组织学与胚胎学-第1章-绪论.ppt

人民卫生出版社组织学与胚胎学 人体解剖与组织胚胎学系 绪论 一 组织学的研究内容 组织学 histology 研究机体微细结构及其相关功能的科学 它是以显微镜观察组织切片为基本方法 又称显微解剖学 二 内容 1 基本组织 总论 2 器官 系统 各论 细胞 cell 细胞外基质 由细胞产生的非细胞物质 组织Tissue 器官organ 系统 人体 4种组织按一定规律组合形成器官 上皮组织EpithelialTissue结缔组织ConnectiveTissue肌组织MuscularTissue神经组织NervousTissue 基本组织 形态相似 功能相近的细胞和细胞外基质构成组织 基本单位 新陈代谢 生长发育 繁殖分化的形态基础 三 组织学常用计量单位 mm 1000 m m 1000nm 问题解决方法观察对象太小放大显微镜观察对象无色 无反差染色 HE染色 观察对象生化成分不同细胞化学 免疫组织化学观察对象是活体培养 四 组织学研究技术 一 一般光学显微镜术 应用一般光学显微镜观察组织切片 组织切片标本 载玻片 盖玻片 组织 研究技术 lightmicroscope LM 长度单位 m 分辨率 0 2 m 石蜡切片法 Paraffinsectioning 1 LightMicroscopy LM 用显微镜观察组织切片为最常用方法 标本要求 保持生活状态时的形态结构 能透光 易分辨不同结构 1 HE染色的石蜡切片制作过程 固定脱水包埋切片染色封片 固定 保持生活状态时的组织结构和成分 用固定剂如酒精 甲醛 混合固定剂 通过凝固蛋白或分子间的交联而起固定作用 脱水 上行梯度酒精脱水 防止组织收缩 自动脱水机 包埋 自动包埋机 包埋材料 光镜 石蜡 火棉胶 电镜 树脂 切片 切5 7 m厚切片机 Microtome Eosin伊红酸性染料 粉红色 带阴电荷 碱性物质 结合嗜酸性 Hematoxylin苏木精碱性染料 蓝色 带阳电荷 带阴电荷 物质结合染成蓝色嗜碱性 HE染色 封片 HE染色 苏木精 染色质 核糖体 伊红 细胞质 细胞外基质 HE染色切片标本 皮肤 卵巢 2 其他制片技术 涂片 铺片 磨片等 磨片牙和骨等坚硬组织可磨成薄片 涂片血细胞和分离培养的细胞可直接涂在玻片上制成 血涂片 铺片 疏松结缔组织和肠系膜等软组织可撕成薄片铺在玻片上 铺片 磨片 银染法 硝酸银 氯化金等重金属盐 其微粒附着在细胞或组织结构表面 而呈棕黑色或棕黄色 小脑蒲肯野细胞 3 特殊染色方法 银染法 铁苏木精染色等 二 电镜技术 electronmicroscope EM EM的原理和LM相似 但用电子束代替光线 磁场代替玻璃透镜 二 电子显微镜术 电子显微镜下才能看到的结构称超微结构 1 透射电镜 电子密度高 电子密度低 2 扫描电镜 分辨率 0 2nm 计量单位 nm 纳米 透射电镜 transmissionelectronmicroscope 观察细胞内部结构扫描电镜 scanningelectronmicroscope 观察组织或细胞表面的立体结构 中性粒细胞 透射电镜 黑白反差结构影像 影像较黑称电子密度高 反之称电子密度低 三 组织化学 细胞化学 术Histochemistry Cytochemistry 化学 物理 生物化学 免疫学 分子生物学原理和技术 组织学技术 显示组织和细胞内化学成分的性质 位置 量的变化与功能的关系 1 概念 一般组织化学术免疫组织化学术原位杂交术 2 分类 肝细胞的ACP 酸性磷酸酶 化学反应 有色沉淀 1 一般组织化学技术 PAS反应显示肝细胞内糖原 2 免疫细胞化学技术Immunocytochemistry 用免疫学的抗原与其抗体特异性结合的原理 显示组织细胞内的肽或蛋白质 此法特异性强 灵敏度高 在基础与临床研究中得到广泛应用 直接法 间接法 Ag AbAg Ab 标记抗体 显色 免疫组织化学染色 免疫荧光染色 3 原位杂交 InSituHybridization原理 根据核酸DNA RNA中的互补碱基专一配对的原理 检测 细胞内DNA和mRNA序列片段 原位研究细胞合成多肽或蛋白质的基因转录物mRNA表达 原位杂交原理 四 4 组织培养技术TissueCulture将离体的细胞 组织在体外合适的条件下培养 使其生存和生长的技术 研究各种理化因素对其生长代谢的影响 条件 适宜的营养 生长因子 PH值 渗透压 O2和CO2浓度 温度等 还须严防微生物的污染 原代培养 首次培养的细胞 传代培养 细胞增殖到一定密度 需进行传代再培养 培养液 培养基 5 10 胎牛血清 培养的神经细胞 四 放射自显影术 五 图象分析术 六 组织工程 组织工程 TissueEngineering组织工程是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织和器官的技术 四要素 种子细胞 生物材料支架 构建组织或器官 移植 我国的曹谊林和Vacanti等在裸鼠背上成功的制造了人耳形和狗耳形 三 组织胚胎学在医学中的地位及学习方法 一 地位 为什么要学习组织胚胎学 1 组织学又叫微观解剖学 Microanatomy 是解剖学知识的进一步完善 2 结构是功能的基础 学好组织学是学好生理学 Physiology 的基础 3 只有了解正常结构 才能学习其异常变化 因此组织学是病理学 Pathology 的基础 4 是相关临床课程基础5 组织胚胎学学成绩不及格 必须补考 重修和留级 排卵 早期胚发生及其与女性生殖道关系模式图 子宫内膜 子宫肌层 子宫外膜 卵巢 发育中的卵泡 阔韧带 受精 受精卵进行卵裂并逐渐向子宫运行 胚泡开始脱离透明带 胚泡与子宫内膜接触准备