第九章-甾体类化合物.ppt

第八章甾体类化合物 C17侧链 一 结构及分类 第一节概述 甾醇类 C21甾类 C3 CH3COOH 甲型强心苷 乙型强心苷 生物合成途径 甾醇 甾体皂苷元 甾体类化合物的颜色反应原理 甾核强酸 无水条件 脱水双键转位形成共体系多烯阳碳离子盐系列颜色1 Liebermann Burchard反应L B反应黄 紫红 褪去 三萜AC2O 浓H2SO4最后 污绿 甾体2 Salkowski反应氯仿 浓硫酸反应CHCL3层 绿色荧光H2SO4 红或兰色 3 Tschugaev反应冰HAC 乙酰氯反应 因结构不同显不同颜色4 Rosen Heimer反应三氯乙酸反应CCL3COOH加热60 显红 紫红色 甾体皂苷 加热100 显红 紫红色 三萜 5 Kahlenberg反应SbCL5反应 紫色 第二节强心苷类 一 概述1 定义 存在天然界的一类具有强心作用的甾体苷类2 临床应用 20 30种西地兰 去乙酰基毛花毛地黄苷丙 C 狄戈辛 异羟基洋地黄毒苷强心灵 黄荚次苷甲 乙及单乙酰黄荚次苷混合物3 应用毒毛旋花子 箭毒 非洲土著各族用海葱 埃及古罗马时用以治疗水肿蟾酥 强心 解毒 消肿 六神丸的主要原料 二 结构与分类 甲型 强心甾烯类 乙型 蟾酥甾烯类 甲型强心苷元以强心甾为母核命名 17位多为 构型 乙型强心苷元以海葱甾或蟾酥甾为母核 一 苷元部分 1 母核分类甲型强心苷 五元不饱和内酯 20 22 五元内酯 内酯乙型强心苷 六元不饱和内酯 20 22六元内酯 内酯 2 四环稠和 一般甾核 顺 反反反强心甾核 顺 反反顺A B多数 順式 5 H 如 洋地黄毒苷少数 反式 5 H 如 乌本苷 3 取代基性质及构象C3 OH 多数 体 順式 少数 体 反式 命名冠以表 epi 字C14 OH 取代C13 CH3 取代 C10 CH3 取代 CH2OH CHO COOH 4 命名 洋地黄毒苷元 3 14 二OH 5 强心甾 20 22 烯 海葱苷元 3 14 二OH 海葱甾 4 20 22 三烯 二 糖部分 C3 OH与糖结合 种类 OH糖6 去氧糖甲醚D 毛地黄糖6 去氧糖 D 鸡纳糖 去氧糖2 6 去氧糖 D 毛地黄毒糖2 6 去氧糖甲醚 D 加拿大麻糖 三 糖与苷元连接方式 型 苷元 2 6去氧糖 x D glc y 型 苷元 6去氧糖 D glc y多 型 苷元 D glc y实例 毛地黄叶 含30多种强心苷苷元R1R2毛地黄毒苷元HH羟基毛地黄毒苷元HOH异羟基毛地黄毒苷元OHH双羟基毛地黄毒苷元OHOH 三 理化性质 一 理化性质1 形状 苷多为无色结晶或无定形粉末C 17位为 构型者味苦 构型者不苦但无强心作用 对粘膜有刺激性2 溶解性 苷可溶于水 丙酮 及醇等极性溶剂 略溶于EtOAC 含醇CHCL3 几乎不溶于醚 苯 石油醚等非极性溶剂 苷元难溶于极性溶剂 易溶于CHCL3 EtOAC等 毛地黄毒苷乌本苷特例 亲脂性苷 毛地黄毒苷 含3个糖 共有5个OH 难溶于水 1 100000 易溶于CHCL3 1 40 亲水性苷 乌本苷 含1个糖 有8个OH 易溶于水 1 75 难溶于CHCL3 3 碱水解反应 1 酰基水解NaHCO2 KHCO2只作用于 去氧糖上的酰基Ca OH 2 Ba OH 2作用于 去氧糖上的酰基 苷元上的酰基 2 内酯环碱解 1 强碱水解内酯开环H 环合 2 强碱 醇溶液 使 20 22 转位 并使分子异构化活性亚甲基异构化物 异构化物 甲型强心苷的活性亚甲基产物可产生显色反应 乙型强心苷在醇性苛性碱中 内酯环开裂生成酯 再脱水生成异构化物 4 脱水反应 叔醇易脱水 C5 OH C14 OHH 脱水苷元 5 苷键水解1 酸催化水解 1 温和酸水解 适于 型强心苷 型强心苷0 02 0 05MOL L苷元 x 去氧HCL 稀醇 30 糖 双糖 此法只能切断 去氧糖苷键 OH糖苷键不能断裂 2 强烈酸水解 适于 型 型强心苷强心苷3 5 HCL 脱水苷元 x 单糖 此法因酸度高 加热时间长 有时需要加压 所以苷元易脱水 3 HCL Me2CO法 Mannich水解 铃兰毒苷HCL Me2CO 室温2周 毒毛旋花子苷元 氯代L rha丙酮化合物2 酶催化水解 只断裂D glc苷键 型 型强心苷酶解次生苷 D glc 型强心苷酶解苷元 D glc例如 型 紫花毛地黄苷A紫花苷酶毛地黄毒苷 D glc 型 紫花毛地黄苷B紫花苷酶羟基毛地黄毒苷 D glc 型 乌沙苷酶解乌沙苷元 L 鼠李糖蜗牛消化酶 混和酶 可水解强心苷所有的苷键 三 显色反应 一 作用于 不饱和内酯环的反应 只适应于甲型强心苷1 legal反应 亚硝酰铁氰化钠 深红或蓝色2 kedde反应 3 5 二硝基苯甲酸 深红3 raymaond反应 间二硝基苯 紫红 蓝色4 Baljet反应 苦味酸 橙 橙红色 注 以上反应均需在醇性NaOH溶液中进行 因此 应先排除遇碱变红的反应 蒽醌以 查耳酮 橙酮等成分 二 作用于 去氧糖的反应 1 keller kiliani K K 反应 试管反应 FeCL3 冰HAC反应 只适于游离 去氧糖或 去氧糖苷现象 HAC层显蓝绿色 界面显红色 对结合在 型强心苷中的 去氧糖和乙酰化的 去氧糖不反应 2 对二甲氨基苯甲醛反应 纸片反应 喷试剂后90 加热30 显红色 分子重排后的缩合反应 3 占吨氰醇反应 xanthydrol 适于任何 去氧糖苷样品 试剂水浴 3 红色4 过碘酸 对硝基苯胺反应 显色剂 样品 喷过碘酸试剂10 后再喷对硝基苯胺试剂深黄色喷5 NaOH MeOH绿色 四 强心苷的波谱特征 一 UV甲型强心苷 内酯 220nm log4 34 乙型强心苷 内酯 295 300nm log3 95 二 IRVC O峰可区别甲型 乙型不同苷元1 甲型强心苷VC O1800 1700cm 1有两个VC O正常VC O1756cm 1 非正常Vc o1783cm 12 乙型强心苷Vc o比甲型强心苷低40cm 1也有正常和非正常峰之分VC O乙型小于甲型 因乙型六元环共轭体系长 五 提取分离 一 提取原生苷 70 80 EtOH提 防止酶解 次生苷 利用酶解后再提 二 纯化1 溶剂法种子 pet脱脂后醇提醇提后回收溶剂pet C6H6等萃取叶子 醇提水沉法去叶绿素 2 铅盐法 适于在40 EtOH中加铅盐沉淀 可沉去皂苷 鞣质等杂质 而强心苷无损失 低于此浓度 强心苷损失 高于此浓度 杂质沉淀差 3 吸附法活性炭 吸附叶绿素等亲脂性杂质4 Al2O3 吸附皂苷 多糖等水溶性杂质 三 分离 1 两相溶剂萃取法 利用分配系数不同进行分离 溶剂分布法 CHCL3MeOHH2O毛花毛地黄苷A1 2251 20不溶毛花毛地黄苷B1 5501 20不溶毛花毛地黄苷C1 20001 20溶CHCL3 MeOH H2O 5 1 5 总苷 1000倍混和溶剂萃取CHCL3层 A B水层 C 2 逆流分配法 分离黄花夹竹桃苷A B采用此法层析法3 亲脂性单糖苷和苷元 吸附层析 硅胶 4 弱亲脂性强心苷 极性相近 DCCC法例如 RR R 黄荚次苷ACHOHH黄荚次苷BCH3HH黄荚次苷CCH2OHHH黄荚次苷DCOOHHH极性 D C A B洗脱顺序BACD 强心苷的生理活性 1 C3 O 糖 可改变强心作用 单糖本身无强心作用2 甾体母核的立体结构与毒性的关系3 强心苷对动物肿瘤有抑制作用 第三节甾体皂苷 一 定义甾体皂苷 steroidalsaponins 是一类由含有27个碳原子的螺甾醇或呋甾醇与糖结合而成的寡糖苷 存在 大多存在于单子叶植物的百合科 石蒜科和薯蓣科等植物中 常用中药知母 天门冬 麦门冬 七叶一枝花等都含有大量甾体皂甙 用途 甾体皂甙元是合成甾体避孕药及激素类药物的原料 二 化学结构分类 依据皂苷元骨架螺甾烷结构中C25的构型和环的环合状态 可将其分为以下四种类型 螺甾烷醇类C25为S构型 FL型neo型 异螺甾烷醇类C25为R构型 FD型iso型 呋甾烷醇F环为开链衍生物 变形螺甾烷醇类F环为五元四氢呋喃环 二 理化性质1 与三萜相似1 性状 甾体皂苷元有较好晶形2 溶解性 皂苷元溶于Pet等亲脂性溶剂 难溶于水 皂苷极性加大 水溶性增强3 表面活性4 与金属沉淀 中性皂苷 可与碱性醋酸铅沉淀2 皂苷与甾醇形成稳定的分子复合物 如胆甾醇 条件 1 3 OH甾醇3 OH或3 OH酰化不能反应2 A B环反式或5位有双键更易于形成 3 显色反应E试剂 盐酸对二甲氨基 A试剂 Ehrlish 茴香醛 螺甾不反应黄色呋甾红色黄色4 呋甾烷醇F环开裂的皂苷不产生溶血作用 且表面活性降低 五 甾体皂苷元的波谱特征 1 UV nm 200 400 饱和甾体皂苷无吸收含单双键205 225 900 含C O285 500 含 不饱和酮基240 11000 含共轭二烯235 2 IR 指纹区可区别C25两种异构体25 F L螺甾烷 B带 921cm 1 C带 900cm 1 25 F D异螺甾烷 C带 900cm 1 B带 921cm 1 3 MS EI MS139 100 基峰 115 m中强峰 126 w弱峰 或 4 NMR 1 高场4个CH3 C18 C19SC21 C27d2 略低场C16 H C26 2H 因与O相邻 处在较低磁场3 其他CH2 CH在1 5 2 5之间呈堆积峰 5 药理活性1 抗炎作用2 抗肿瘤 从云南白药平重楼中分离的甾体皂苷 和 对P388 1210 KB细胞具有显著的抑制作用 3 降低胆固醇 降血脂5 免疫调节6 心血管作用 病由黄山药中提取的甾体皂苷制成的地奥心血康胶囊 防止心脑血管 三 提取分离基本与三萜皂苷相似 只是甾体皂苷一般不含羧基 呈中性 亲水性较弱 甲醇或乙醇提 正丁醇萃 柱色谱 硅胶 sepLH 20 大孔树脂等 中药化学成分预试验 一 预试验的分类 1 系统预试 检查所有大类的成分2 分项预试 根据需要 只检查一类或几类成分二 药材提取方法1 水提冷水 可检查 aa pro热水 60 单糖 多糖 有机酸 苷类 小分子酚类 鞣质 皂苷 aa Pro等 中药化学成分预试验 2 95 EtOH提 各类苷 香豆素 蒽醌 黄酮 酚类 有机酸 萜类 甾体等成分酸醇提 生物碱3 Pet提 挥发油 油脂 萜 甾体三 实验方法 1 试管法进行定性2 PC法进行检测 纸片法 圆形滤纸法