具碱性R 卤素 二 性质1 紫外与红外吸收光谱本类药物的紫外特征吸收 主要由母核三环的 系统所产生 一般具有三个峰值 即在204 209nm 205nm附近 250 265nm 254nm附近 和300 325nm 300nm附近 最强峰多在250 265nm 2位上的取代基 R 不同 会引起吸收峰发生位移 其结构中 2价的硫 易氧化 氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰 吩噻嗪类药物随取代基R和R 的不同 产生不同的红外吸收光谱 2 易被氧化呈色3 易与金属离子络合呈色4 碱性 二 鉴别试验 一 UV和IR奋乃静ChP 2000 鉴别 2 取本品 加无水乙醇制成每1ml中含7 g的溶液 照分光光度法 附录 A 测定 在258nm的波长处有最大吸收 吸收度约为0 65 3 本品的红外吸收图谱应与对照的图谱 光谱集243图 一致 二 显色反应1 氧化剂氧化显色氧化剂硫酸 硝酸 过氧化氢奋乃静ChP 2000 鉴别 1 取本品5mg 加盐酸与水各1ml 加热至80 加入过氧化氢溶液数滴 即显深红色 放置后 红色渐褪去 盐酸异丙嗪ChP 2000 鉴别 1 取本品约5mg 加硫酸5ml溶解后 溶液显樱桃红色 放置后 色渐变深 2 取本品约0 1g 加水3ml溶解后 加硝酸1ml 即生成红色沉淀 加热 沉淀即溶解 溶液由红色转变为橙黄色 癸氟奋乃静ChP 2000 鉴别 2 取本品约5mg 加甲醇2ml溶解后 加0 1 氯化钯溶液3ml 即有沉淀生成 并显红色 再加过量的氯化钯溶液 颜色变深 2 与钯离子络合显色 三 分解产物的反应癸氟奋乃静ChP 2000 鉴别 1 取本品15 20mg 加碳酸钠与碳酸钾各约0 1g 混匀 在600 炽灼15 20分钟 放冷 加水2ml使溶解 加盐酸溶液 1 2 酸化 滤过 滤液加茜素锆试液0 5ml 应显黄色 四 氯化物的反应 盐酸氯丙嗪ChP 2000 鉴别 3 本品的水溶液显氯化物的鉴别反应 附录 三 有关物质检查1 癸氟奋乃静及其注射液TLC参比杂质对照品法以盐酸氟奋乃静为对照品2 其他药物TLC高低浓度对比法 四 含量测定 一 非水溶液滴定法原料药HClO4在冰醋酸溶液中 具强氧化性 可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物 干扰指示剂终点的观察 排除方法 1 改用中性溶剂 2 加抗坏血酸 3 电位法指示终点 二 紫外分光光度法1 直接分光光度法盐酸异丙嗪 片剂测定波长为249nm 为910 注射液为了消除抗氧剂维生素C max243nm 对测定的干扰 测定波长改为299nm 为108 同理 盐酸氯丙嗪片剂测定波长为254nm 为915 注射液测定波长改为306nm 为115 2 萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液 3 二阶导数分光光度法盐酸氯丙嗪注射液抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线 不干扰盐酸氯丙嗪的测定 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266nm 谷254nm距离 标准曲线法定量 4 萃取 双波长分光光度法 1 原理在待测组分 a 的最大吸收波长 测定波长 1 处测定待测组分和干扰组分 b 吸收度的总和 另选一适当波长 参比波长 2 测定吸收度 并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等 即 而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大 2 定量依据样品在二波长下吸收度差值 A 即 吸收度差值 A 仅与待测组分的浓度有关 而与干扰组分无关 干扰组分的干扰被消除 3 必要条件 干扰组分在两个波长处吸收度相等 待测组分在两个波长处吸收度相差足够大 4 应用 萃取除去抗氧剂的干扰 双波长分光光度法测定排除氧化产物的干扰测定波长254nm参比波长277nm对照法定量 三 铈量法 自身指示终点或电位法 永停法指示终点 优点 硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位 且为一价还原 不存在对环取代基的副反应 专属性高 本法既可用于原料 亦可用于片剂的测定 四 比色法1 钯离子比色法 反应在pH2 0 1的缓冲液中进行 优点 钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定 2 铁盐比色法 95 131 盐酸氯丙嗪的含量测定方法有A 中和法B 非水滴定法C 紫外法D 旋光法E 铈量法 99x 87 中国药典 1995年版 对盐酸异丙嗪注射液的含量测定 选用299nm波长处测定 其原因是A 299nm处是它的最大吸收波长B 为了排除其氧化产物的干扰C 为了排除抗氧剂的干扰D 在299nm处 它的吸收系数最大E 在其他波长处 因其无明显吸收 99x 78 有氧化产物存在时 吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为A 非水溶液滴定法B 紫外分光光度法C 荧光分光光度法D 钯离子比色法E pH指示剂吸收度比值法 例1 中国药典 2000年版 中地西泮原料药中2 甲氨基 5 氯二苯酮的检查法为A TLCB HPLCC GCD 沉淀法E 显色法 例2 检查盐酸氯丙嗪中 有关物质 时 采用的对照溶液为A 杂质的标准溶液B 标准 有关物质 溶液C 供试品溶液D 供试液的稀释溶液E 对照溶液 例3 某药物于酸性溶液中 加硫酸铈试液则产生红色 继续滴加硫酸铈试液 红色由浅变深 继由深又变浅直至红色消失 该药物应为A 雌二醇B 氯丙嗪C 诺氟沙星D 硫酸镁E 苯巴比妥钠 例4 吩噻嗪类药物与钯离子反应 需在以下哪种酸性条件下进行A pH4B pH3 3 5C pH2 0 1D pH1E pH5 第三节苯并二氮杂卓类药物的分析 环庚三烯 卓 硝西泮 氯硝西泮 奥沙西泮 盐酸氟西泮 艾司唑仑 阿普唑仑 一 结构与性质 1 苯并二氮杂卓母核弱碱性 UV2 结构中的环一般比较稳定 但在酸性溶液中可水解 形成相应的二苯甲酮衍生物 3 含卤素 二 鉴别试验 一 化学反应1 沉淀反应 氯氮卓ChP 2000 鉴别 2 取本品约10mg 加盐酸溶液 9 1000 10ml溶解后 加碘化铋钾试液1滴 即生成橙红色沉淀 阿普唑仑ChP 2000 鉴别 1 取本品约5mg 加盐酸溶液 9 1000 2ml溶解后 分为两份 一份加硅钨酸试液1滴 即生成白色沉淀 另一份加碘化铋钾试液1滴 即生成橙红色沉淀 2 水解后重氮化 偶合反应氯氮卓 艾司唑仑 奥沙西泮 氯氮卓ChP 2000 鉴别 1 取本品约10mg 加盐酸溶液 1 2 15ml 缓缓煮沸15分钟 放冷 溶液显芳香第一胺类的鉴别反应 附录 3 水解后呈茚三酮反应地西泮4 硫酸 荧光反应 地西泮ChP 2000 鉴别 1 取本品约10mg 加硫酸3ml 振摇使溶解 在紫外灯 365nm 下检视 显黄绿色荧光 氯氮卓 黄色艾司唑仑 亮绿色硝西泮 淡蓝色 5 分解产物的反应 地西泮ChP 2000 鉴别 2 取本品20mg 用氧瓶燃烧法 附录 C 进行有机破坏 以5 氢氧化钠溶液5ml为吸收液 燃烧完全后 用稀硝酸酸化 并缓缓煮沸2分钟 溶液显氯化物的鉴别反应 附录 二 UV和IR 三 TLC 三 特殊杂质的检查 一 有关物质的检查1 地西泮中有关物质的检查地西泮的原料及片剂TLC高低浓度对比法 2 氯氮卓中有关物质的检查USP 24 TLC氧化物 氨基物杂质对照品法有关物质参比杂质对照品法BP 1998 TLC高低浓度对比法3 氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法 二 降解产物的检查地西泮注射液分解产生2 甲氨基 5 氯二苯甲酮HPLC主成分自身对照法 1 峰面积归一化法 取一定量供试品溶液进样 测定各杂质及药物的峰面积 计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率 不能超过限量 注意溶剂峰不应计算在总峰面积内 优点 不需杂质对照品 简便易行 缺点 检测波长处 各杂质和药物的吸收强度可能有差异 控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量 准确度差 2 主成分自身对照法 杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用 方法 分别进样 测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和 与对照溶液主成分峰面积比较 控制供试品中杂质的量 缺点 检测波长处 各杂质和药物的吸收强度可能有差异 准确度差 优点 不需杂质对照品 可同时控制各个杂质及其总量限度 3 内标法测定供试品中杂质的总量限度 方法 供试品 供试品溶液1图1供试品 内标 供试品溶液2图2 判断 若图1无与内标峰保留时间相同的杂质峰 则图2中各杂质峰面积之和应小于内标物质峰面积 溶剂峰不计在内 若图1有与内标峰保留时间相同的杂质峰 则将图2上的内标峰面积减去图1中此杂质峰面积 得内标物质峰的校正面积 图2中各杂质峰面积加上