AFPELISA—基本概述

1,甲胎蛋白（AFP）测定试剂盒（酶联免疫法）简称：AFP ELISA KIT沈上安2014.12.08,,AFP ELISA KIT,产品概述：名称、原理、组成、用途等,主要内容,产品生产及检验：制备、检验相关,一、产品概述,产品名称,通用名称：甲胎蛋白（AFP）测定试剂盒（酶联免疫法）英文名称：Alpha fetoprotein (AFP) assay kit (ELISA)简称：AFP ELISA KIT,产品类别,分类依据：体外诊断试剂注册管理办法（总局5号令）产品类别：按医疗器械管理的第三类体外诊断试剂,产品组成,详见样品实物,产品保存及效期,储存条件：于28中储存，避免冷冻。产品效期：于储存条件下的有效期为12个月。启用后于储存条件下的有效期为3个月。,产品组成类似产品图 1,产品组成类似产品图 2,产品组成类似产品图 3,产品组成类似产品图 4,产品组成类似产品图 5,产品组成类似产品图 6,预期用途,预期用途：适用于体外定量测定人血清中AFP的浓度适用范围：医院检验科、体检中心、科研单位、高校及健康管理机构等。,预期用途TM简介,肿瘤标志物(Tumor Marker，TM)：是反映肿瘤存在和生长的生化物质，包括蛋白质、激素、酶、多胺及癌基因产物等，由于TM存在于患者的血液、体液、细胞或组织中，可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法进行测定。,预期用途TM用途,TM用途：肿瘤早期发现及高危人群的筛查肿瘤的诊断、鉴别、分期 肿瘤疗效观察及预后评估肿瘤复发的预测及复发部位监测肿瘤的预后判断,预期用途恶性肿瘤,恶性肿瘤：即癌症（Cancer）2014年2月3日 WHO报告全球癌症报告2014（World Cancer Report 2014），对全球180多个国家的28种癌症进行总体分析：全球2012年癌症病例为1400万，预计未来20年上升到2200万例/年；中国新增307万例/年,死亡220万例/年，分别占全球总量的21.9%和26.8%.WHO最新权威性结论：癌症患者如果能早期发现，治愈率可达80。,预期用途 AFP概述,甲胎蛋白(AFP)：是一种由胚肝和卵黄囊及胃肠道等合成的胚胎性单链多肽。人类的AFP属于球蛋白，由18 种氨基酸组成，碳水化合物约占4%，分子量约64 72 kD，半衰期约为5d。AFP为最常见、应用最多的TM之一,AFP升高因素,妇女妊娠：正常情况下，人甲胎蛋白(AFP)主要在胎儿肝脏中合成，妇女妊娠期间AFP主要通过脐带进入母体的羊水和血液中。恶性肿瘤：肝癌、生殖系统肿瘤、消化道肿瘤、其他疾病。约70%95%的非妊娠成人肝癌患者血清中AFP浓度异常升高。特别注意：约20%的肝癌患者AFP浓度始终处于正常水平。,临床意义肝癌诊断,肝癌诊断：主要用于原发性肝癌的辅助诊断、评估、监测、预后、治疗、随访等。诊断依据：卫生部：原发性肝癌诊疗规范（2011年版),临床意义肝癌诊断,临床诊断：正常：AFP血清浓度20ng/ml；肝癌：AFP血清浓度400ng/ml并持续1个月、 或AFP血清浓度200ng/ml并持续2个月， 高度怀疑肝癌。可结合影像学检查、病理学活检等明确诊断。注意：因能排除其他因素引起的AFP浓度异常升高（如：妊娠、生殖系统胚胎性肿瘤等）。,临床意义产前筛查,产前监测：用于胎儿先天性疾病（如：唐氏综合征、神经管缺损、脊柱裂、无脑症、食管闭锁、多胎等）的辅助诊断、评估、监测等。监测依据：,临床意义其他辅助诊断,生殖细胞瘤诊断：可用于生殖细胞瘤的辅助诊断、评估、监测等。人绒毛膜促性腺激素（HCG）与甲胎蛋白（AFP）是评估进展期非精原细胞瘤患者生存率的两个重要指标。,临床意义其他辅助诊断,消化道肿瘤诊断：可用于消化道肿瘤的辅助诊断、鉴别，如胃癌、胰腺癌、结肠癌、胆管细胞癌等。部分消化道肿瘤AFP浓度可一定程度的异常升高。其他疾病诊断：可用于一些其他相关良性疾病的辅助诊断、鉴别，如肝炎、肝硬化、先天性胆管闭塞等。相关良性疾病AFP浓度通常为一过性升高，且浓度常200ng/ml.,临床意义联合检测-国内,临床意义联合检测-国外,临床意义理性思考,AFP浓度升高：因素很多，分正常和异常升高；AFP浓度与肿瘤关系：个体不同阶段AFP浓度高低对疗效、复发等具有重要参考价值，但与肿瘤的大小、生长、分期、恶性程度等目前尚无明确关系，如：AFP浓度越高肿瘤越大。 用于体外辅助诊断用，不得作为唯一诊断依据。AFP浓度检测应用：具有广谱、非专一性，不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。AFP浓度检测方法：还有化学发光法、放射免疫法、时间分辨法等。,方法原理,方法：采用酶联免疫法(ELISA)的双抗体夹心法于体外定量测定人血清中AFP的浓度。原理：基于抗原抗体特异性免疫反应和酶促底物显色的原理。,方法原理简述,原理简述：将AFP抗体包被于固相的微孔板中并保持其免疫学活性，经免疫反应形成固相AFP抗体AFP抗原AFP抗体标记辣根过氧化物酶（HRP）的复合物；显色底物系统在HRP的催化下显色。终止显色反应后用酶免分析仪检测吸光度值（OD值）；根据校准品作标准曲线，计算各样本AFP浓度。,方法原理抗体简述,抗体简述：机体免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于组织液及外分泌液中。,方法原理抗体图1,方法原理抗体图2,方法原理酶标板图1,方法原理酶标板图2,方法原理酶标板图3,方法原理图1,方法原理图2,方法原理图3,方法原理图4,方法原理图5,产品配套应用全自动,全自动系统：国内外均有专业的配套全自动系统，可实现检验、分析、报告的一体化。,产品配套应用全自动,产品配套应用半自动,半自动系统：国内外均有半自动仪器，需要一定程度的人工配合。,产品配套应用半自动,产品配套应用人工操作,人工操作：ELISA法可实现全程纯人工操作方式，而化学发光、放射免疫、荧光法等必须依赖专业仪器完成检测。,行业市场概况试剂比例,行业情况：同一目标物质有多种方法学检测同时存在，主导方向：传统生化诊断向免疫诊断及基因诊断转变。,行业市场概况需求量大,市场需求：全球每年恶性肿瘤患者病例2200万，死亡1700万人（其中约1/4发生在中国）；肝癌死亡率为最高的10种癌症的首位，中国每年因肝癌死亡的人数占全球40%。中国每年孕妇约为1500万，产检率约为90%95%，而其中做唐氏筛查的不足50%（欧洲已达80%）；中国目前体检的人次约为4亿，随着健康意识和疾病防患认知的提升，将会极大增长；国家相关政策的扶持和生物医药产业长期规划。预计2016年中国IVD市场超300亿元，增速约20%。,行业市场概况需求量大,2012-2018全球IVD市场规模（亿美元）：,行业市场概况竞争激烈,市场竞争：全球市场份额以欧美为主、竞争激烈、垄断现象明显；高端市场基本被国外罗氏（Roche）、雅培（Abbott）等巨头占领，国产介入困难； 高端市场主要指全自动化学发光产品。中低端市场极为复杂、个地区差异巨大；国内市