生物化学与分子生物学学习指导与习题集11

第一篇第一篇 生物大分子生物大分子的结构与功能的结构与功能 第一章第一章 蛋白质的结构与功能蛋白质的结构与功能 氨基酸的结构与性质 1 氨基酸的概念 氨基酸 amino acid 是蛋白质分子的基本结构单位 构成蛋白质分子的氨基酸 共有 20 种 这些氨基酸都是 L 构型的 氨基酸 2 氨基酸分子的结构通式 5 氨基酸的等电点氨基酸的等电点 氨基酸不带电荷时 溶液的 pH 值称为该氨基酸的等电点 以 pI 表示 氨基酸不同 其等电点 也不同 也就是说 等电点是氨基酸的一个特征值 6 氨基酸的茚三酮反应氨基酸的茚三酮反应 如果把氨基酸和茚三酮一起煮沸 除脯氨酸和羟脯氨酸显黄色外 其它氨基酸都显深浅不同的 紫色 氨基酸与茚三酮的反应 在生化中是特别重要的 因为它能用来定量测定氨基酸 肽键 1 肽键 一个氨基酸的 羧基与另一个氨基酸的 氨基以共价键偶联形成肽 其间的化学键 称为肽键 peptide bond 也叫酰胺键 CO NH 4 肽 peptide 是氨基酸通过肽键相连的化合物 肽按其组成的氨基酸数目为 2 个 3 个和 4 个 等不同而分别称为二肽 三肽和四肽等 多肽和蛋白质的区别是多肽中氨基酸残基数较蛋白质少 一般少于 50 个 而蛋白质大多由 100 个以上氨基酸残基组成 但它们之间在数量上也没有严格的 分界线 蛋白质的分离和纯化蛋白质的分离和纯化 2 2 盐析 盐析 在蛋白质溶液中加入大量中性盐 以破坏蛋白质的胶体性质 使蛋白质从溶液中沉淀析 出 称为盐析 常用的中性盐有 硫酸铵 氯化钠 硫酸钠等 蛋白质的等电点概念 蛋白质的等电点概念 蛋白质分子所带正 负电荷相等时溶液的 pH 值称为蛋白质的等电点 pH 值在等电点以上 蛋白质带负电 在等电点以下 则带正电 溶液的 pH 在蛋白质的等电点处 蛋白质的溶解度最小 一 蛋白质的生物功能 一 蛋白质的生物功能 生物催化 机械支撑作用 运输与贮存 协调 免疫保护 生长与分化调 控 细胞信号转导 物质跨膜运输 电子传递等 二 蛋白质的分子结构 二 蛋白质的分子结构 可为分为一级 二级 三级和四级结构等层次 一级结构为线状结构 二 三 四级结构为空间结构 蛋白质分子的一级结构是形成空间结构的物质基础 1 1 一级结构 一级结构 指多肽链中氨基酸的排列顺序 其维系键是肽键 蛋白质的一级结构决定其空间结 构 2 2 二级结构 二级结构 指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象 借氢键维系 二级结构是肽链的局部空 间结构 它是蛋白质复杂空间结构形成的基础 因此也称为构象单元 主要有以下几种类型 螺旋 其结构特征为 主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋 螺旋每上升一圈是 3 6 个氨基酸残基 螺距为 0 54nm 相邻螺旋圈之间形成许多氢键 侧链基团位于螺旋的外侧 折叠 其结构特征为 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片 所有肽键的 C O 和 N H 形成链间氢键 无规卷曲 主链骨架无规律盘绕的部分 蛋白质的超二级结构和结构域 在蛋白质 特别是球状蛋白 的结构中 经常会出现两个或几个二级结构单元被连接起来 进一 步组合成有特殊的几何排列的局域空间结构 这些局域空间结构称为超二级结构 Supersecondary structure 或简称模体 Motif 超二级结构可以视为是处于二级结构与三级结构之间的一个结 构层次 现在已知的超二级结构有 3 种基本的组合形式 多肽链还会在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区 称为结构域 Structural domain 对于一些简单的球状蛋白分子来说 它还可能是一个独立的功能单位或功 能域 functional domain 3 三级结构 结构域 二级结构 超二级结构的多肽链在空间进一步协同盘曲 折叠 形成包 括主链 侧链在内的专一排布 这就是蛋白质的三级结构 Tertiary structure 对于一些较小 的蛋白质分子 三级结构就是它的完整三维立体结构 而对于大的蛋白质分子 则需要通过三级结 构单位的进一步组织才能形成完整分子 其维系键主要是非共价键 次级键 氢键 疏水键 范德华力 离子键等 也可涉及二硫键 4 四级结构 亚基的概念 亚基是指参与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构的多肽链 四级结构的概念 含两条以上肽链的蛋白质分子 每条肽链彼此以非共价键相结合 这些肽链称为 亚基 Subunit 通过非共价键形成大分子体系时 亚基间的组合方式称为蛋白质分子的四级结构 Quaternary structury 其维系键为非共价键 一般来说 单独存在的亚基并没有完整的生物活性 只有具有完整的四级结构的寡聚体才具有生物 活性 四 蛋白质的理化性质 1 1 蛋白质的变性 蛋白质的变性 蛋白质在某些理化因素的作用下 其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质 改变及生物活性丧失 这种现象称为蛋白质的变性 引起蛋白质变性的因素有 高温 高压 电离 辐射 超声波 紫外线及有机溶剂 重金属盐 强酸强碱等 绝大多数蛋白质分子的变性是不可逆 的 3 3 蛋白质的紫外吸收 蛋白质的紫外吸收 蛋白质分子中的色氨酸 酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收 以色氨 酸吸收最强 最大吸收峰为 280nm 4 蛋白质的胶体性质 蛋白质具有亲水溶胶的性质 蛋白质分子表面的水化膜和表面电荷是稳定 蛋白质亲水溶胶的两个重要因素 第一章第一章 蛋白质的结构与功能蛋白质的结构与功能 一 名词解释一 名词解释 1 肽键 peptide bond 2 蛋白质的等电点 isoelectric point of protein 3 蛋白质的变性 denaturation of protein 10 氨基酸 11 蛋白质的紫外吸收 12 氨基酸的茚三酮反应 二 填空题二 填空题 1 组成蛋白质的元素有 含量恒定的元素是 其平均含 量为 2 蛋白质结构的基本单位是 结构通式为 3 肽是氨基酸与氨基酸之间通过 相连的化合物 4 蛋白质的二级结构形式有 5 维持蛋白质空间构象的非共价键有 7 氨基酸在等电点 PI 时 以 离子形式存在 在 PH PI 时以 离子存在 在 PH3 端 大多数情况下只有一股DNA作为RNA的模板 E 合成的RNA链没有环状的 11 以下对mRNA的转录后加工的描述错误的是 C A mRNA前体需在5 端加m7GpppNmp的帽子 B mRNA前体需进行剪接作用 C mRNA前体需在3 端加多聚U的尾 D mRNA前体需进行甲基化修饰 E 某些mRNA前体需要进行编辑加工 12 对原核生物启动子的描述错误的是 D A 启动子包括转录起始点 B 启动子包括RNA聚合酶结合部位及识别部位 C 启动子的结合部位在 10bp处 共有序列为5 TATAAT 3 D 结合部位是指DNA分子上与 因子结合的序列 E 识别部位约位于 35bp处 13 基因启动子是指 C A 编码mRNA翻译起始的DNA序列 B 开始转录生成mRNA的DNA序列 C RNA聚合酶最初与DNA结合的DNA序列 D 阻遏蛋白结合的DNA部位 转录结合蛋白结合的DNA部位 14 DNA上某段碱基顺序为 5 ACTAGTCAG 3 转录后的mRNA相应的碱基顺序为 C A 5 TGATCAGTC 3 B 5 UGAUCAGUC 3 C 5 CUGACUAGU 3 D 5 CTGACTAGT 3 E 5 CAGCUGACU 3 15 RNA的转录过程分为 B A 解链 引发 链的延长和终止 B 转录的起始 延长和终止 C 核蛋白体循环的起动 肽链的延长和终止 D RNA的剪切和剪接 末端添加核苷酸 修饰及RNA编辑 E 以上都不是 16 体内RNA链合成的方向是 D A 3 5 B C N C N C D 5 3 E 既可3 5 也可5 3 17 成熟的真核生物mRNA5 末端具有 E A 聚A帽子 B m7UpppNmP C m7CpppNmP D m7ApppNmP E m7GpppNmP 18 原核生物中DNA指导的RNA聚合酶核心酶的组成是 A A 2 B 2 C 2 2 D 2 E 19 真核细胞中的各种酶对利福平敏感的是 D A RNA聚合酶 B RNA聚合酶 C RNA聚合酶 D mtRNA聚合酶 E RNA指导的DNA聚合酶 20 真核细胞中经RNA聚合酶 催化转录的产物是 b A hnRNA B tRNA C 5SrRNA D mRNA 21 转录过程中需要的酶是 D A DNA指导的DNA聚合酶 B 核酸酶 C RNA指导的RNA聚合酶 D DNA指导的RNA聚合酶 E RNA指导的DNA聚合酶 22 原核mRNA转录后需要进行的3 端加工过程是 B A 加帽子 B 加聚A尾 C 剪切和剪接 D RNA编辑 E 不加帽子 23 下列关于mRNA的叙述正确的是 C A 在三类RNA中分子量最小 B 由大小两个亚基组成 C 更新最快 D 占RNA总量的85 E 含大量稀有碱基 24 下列关于rRNA的叙述错误的是 B A 原核rRNA由RNA聚合酶催化合成 B 真核rRNA主要由RNA聚合酶 转录合成 C rRNA转录后需进行甲基化修饰 D 染色体DNA中rRNA基因为多拷贝的 E rRNA占细胞RNA总量的80 85 25 下列关于 因子的叙述正确的是 A A 参与识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点 B 参与识别DNA模板上的终止信号 C 催化RNA链的聚合反应 D 是一种小分子的有机化合物 E 参与逆转录过程 26 比较RNA转录与DNA复制 叙述正确的是 B A 原料都是dNTP B 都在细胞核内进行 C 合成产物均需剪接加工 D 两过程的碱基配对规律完全相同 E 合成开始均需要有引物 27 内含子是指 D A 不被转录的序列 B 编码序列 C 被翻译的序列 D 被转录的序列 E 以上都不是 28 外显子是指 B A DNA链中的间隔区 B 被翻译的编码序列 C 不被翻译的序列 D 不被转录的序列 E 以上都不是 29 催化真核mRNA的转录的酶是 E A RNA聚合酶 B MtRNA聚合酶 C RNA聚合酶 D RNA复制酶 E RNA聚合酶 30 催化原核mRNA转录的酶是 B A RNA复制酶 B RNA聚合酶 C DNA聚合酶 D RNA聚合酶 E RNA聚合酶 31 催化真核tRNA转录的酶是 1 A RNA聚合酶I B DNA聚合酶 C RNA聚合酶 D RNA复制酶 32 催化RNA病毒合成的酶是 A A RNA复制酶 D RNA聚合酶 C RNA聚合酶 D RNA聚合酶 E RNA聚合酶C 33 催化真核rRNA转录的酶是 C A MtRNA聚合酶 B RNA复制酶 C RNA聚合酶 D RNA聚合酶 E RNA聚合酶 39 DNA双链中 指导合成RNA的那条链称作 C A 编码链 B 有意义链 C 模板链 D 非编码链 E 以上都不对 40 DNA复制与RNA转录中的不同点是 C A 遗传信息均储存于碱基排列的顺序中 B 新生子链的合成均以碱基配对的原则进行 c RNA聚合酶缺乏校读功能 D 合成方向均为5 3 E 合成体系均需要酶和多种蛋白因子 二 填空题二 填空题 1 DNA 双链中 可作转录生成 RNA 的一股称为 其对应的另一股单链称为 模板链 编码链 2 转录的原料是 复制的原料是 NTP dNTP 3 原核生物的 RNA 聚合酶 催化合成的产物是 和 tRNA 5s rRNA 4 原核生物 RNA 聚合酶核心酶由 组成 全酶由 组成 2 2 5 转录起始过渡到延长的标志是 亚基脱落 开始催化 核心酶 6 真核生物转录后 5 端修饰是加 3 端修饰是加 帽子结构 PolyA 7 mRNA 转录后剪接加工是除去 把邻近的 连接起来 内含子 外显子 三 名词解释题三 名词解释题 每小题每小题 2 2 分分 1 不对称转录 两重含义 一是指双链 DNA 只有一股单链用作转录模板 二是同一单链上可以 交错出现模板链或编码链 2 编码链 DNA 双链上不用作转录模板的一股单链 因其碱基序列除 T U 有别外 和转录产 物 mRNA 序列一致而得名 3 RNA 聚合酶 转录过程中以 DNA 为模板催化 RNA 合成的酶 4 因子 又称 Rho 因子 是原核生物转录终止因子 有 ATP 酶和解螺旋酶活性 转录终止也可 不依赖 Rho 因子 5 因子 原核生物 RNA 聚合酶全酶的成份 功能是辨认转录起始区 6 剪接修饰 RNA 转录初级产物含有非编码组分 通过剪接除去 把编码组份连接起来 7 外显子 编码蛋白质的氨基酸的核酸序列 8 内含子 为核酸上的非编码序列 9 核酶 具有催化功能的 RNA 分子 英文名 Ribozyme 由核糖核酸词首和酶的词尾构成 四 简答题四 简答题 1 什么是不对称转录 3 分 同名词解释第 l 题 2 原核生物和真核生物的 RNA 聚合酶有何不同 4 分 原核生物 RNApol 是由多个亚基构成的 2 称为核心酶 2 称为全酶 真 核生物 RNApol 有 三种分别转录 45s rRNA hnRNA 和小分子的 RNA 5s rRNA tRNA 和 snRNA 原核生物和真核生物 RNApol 的特异性抑制剂分别是利福平和鹅膏蕈碱 4 简述原核生物 RNA 聚合酶各亚基的功能 4 分 原核生物 RNA pol 有 和 亚基 亚基的功能是辨认转录起始区 亚基 决定哪些基因转录 亚基在转录全程中起催化磷酸二酯键形成的作用 亚基结合 DNA 模板 七 论述题七 论述题 1 复制和转录过程有什么相似之处 又各有什么特点 5 分 以 DNA 为模板复制 DNA 和转录 RNA 都是酶促的核苷酸聚合过程 二者既有相似之处 又有不同点 二者的相似之处是 都以 DNA 为模板 都以核苷酸为原料 合成方向是 5 3 核苷酸 之间以磷酸二酯键相连 服从碱基配对原则 都需结合 DNA 的聚合酶 产物是很长的多核苷酸 链 二者的不同点是 复制的原料是 4 种 dNTP 即的 dATP dGTP dCTP dUTP 而转录的原料是 4 种 NTP 即 ATP GTP CTP UTP 复制过程中碱基配对关系是 A T G C 而转录过程中碱基配 对关系是 A U G C 在复制过程中催化聚合反应的酶是 DNA 聚合酶 而在转录过程中催化聚合 反应的酶是 RNA 聚合酶 在复制时 DNA 分子的两条多核苷酸链都作为模板 产物是与模板等长 的整体分子 带有基因组的全套遗传信息 而转录一种 RNA 分子时只利用 DNA 分子中的一条链为模 板 而且只是一个基因或一个操纵子转录 能够转录 RNA 的那条 DNA 链称为有意义链 模板链 而与之互补的另一条 DNA 链称为反意义链 编码链 DNA 聚合酶不能从头合成 需要引物 RNA 聚合酶不需要引物 第十五章第十五章 蛋白质的生物合成蛋白质的生物合成 习题习题及参考答案及参考答案 一 单选题一 单选题 每小题每小题1 1分分 1 真核生物在蛋白质生物合成中的启动tRNA是 E A 亮氨酰 tRNA B 丙氨酰 tRNA C 赖氨酰 tRNAD D 甲酰甲硫氨酰 tRNA E 甲硫氨酰 tRNA 3 蛋白质合成的方向是 E A 由mRNA的3 端向5 端进行 B 可同时由mRNA的3 端与5 端方向进行 C 由肽链的C端向N端进行 D 可同时由肽链的N端与C端方向进行 E 由肽链的N端向C端进行 5 蛋白质生物合成中不需要能量的步骤是 D A 氨基酰 tRNA合成 B 启动 C 肽链延长 D 转肽 E 终止 6 蛋白质生物合成的肽链延长阶段不需要 C A GTP B 转肽酶 C 甲酰蛋氨酸tRNA D mRNA E EFT 7 mRNA作为蛋白质合成的模板 根本上是由于 E A 含有核糖核苷酸 B 代谢快 C 含量少 D 由DNA转录而来 E 含有密码子 8 蛋白质生物合成是 D A 蛋白质水解的逆反应 B 肽键合成的化学反应 C 遗传信息的逆向传递 D 在核蛋白体上以mRNA为模板的多肽链合成过程 E 氨基酸的自发反应 9 关于mRNA 错误的叙述是 E A 一个mRNA分子只能指导一种多肽链生成 B mRNA通过转录生成 C mRNA与核蛋白体结合才能起作用 D mRNA极易降解 E 以上都不对 10 多肽链的氨基酸序列取决于 D A tRNA B 18SrRNA C 28SrRNA D mRNA E 氨基酰 mRNA合成酶 11 反密码子是指 B A DNA中的遗传信息 B tRNA中的某些部分 C mRNA中除密码子以外的其他部分 D rRNA中的某些部分 E 密码子的相应氨基酸 12 密码GGC的一般对应反密码子是 A A GCC B CCG C CCC D CGC E GGC 15 关于核蛋白体转肽酶 错误的叙述是 C A 转肽不需要GTP B 转肽不需要ATP C 活性中心在小亚基 D 活性中心在大亚基 E 活性中心与rRNA有关 16 在蛋白质生物合成中转运氨基酸作用的物质是 E A mRNA B rRNA C hnRNA D DNA E tRNA 17 通常mRNA上的AUG都是 D A 蛋白质合成的终止信号 B 线粒体蛋白质合成启动信号 C 启动tRNA的反密码 D 代表蛋氨酸或甲酰蛋氨酸 E 蛋白质合成的启动信号 18 蛋白质合成时 氨基酸的活化部位是 B A 烷基 B 羧基 C 氨基 D 巯基 E 羟基 19 蛋白质合成后加工 不包括 D A 蛋白质磷酸化 B 信号肽切除 C 蛋白质糖基化 D 酶的变构 E 蛋白质乙酰化 21 信号肽位于 E A 分泌蛋白新生链的中段 B 成熟的分泌蛋白N端 C 分泌蛋白新生链的C端 D 成熟的分泌蛋白C端 E 分泌蛋白新生链的N端 22 多聚核蛋白体指 C A 多个核蛋白体 B 多个核蛋白体小亚基 C 多个核蛋白体附着在一条mRNA上合成多肽链的复合物 D 多个核蛋白体大亚基 E 多个携有氨基酰tRNA的核蛋白体小亚基 23 关于密码子 错误的叙述是 A A AUG表示蛋白质生物合成的启动信号 B 密码子AUG代表甲酰蛋氨酸 C 除AUG外 有时GUG是原核生物的启动信号 D 并非所有的AUG都是启动信号 E 密码子AUG代表蛋氨酸 24 与核蛋白体无直接相互作用的物质是 E A 氨基酰tRNA B 起动因子 C mRNA D 终止因子 E 氨基酰tRNA合成酶 26 核蛋白体 受位 的功能是 D A 催化肽键生成 B 从tRNA水解新生肽链 C 转肽 D 接受新进位的氨基酰 tRNA E 活化氨基酸 27 氨基酰 tRNA中 tRNA与氨基酸的结合键 是 E A 盐键 B 磷酸二酯键 C 肽键 D 糖苷键 E 酯键 28 氨基酰tRNA3 末端的核糖上与氨基酸相连的基团是 A A 3 OH B 4 OH C 1 OH D 5 磷酸 E 3 磷酸 29 可代表氨基酸的密码子是 D A UGA B UAG C UAA D UGG E UGA和UAG 30 关于真核生物mRNA中的启动信号 正确的叙述是 B A 常在mRNA的3 端 B mRNA启动部位的AUG C mRNA中任一部位的AUG D 苯丙氨酸的密码子 E 蛋氨酸的密码子 31 不稳定配对是指密码子第3个核苷酸与反密码子哪个核苷酸配对不按G C A U原则 D A 第1或第3个 B 第2个 C 第3个 D 第1个 E 第2或第3个 32 简并性是 E A 一种密码子体现一种氨基酸 B 一种氨基酸只有一种密码子 C 一种密码子不体现任何氨基酸 D 一种密码子既体现氨基酸 又是启动信号 E 一种以上密码子体现一种氨基酸 33 关于密码子 错误的叙述是 C A 每一密码子至多代表一种氨基酸 B 某些密码子不代表氨基酸 C 一种氨基酸一般只有一种密码子 D 蛋氨酸只有一种密码子 E 密码子无种族特异性 34 氨基酸活化的特异性取决于 E A rRNA B tRNA C 转肽酶 D 核蛋白体 E 氨基酰 tRNA合成酶 35 氨基酰 tRNA合成酶 C A 只对氨基酸有特异性 B 只对tRNA有特异性 C 对氨基酸和tRNA都有特异性 D 对GTP有特异性 E 对ATP有特异性 36 多肽链中肽键合成的场所是 C A mRNA B rRNA C 核蛋白体 D 细胞核 E tRNA 37 真核生物蛋白质合成的特点是 A A 先转录 后翻译 B 边转录 边翻译 C 边复制 边翻译 D 核蛋白体大亚基先与小亚基结合 E mRNA先与tRNA结合 38 关于蛋白质合成的终止阶段 正确的叙述是 A A 某种蛋白质因子可识别终止密码子 B 终止密码子是某个特定氨基酸的密码子 C 一种特异的tRNA可识别终止密码子 D 终止密码子是AUG E 肽酰 tRNA在核蛋白体 受位 上脱落 39 转肽酶 D A 需要ATP B 需要GTP C 需要延长因子 D 位于核蛋白体大亚基 E 位于核蛋白体小亚基 40 信号肽段的作用是 C A 指导DNA合成起动 B 指导多肽链糖基化 C 引导多肽链向胞外分泌 D 指导RNA合成起动 E 指导蛋白质合成起动 42 在终止阶段 使新生肽链从核蛋白体释出的原因是 E A 终止因子 B 核蛋白体解聚 C 终止密码子 D 核蛋白体释放因子 E 转肽酶 43 遗传密码的简并性指的是 C A 一些三联体密码可缺少一个嘌呤碱或嘧啶碱 B 密码中有许多稀有碱基 C 大多数氨基酸有一个以上的密码 D 一些密码适用于一种以上的氨基酸 E 以上都不是 44 原核生物蛋白质生物合成中肽链延长所需的能量来源于 B A ATP B GTP C GDP D UTP E CTP 45 下列关于氨基酸密码的叙述哪一项是正确的 C A 由DNA链中相邻的三个核苷酸组成 B 由tRNA链中相邻的三个核苷酸组成 C 由mRNA链中相邻的三个核苷酸组成 D 由rRNA链中相邻的三个核苷酸组成 E 由多肽链中相邻的三个氨基酸组成 五 解释名词题五 解释名词题 每小题每小题 2 2 分分 1 遗传密码 DNA 编码链或 mRNA 上的核苷酸 以三个为一组 三联体 决定一个氨基酸的种类 称为三联体密码 转录和翻译是连续的 因此遗传密码也决定蛋白质的一级结构 2 密码的摆动性 mRNA 上的密码子与 tRNA 上的反密码子相互辨认 大多数情况是遵从碱基配 对规律的 但也可出现不严格的配对 这种现象就是遗传密码的摆动性 tRNA 分子上有相当多的稀有碱基 例如次黄嘌呤 I I 常出现于三联体反 密码子的 5 端第一位 它和 mRNA 上的 A C U 都可以配对 4 核糖体的 P 位 核糖体上有两个在蛋白质合成中 供底物和中间产物结合的位点 P 位 peptidyl site 即肽酰位 合成肽链经转至 A 位 故又称给位 donor site D 位 5 起始 tRNA 因为 AUG 既是起始密码子 又是蛋氨酸的密码子 肽链合成起始 N 端第一个进 入的必然是蛋氨酰 tRNA 因此也称为起始 tRNA initiator tRNA 在原核生 物 起始者 tRNA 上蛋氨酰经甲酰化 这和肽链中部会出现的蛋氨酰 tRNA 就 有区别 7 转肽酶和转位酶 分别催化翻译延长成肽与转位这两个过程 转肽酶催化来自 P 位的氨基 酰基或肽酰基的 CO 与 A 位上氨基酰 tRNA 的 NH2生成肽键 转肽酶还有酯酶 活性 可把肽链与 tRNA 分离开 这种活性在翻译终止时起作用 转位酶催化 已生成的肽酰 tRNA 从 A 位转至 P 位 转位酶即是延长因子 EFG 真核生物的 EF 2 8 释放因子 RF 释放因子是在翻译终止起作用的蛋白质因子 RF 辨认 mRNA 上已到达核糖体 的终止密码 结合于相应的 A 位上 RF 有 3 种 RF 1 RF 2 分别辨认三种不 同的终止密码 RF 3 是酯酶激活物 10 蛋白质的靶向输送 蛋白质合成后定向地到达其执行功能的目标地点 靶向输送是对分泌性 蛋白质而言 11 信号肽 是未成熟分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列 有碱性 N 末端区 疏水核心区及加工区三个区段 七 论述题七 论述题 1 在蛋白质生物合成中 各种 RNA 起什么作用 6 分 mRNA 是翻译的直接模板 以三联体密码子的方式把遗传信息传递为蛋白质的一级结构信息 tRNA 是氨基酸搬运的工具 以氨基酰 tRNA 的方式使底物氨基酸进入核糖体生成肽链 rRNA 与核 内蛋白质组成核糖体 作为翻译的场所 2 试述蛋白质生物合成的延长过程 6 分 蛋白质生物合成延长可分三步描述 1 注册 或称进位 即氨基酰 tRNA 进入核糖体 A 位 是由延长因子 EF T 结合和促进的过程 进位完成后 核糖体 P 位有起始者 tRNA 第二轮以后则为 肽酰 tRNA A 位有下一位的氨基酰 tRNA 2 成肽 在转肽酶催化下 P 位上的肽酰 tRNA 的肽酰 基 R CO 与 A 位上氨基酰 tRNA 氨基酸 NH2成肽 肽链延长一个氨基酸残基 P 位上的 tRNA 脱落 3 转位 新生成的肽酰 tRNA 连同 mRNA 从 A 位前移至 P 位 此过程由转位酶催化 转位后 A 位留 空 回复到可注册的状态 继续下一位氨基酸的加入 3 3 蛋白质生物合成过程蛋白质生物合成过程 蛋白质的合成过程大致分为 5 个阶段 1 氨基酸的激活 2 肽链 合成的启动 3 肽链的延长 4 肽链合成的终止和释放 5 肽链的折叠和加工处理 第四篇第四篇 分子生物学技术与应用分子生物学技术与应用 一 单选型题一 单选型题 每小题每小题1 1分分 1 在分子生物学领域 分子克隆主要是指 A A DNA的大量复制 B DNA的大量转录 DNA的大量剪切 D RNA的大量反转录 E RNA的大量剪切 2 在分子生物学领域 重组DNA又称 D A 酶工程 B 蛋白质工程 C 细胞工程 D 基因工程 E DNA工程 3 在重组DNA技术中 不常用到的酶是 E A 限制性核酸内切酶 B DNA聚合酶 C DNA连接酶 D 反转录酶 E DNA解链酶 4 多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为 D A 平头末端 B 3 突出末端 C 5 突出末端 D 粘性末端 E 缺口末端 5 可识别DNA的特异序列 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为 B A 限制性外切核酸酶 B 限制性内切核酸酶 C 非限制性外切核酸酶 D 非限制性内切核酸酶 E DNA内切酶 6 cDNA是指 A A 在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA B 在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA B 在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D 在体内经反转录合成的与RNA互补的DNA E 在体内经转录合成的与DNA互补的RNA 7 基因组代表一个细胞或生物体的 B A 部分遗传信息 B 整套遗传信息 C 可转录基因 D 非转录基因 E 可表达基因 8 在基因工程中通常所使用的质粒存在于 C A 细菌染色体 B 酵母染色体 C 细菌染色体外 D 酵母染色体外 E 以上都不是 9 就分子结构而论 质粒是 A A 环状双链DNA分子 B 环状单链DNA分子 C 环状单链RNA分子 D 线状双链DNA分子 E 线状单链DXlA分子 10 聚合酶链反应可表示为 E A PEC B PER C PDR D BCR E PCR 11 在已知序列信息的情况下 获取目的基因的最方便方法是 D A 化学合成法 B 基因组文库法 C cDNA文库法 D 聚合酶链反应 E 差异显示法 12 重组DNA的基本构建过程是将 C A 任意两段DNA接在一起 B 外源DNA接入人体DNA C 目的基因接入适当载体 D 目的基因接入哺乳类DNA E 外源基因接入宿主基因 13 催化聚合酶链反应的酶是 E A DNA连接酶 B 反转录酶 C 末端转移酶 D 碱性磷酸酶 E TaqDNA聚合酶 14 将内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属 D A 同聚物加尾连接 B 人工接头连接 C 平端连接 B D 粘性末端连接 E 非粘性末端连接 15 限制性核酸内切酶切割DNA后产生 B A 3 磷酸基末端和5 羟基末端 B 5 磷酸基末端和3 羟基末端 C 3 磷酸基末端和5 磷酸基末端 D 5 羟基末端和3 羟基末端 E 3 羟基末端 5 羟基末端和磷酸 16 重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是 D A DNA聚合酶 B RNA聚合酶 C DNA连接酶 D RNA连接酶 E 限制性核酸内切酶 17 以质粒为载体 将外源基因导人受体菌的过程称 A A 转化 B 转染 C 感染 D 转导 E 转位 20 下列常用于原核表达体系的是 E A 酵母细胞 B 昆虫细胞 C 哺乳类细胞 D 真菌 E 大肠杆菌 21 在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时用 E A 反转录酶 B 多聚核苷酸激酶 C 引物酶 D RNA聚合酶 E 末端转移酶 22 重组DNA技术常用的限制性核酸内切酶为 B A 类酶 B 类酶 C 类酶 D 类酶 E 类酶 23 在分子生物学领域 分子克隆专指 C A 细胞克隆 B RNA克隆 C DNA克隆 D 抗体克隆 E mRNA克隆 24 用于重组DNA的限制性核酸内切酶识别核苷酸序列的 D A 正超螺旋结构 B 负超螺旋结构 C 螺旋结构 D 回文结构 E 锌指结构 25 在基因工程中通常所使用的质粒是 B A 细菌的染色体DNA B 细菌染色体外的DNA C 病毒染色体DNA D 病毒染色体外的DNA E 噬菌体DNA 26 构建基因组DNA文库时 首先需分离细胞的 A A 染色体DNA B 线粒体DNA C 总mRNA D tRNA E rRNA 27 建cDNA文库时 首先需分离细胞的 C A 染色体DNA B 线粒体DNA C 总mRNA D tRNA E rRNA 28 设计聚合酶链反应的引物时 应考虑引物与模板的 C A 5 端特定序列互补 B 5 端任意序列互补 C 3 端特定序列互补 D 3 端任意序列互补 E 中间序列互补 30 确切地讲 cDNA文库包含 E A 一个物种的全部基因信息 B 一个物种的全部mRNA信息 C 一个生物体组织或细胞的全部基因信息 D 一个生物体组织或细胞的全部mRNA信息 E 一个生物体组织或细胞所表达mRNA信息 31 利用聚合酶链反应扩增特异DNA序列重要原因之一是 C A 反应体系内存在特异DNA模板 B 反应体系内存在特异RNA模板 C 反应体系内存在特异DNA引物 D 反应体系内存在特异RNA引物 E 反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用 33 下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是 D A 小型环状双链DNA分子 B 携带有某些抗药性基因 C 在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D 具有自我复制功能 E 获得目的基因 三 填空题三 填空题 每空每空 0 0 5 5 分分 1 通过自动获取或人为地供给外源 使细胞或培养的受体细胞获得新的 这就是转 化作用 DNA 遗传表型 3 一个完整的基因克隆过程应包括 目的基因的获取 的选择与改造 和 连接为重组 DNA 重组 DNA 分子导入 筛选出含感兴趣基因的重组 DNA 转化 细胞 克隆载体 目的基因 载体 DNA 受体细胞 4 限制性核酸内切酶是一类识别并水解 的核酸 酶 双链 DNA 特异序列 内切 5 科学家感兴趣的外源基因又称 其来源有几种途径 化学合成 酶促合成 cDNA 制备的基因组 DNA 及 技术 目的基因 PCR 6 外源 DNA 离开染色体是不能复制的 将 与 连接 构建成重组 DNA 分子 外源 DNA 则可被复制 外源基因 载体 DNA 7 根据克隆载体性质不同 将重组 DNA 分子导人细菌的方法有 及感染 转化 转染 四 名词解释题四 名词解释题 每小题每小题 2 2 分分 1 质粒 是存在于细菌染色体外的小型环状双链 DNA 分子 质粒分子本身是含有复制功能的遗 传结构 能在宿主细胞独立自主地进行复制 并在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 质粒 带有某些遗传信息 所以会赋予宿主细胞一些遗传性状 因为质粒 DNA 有自我复制功能及 所携带的遗传信息等特性 故可作为重组 DNA 操作的载体 5 目的基因 应用重组 DNA 技术有时是为分离 获得某一感兴趣的基因或 DNA 序列 或是为获 得感兴趣基因的表达产物 蛋白质 这些感兴趣的基因或 DNA 序列就是目的基因 又称目 的 DNA 目的 DNA 有两种类型 即 cDNA 和基因组 DNA 7 cDNA 文库 以 mRNA 为模板 利用反转录酶合成与 mRNA 互补的 DNA 即 cDNA 再复制成双链 cDNA 片段 与适当载体连接后转入受体菌 不同细菌包含了不同 mRNA 为模板的 cDNA 分子 或片段 这样生长的全部细菌所携带的各种 cDNA 分子或片段就