




已阅读5页,还剩22页未读, 继续免费阅读
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
免疫分析 免疫反应 抗原进入机体 刺激机体的免疫系统 使之产生免疫应答 这种反应叫免疫反应 免疫反应应答包括对抗原物质的感应 反应 效应三个连续的阶段 免疫分析 immunoassay IA 在临床检验中 基于抗原与其配对抗体能够发生特异反应 用已知的抗原或抗体检测分析体液中的抗体或抗原性物质 抗原抗体免疫反应特点 高特异性抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间 由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系 所以抗原抗体反应具有高度的特异性 抗原抗体反应的高特异性是免疫学检测的基础 高亲和性抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡 其反应式为 Ag Ab Ag Ab 高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合 两者结合牢固 不易解离 免疫学检测 免疫学检测是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原 抗体 免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验手段及分子生物学技术在免疫学研究中的应用 它包括 抗原抗体的检测技术免疫细胞的检测细胞因子的检测免疫相关基因分析免疫标记技术免疫PCR IM PCR 技术杂交瘤技术与T细胞克隆技术 1977年诺贝尔生理学或医学奖得主雅洛Yalow 雅洛1921年出生于纽约 1945年获得核物理学博士学位 1975年当选美国科学院院士 因为发明了放射性免疫分析法 雅洛获得1976年的拉斯克基础医学奖 成为历史上第一位获得该奖的女性科学家 次年 她因为与同事合作开发了 针对多肽类激素的放射性免疫分析法 而成为诺贝尔生理学或医学奖史上第二位女性获奖者 免疫分析标记技术的发展 化学发光 化学发光 由于化学反应 通常是氧化 底物从基态跃迁为激发态 激发态返回基态时 跃迁能量以光子形式释放的现象 化学发光免疫分析技术是将化学发光体系与免疫反应相结合 用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术 美国临床化学会议规定 凡是通过测量光子计数的方法都是化学发光 包括通过酶促luminol发光 化学发光免疫分析1980 s进入体外诊断领域 第一台全自动检测仪1993年诞生 化学发光免疫分析技术 发光免疫分析基本操作步骤 一步法 鲁米诺化学发光系统 吖啶酯化学发光系统 吖啶酯化学发光系统 碱性磷酸酶化学发光系统 化学发光按化学反应类型分为 直接化学发光 非酶促化学发光 吖啶酯系统异鲁米诺系统间接化学发光 酶促化学发光 辣根过氧化物酶 鲁米诺系统 HRP系统 碱性磷酸酶 金刚烷系统 AP系统 其它电化学发光 化学发光的检测类型 直接化学发光 以化学物质 如异鲁米诺 吖啶酯等直接标记抗原或抗体 免疫反应后 直接引发化学发光反应进行检测 产品 吖啶酯标记 西门子SiemensCentaurXPCP雅培AbbottArchitecti2000异鲁米诺标记 索林DiaSoinLiaison新产业 直接化学发光 间接化学发光 用参与发光反应的酶来标记抗原或抗体 免疫反应后 加入发光底物 测定发光体系的发光强度来进行抗原或抗体的检测 两大反应体系 辣根过氧化物酶 HRP 系统 氧化还原反应 稳定性差源德 科美 安图碱性磷酸酶 AP 系统 水解反应 灵敏度较高贝克曼 Access1 Access2 DXI600 DXI800西门子 Immulite1000 Immulite2000达成生物 AULIN200 间接化学发光 以碱性磷酸酶系统为例 电化学发光 一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应 直接由三联吡啶钌 Ru bpy 3 2 标记抗体 反应时标记物直接发光 产品 Roche Elecsys2010 COBASe411 COBASe601 电化学发光 第一代 鲁米诺及其衍生物第二代 直接标记 吖叮酯标记间接标记 碱性磷酸酶 金刚烷系统电化学发光 三联砒啶钌 化学发光的发展史 国际主流免疫诊断公司均采用第二代化学发光标记物 吖啶酯 雅培 西门子 碱性磷酸酶 金刚烷 贝克曼 西门子 三联砒啶钌 罗氏 化学发光按检测方式分为 随机处理模式 管式化学发光 磁微粒分离 批处理模式 板式化学发光 物理吸附 化学发光的检测方式 适合流行病调查 疾病预防与控制 体检中心 以及医院血站等大样本检测项目的使用 比如HIV TP HCV和乙肝两对半等 通常采用96孔白色不透明微孔板进行包被 不方便随到随测和医院急诊 对于定量检测需要做标准曲线 国内厂家主要是板式化学发光系统 板式化学发光 采用管式或微粒子发光 测定快速 准确 可以随到随测 适用于医院急诊 定量检测的标准曲线存储在试剂条形码中 可在2 4周内直接使用 国外厂家全部是管式化学发光系统 管式化学发光 磁微粒示意图 磁微粒分离技术特点 较微孔板扩大抗原抗体结合表面积 增加抗原或抗体的结合量 提高检测灵敏度 加快反应速度 迅速捕获抗原抗体 易于结合相 游离相的分离 提高检测准确性 提高发光强度 快速达到稳定发光 管式化学发光大多用磁微粒 板式化学发光使用微孔板载体 磁微粒分离技术 化学发光免疫分析技术的优越性 灵敏度高 CLIA灵敏度可达10 16 21mol L RIA为10 12mol L 又如化学发光底物 如AMPPD 可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏50万倍 几种标记 检测技术灵敏度的比较 化学发光免疫分析技术的优越性 几种标记 检测技术线性范围的比较 线性范围宽 发光强度在4 6个数量级之间 与测定物质浓度间呈线性关系 这与显色的酶免疫分析吸光度 OD值 为2 0的范围相比 优势明显 也优于放射免疫分析技术 化学发光免疫分析技术的优越性 几种标记 检测试剂的有效期比较 试剂有效期长 有效期可长达1年以上 放射免疫分析由于放射性同位素的衰变 一般有效期只有一个月 而酶免的底物贮存性差 都无法与化学发光相比 有效期长可以降低使用成本 利于推广应用 安全性好 彻底消除了放射性危害 环保 安全 到目前为止 还未发现CLIA的危害性 光信号持续时间长 辉光型 glowtype 的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天 简化了实验操作及测量 容易实现连续 动态 重复测定 分析方法简便快速 绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂 或复合试剂 的一步法 容易实现自动化 结果稳定 误差小 样品系直接自己发光 不需要任何光源照射 免除了各种可能因素 光源稳定性 光散射 光波选择器等 给分析带来的影响 使分析结果灵敏稳定可靠 化学发光免疫分析技术的优越性 甲状腺激素生殖激素肾上腺 垂体激素贫血因子肿瘤标志感染性疾病
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 物品买卖合同协议书范本
- 收购委托代理协议书范本
- 农村房屋遗产协议书范本
- 二零二五年度绿色食品包装定制设计合同
- 2025版厂房土建工程施工合同(含安全防护)范本
- 2025版餐饮业原料供应合同书
- 河南一地事业单位二零二五招聘100人合同文本标准
- 2025版财务人员责任追究与职业操守担保协议
- 2025版安置房房票中介服务收费标准合同
- 二零二五年度残疾人就业权益维护服务协议
- YY/T 1623-2018可重复使用医疗器械灭菌过程有效性的试验方法
- GB/T 28055-2011钢质管道带压封堵技术规范
- GB/T 23936-2018工业氟硅酸钠
- GB/T 1874-1995磷矿石和磷精矿中酸不溶物含量的测定重量法
- GB 30980-2014海洋倾倒物质评价规范疏浚物
- GA/T 1393-2017信息安全技术主机安全加固系统安全技术要求
- 尼可地尔临床应用优势课件
- 超星尔雅《诗经》导读检测题答案
- 地源热泵埋管冬夏季换热平衡计算
- 湖北省职称评审专业目录表(工程系列)
- 中考《红星照耀中国》各篇章练习题及答案(1-12)
评论
0/150
提交评论