血球知识汇总

1 什么是库尔特原理 库尔特原理就是我们现在统称的电阻抗原理 他的内容是这样的 将细胞用等渗电解质溶液稀释后倒入不导电容器中 将小孔管插入细胞悬液 内外 电极通过电解质溶解形成电路 电流接通后 内外电极产生稳定的电流 细胞悬液通 过小孔向小孔内流动 细胞通过小孔时 由于电阻增加 电压瞬间变化而出现一个脉 冲信号 脉冲信号的大小代表细胞的体积 多少代表细胞的数量多少 2 什么是 VCS 检测原理 V volume 应用电阻抗原理测量细胞体积的技术 C Conductivity 根据细胞壁能产生高频电流的性能 采用高频电磁探针 测量细 胞内部结构 即一细胞核和细胞质的比列 细胞内颗粒的大小和密 度 来辨别体积相同 但性质不同的两个细胞群体 如淋巴细胞和 嗜碱性粒细胞 两者直径均在 9um 12um 但当高频电流检测时 可根据两种细胞的核浆比不同而呈现不同检测信号进行区分 S light scatter 来自激光源的单色光直接扫描进入计数敏感区的每个细胞 根据细 胞产生的不同角度的散射光 10 70 可提供细胞形态 核结 构等光散射信息 并能鉴别细胞颗粒的构型和质量 粗颗粒的光散 射要比细颗粒的光散射要强 光散射可区别粒细胞的 中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 嗜酸性粒细胞 的类型 利用 VCS 三种技术对每个同时检测 然后进行分类 3 白细胞分类散点图如何形成的 将检测过的 8 192 个细胞分布到一个以 V C S 为三维坐标的空间内 显示出细胞 群特征 高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置 相对密度 轮廓 和大小 三维坐标的数据分析位点多过 16 106个 如图所示 4 VCS 技术对细胞进行分类散点图上所显示的 DF1 DF2 DF3 分别代表什么意思 我们在用 VCS 技术对白细胞进行分类的散点图上的 DF1 代表体积值和散射光值 DF2 代表 体积值和电导值 DF3 代表体积值和电导值 但除去了嗜酸性粒细胞和中 性粒细胞部分 只显示嗜碱性粒细胞群 5 贝克曼库尔特常用质控品的特点 常用的库尔特质控品有全血带白细胞五分类的三水平质控品 5C 质控 乳胶质控品 网织红细胞质控品 在仪器相关菜单里有相应的质控文件 5C 质控是人造全血 其成 分模拟全血中各类细胞 用以监控仪器的全血计数和白细胞分类准确度 乳胶质控品为 人造的一定规格的乳胶颗粒 用以监控流式通道分类探针的精准度 网织红细胞质控品 是人造全血 其成分模拟全血中红细胞和网织红细胞 用以监控仪器对网织红细胞检测 的准确度 6 质控品出控分析及解决措施 可能性可能性措施措施 混匀不恰当重新对质控品进行 8 8 8 式混匀 再检测 在质控文件中设置的数据有误确认质控文件中的设置数据 若有错 则改之 偶然性出控 统计学允许 重新检测 如果结果依然超出范围 考虑下一个因素 质控品问题 如 过期 被污染和变质换一瓶或换一个批号的质控品再试 仪器问题请公司的工程师帮助解决 可能的话先检查标本流程 7 什么是 XB 质控方法 XB 分析是一种通过追踪记录所有病人标本结果当中的 MCV MCH MCHC 来监测仪 运 行的运行 校正 的质控方法 8 什么是 IQAP IQAP Interlaboratory Quality Assurance program 是贝克曼公司 28 年前由库尔特公 司创立的 在使用库尔特的质控品和校准品检测后 将数据提交至贝克曼库尔特 您的实 验室将收到一个与同群实验室 使用相近的仪器 相同批号的质控品 比较的统计学的报 告 利用这个报告帮助我们发现仪器或校准方面可能存在的问题 并且这个帮助是免费的 9 IQAP 如何操作 通过 www beckman 网站索取相应仪器的专用的识别编号 确认质控文件内现在运行的质控批号等信息的准确性 仪器自动 每天在仪器上正确的质控文件下运行质控物 监测仪器的性能表现 仪器自动 建 议每个班次都运行质控物 1 2 或 3 个班次 天 对于 4C 白细胞碎片 冷球蛋白 大血小板 血小板凝集 卫星血小板 血小板大小不一 输血后 电磁波或噪音干扰小孔计数 处理方法 处理方法 手工涂片镜检血小板 16 RDW 是什么意思 导致出现 R 的原因是什么 如何处理 RDW 是指红细胞计数时仪器计数 24fl 360fl 的颗粒 绘出直方图 正常红细胞直 方图应为两端封闭 单峰 呈高斯状分布的曲线 RDW 反应红细胞大小分布的偏离情况 其意义相当于 CV 变异系数 导致出现 R 的原因 输血 红细胞凝集 红细胞碎片 大血小板 血小板凝集成块 处理方法 涂片镜检红细胞是否大小不一 17 白细胞计数值后出现 R 的说明什么 I 说明白细胞在 35fl 处的检测受到干扰 II 在白细胞计数孔有 35fl 大小的颗粒通过并被当作白细胞计数 且超过一定数量 触 发报警 III 在白细胞直方图上看 在 35fl 处曲线上抬 18 导致白细胞计数 R 出现的可能原因是什么 如何处理 小白细胞 红细胞 冷球蛋白 抗溶红细胞 小巨核细胞 大血小板 血小板聚集 溶血剂输送系统故障 处理方法 处理方法 手工复片镜下检查白细胞 检查溶血剂输送系统有无故障 19 Hb 检测用的是什么试剂 有什么优点 Hb 检测用的是改良的氰化高铁血红蛋白试剂 检测过程中溶血剂令红细胞破碎溶解 并将血红蛋白转换为氰化血红蛋白 然后进行检测 优点 是 ICSH 和 WHO 推荐的标准测定方法 没有来自磺基血红蛋白的干扰 多重试剂空白 20 Hb 是怎么测出来的 用 CBC Lyse 溶血剂使红细胞破碎溶解 并将血红蛋白转换为氰化血红蛋白 在比色池用波长 525nm 光进行比色 稀释液进入比色池 进行空白读数 blank 样本进入比色池 进行样本读数 read 根据 Blank 及 Read 的值 计算出 HGB 的值 21 红细胞平均指数包括哪些内容 红细胞平均指数包括 MCV 红细胞平均容积 指每个红细胞平均体积的大小 仪飞升 fl 为单位 MCH 红细胞平均血红蛋白含量 指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量 以 皮克 Pg 为单位 MCHC 平均血红蛋白浓度 指平均每升红细胞中所含的血红蛋白的浓度 g l 22 MCV MCH MCHC 计算公式是什么 MCV Hct RBC MCH Hb RBC MCHC Hb Hct 23 Scatter Pak 双试剂系统的作用是什么 Scatter Pak 中有两个试剂包 一个是 E Lyse 另一个是 S Lyse 他们的作用分别 是 在分类过程中仪器首先加入 E Lyse 通过渗透压的不同首先把红细胞先溶解 然后加 入 S Lyse 将溶解终止 并将白细胞恢复到和在人体内形态大小相同的状态 这样在进行 分类的检测 24 流体动力聚焦系统的作用是什么 a 使单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式通道 b 将重叠限制到最低限度 25 库尔特计数的七项专利技术都是什么 三次计数 延长计数 扫流技术 重叠校正 脉冲编辑 拟合曲线 PLT CAD CAM 小孔激光生产技术 26 请问扫流技术 重跌校正 脉冲编辑的作用分别是什么 扫流技术避免细胞通过小孔后回流 重跌校正可以对同时通过小孔的 2 个细胞产生的脉 冲进行校正 脉冲编辑排除不典型脉冲对测量细胞大小的干扰 27 请问什么是三次计数 三次计数是指 beckmancoulter 血细胞分析仪在做 WBC RBC PLT MCV MPV RDW 的检测时报如果三次检测结果相近 则取三次检测结果的均值作为报告数值 如果三次结 果中有两次结果接近 一次与另外两次有差距 则取两次接近的均值作为报告数据 如果 出现三次结果都有较大的差异 则会显示为 说明样本有血小板聚集 必须重新 采样检测 这样排除样本对结果的干扰 保证了检测结果的准确性 28 延长计数有什么作用 是指当检测遇到较低浓度的标本时 仪器会根据标本的浓度自动延长计数 这样保证 了 低浓度标本计数的准确性 29 什么是智能动力系统 根据实验室环境条件 仪器自动对加入试剂的温度 加入试剂的量 试剂与细胞的反 应时间 从流式通道获取数据的时间 进行调整 并能自动屏蔽分析环境的内 外源噪音 节约实验室开机准备和检测的时间 并提高了检测的准确性 30 请问 MCV 是算出来的还是测出来的 在 beckmancoulter 血球分析仪中 LH 系类的血球仪 MCV 都是测出来的 而 5DIFF 系 类的都是通过测量 HCT 然后计算出 MCV 的 31 什么是 NRBC NRBC 是指有核红细胞 有核红细胞也叫幼稚红细胞 包括原始红细胞 早幼红细胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 原始红细胞 早幼红细胞体积大 20 16um 核大 胞浆少 无血红蛋白 无明显核仁 中幼红细胞至晚幼红细胞胞内渐出现血红蛋白 体积渐减小至 正常水平 8 12um 核渐缩小至脱核 晚幼红细胞之后渐形成无核的细胞如网织红细胞 再分化发育成成熟红细胞 6 9um 32 代码 出现的意义是什么 在白细胞五项分类及网织红细胞计数中 当流式通道堵塞产生 代码 在散点分布图上可有三种堵塞报警 FC 完全堵塞 PC1 流式通道或标本通道部分堵塞 PC2 鞘液系统部分堵塞 33 导致 PC 的原因 以及处理方法 FC 完全堵塞 PC1 流式通道或标本通道部分堵塞导致分类时间延长 PC2 红细胞未完全溶解导致分类时间缩短 或鞘液系统问题 临床上高胆固醇和高 甘油三酯血症 血红蛋白病 药物治疗后 进行性肝病等都可导致 PC2 处理方法 I 手工涂片分类 II 用乳胶和 5C 质控清洗流式通道 查看 ScatterPak 液有否过期 检查 ScatterPak 液输送系统有无故障 34 代码 出现的意义 出现代表三次计数不统一 可能导致的原因 小孔堵塞或部分堵塞 标本有凝块或丝状纤维蛋白 白细胞聚集 红细胞凝集 大血小板 血小板凝集 标本稀释后未气泡混匀 处理方法 参照维修手册清洗小孔 检查标本状况 35 代码 出现的意义 出现表示不完全计数 通常当一个参数由于三次计数不统一或超过范围得不到确切数值时 其衍生参数后 将出现 如 WBC 则其衍生参数 NE LY MO EO BA 后将出现 出现也可表示吸样错误 当发生吸样错误时 所有参数的结果后都会带有 导致的可能原因有 样本有凝块 堵塞吸样针 样本量不够 样本的 RBC 和 HGB 浓度过低 严重贫血病人标本 仪器吸样系统堵塞 处理方法 查看样本有无凝块 量是否够 对于严重贫血病人样本采用手动进样方式 检测仪器吸样系统 36 和 分别代表什么意思 代表结果超出仪器线性范围 根据试验室的规程处理标本 结果超出仪器的操作范围 根据试验室的规程处理标本 37 电源箱各项指标的水平有什么要求 各项指标实际水平显示在显示器上 指标水平随着变化自动更新 60PSI 压力水平 实际应在 60 5PSI 30PSI 压力水平 实际应在 30 1PSI 5PSI 压力水平 实际应在 5 0 1PSI 真空水平 应该至少在 22 in Hg AC 线路 输入电压 水平 应该在 105 V 和 125V 或 210 V 和 250 V 之间 38 血常规检测标本采集应注意什么问题 静脉取血后立即和抗凝剂混匀 颠倒混匀 注意抗凝剂与血的比例 取血后需室温放置 20 30 分钟后 再上机检测 标本静置超过 3 小时 须重新建立平衡 标本经冰箱保存后 须重新建立平衡 39 样本储存的要求是什么 用做计数和白细胞分类的样本 若标本采集后储存于室温下 应于 24 小时之内 测定 若标本采集后储存于 2 8 应于 48 小时之内测定 用于网织红细胞分析的样本 若标本采集后储存于室温下 应于 24 小时之内测 定 若标本采集后储存于 2 8 应于 72 小时之内测定 40 什么叫网织红细胞 网织红细胞 reticulocyte RET 是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细 胞 胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸 RNA 经煌焦油蓝等活体染色后 嗜碱性物质凝聚成蓝 色颗粒 颗粒与颗粒连缀成线 线连接成网故而得名 41 网织红细胞的试剂是如何工作的 i 非荧光染料 新亚甲蓝来沉淀网织红细胞内的 RNA 网织红细胞染色是为了把网织 红细胞与成熟红细胞区分开来 ii 脱蛋白溶液 酸性 低渗 在血液与新亚甲蓝混匀孵育一段时间后加入将网织红细胞 内的血红蛋白除去 而保留着色的 RNA 红细胞肿胀成球形但不胀破 iii 漂清本底后 以 VCS 技术在增强型流式通道内对细胞进行分析 即同时采用体积 传导性和光散射三维分析来确定细胞并将其分类 42 VCS 如何检测网织红细胞的 运用 VCS 三维技术分析染色后的红细胞 a 低频波检测细胞体积 b 高频波 阻光性 检测细胞的内部成分 可剔除非红细胞颗粒 c 激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来 网织红细胞胞浆含较 RNA 物质 散射较多的激光 在散点图上分布于红细胞的右侧 d 网织红细胞成熟度越差 在散点图上分布越靠右 检测与白细胞分类共享一个流式通道 43 什么是 IRF IRF 是指未成熟网织红指数 定义为幼稚的或者未成熟的网织红细胞与总的网织红细 胞的比值 未成熟的网织红细胞较大 按照光散射的分类就是具有最强的散射特性 即最 多的 RNA 的网织红细胞 44 临床各种疾病 IRF 的临床应用以及和网织红计数的关系 IRF 未成熟网织红细胞 也称移动或张力细胞 未成熟网织红细胞在大量的促 红细胞生成素的刺激下会释放到外周血中 如出血 某些贫血或对刺激骨髓造血治疗 的反映 IRF 类似于中性粒细胞的核左移 能够提供额外的红细胞信息 这些信息可 以缩短疾病从诊断到治疗或单纯的治疗时间 IRF 在其他方面的临床应用包括 a 监测骨髓移植后干细胞再生情况 b 监测强度化疗后骨髓再生情况 c 监测铁 维生素 B12 和叶酸治疗 d 监测毒性药物对骨髓的影响年 e 通过促红细胞生成监测肾脏移植 f 对贫血进行分类和评价 g 监测新生儿输血 h 检测再障危象 i 提高贫血的分类 诊断和治疗 临床疾病IRF网织红细胞计数 骨髓移植升高降低 溶血性贫血升高 升高 缺铁性贫血升高 正常到降低 B12或叶酸缺乏 升高正常到降低 近期出血升高 正常到升高 地中海贫血正常到升高升高 髓障综合征正常到升高正常到降低 增生低下性贫血正常到升高降低 再障危象正常到降低降低 45 MRV 和 MSCV 分别代表什么意思 他们是怎么得到的 MRV 是指平均网织红细胞体积 MSCV 是指平均球形细胞体积 新亚加蓝染色的红细胞经酸性 低渗的脱蛋白溶液处理后形成脱蛋白的球形红细胞 VCS 技术将球形红细胞分成成熟的红细胞和网织红细胞 所有被分类的成网织红细胞的平均体 积称之为平均网织红细胞体积 MRV 所有红细胞 包括成熟红细胞和网织红细胞 的平 均体积为平均球形细胞体积 MSCV 46 网织红计数什么情况下显示 代表计算不完全 下列情况之一引发计算不完全 如果 RBC 计数不完全 RET 和 HLR 都会显示 如果 RBC 三次计数不统一 RET 和 HLR 都会显示 如果 RET 999 9 106个细胞 ul 除 RET 外 所有网织红细胞参数显示 如果 RET 100 除 RET 外 所有网织红细胞参数显示 如果 RET 0 IRF 显示 47 网织红检测中各个参数代表的含义是什么 RET 网织红细胞百分比 来源于 网织红细胞数值 所有红细胞数值 100 RET 网织红细胞绝对值 来源于 网织红细胞百分比 红细胞数量 IRF MI 网织红细胞成熟度 来源于 不成熟的网织红细胞 所有网织红细胞 MRV 平均网织红细胞体积 来源于所有网织红细胞体积的平均值 MSCV 平均球形红细胞体积 来源于在网织红细胞计数中所有红细胞体积的平均值 HLR 高散射性网织红细胞百分比 来源于 高激光散射值网织红细胞 所有红细 胞 100 HLR 高散射性网织红细胞绝对值 来源于 高散射性网织红细胞百分比 所有红 细胞数量 48 自动化网织红计数与手工法计数相比优势在哪 运用了流式细胞技术测量网织红细胞 提高了网织红细胞计数的准确性和精确性 提供一些反应网织红细胞成熟度和大小的非传统参数 自动网织红检测过程标准统一 消除了手工退片 染片 不同技师导致的误差 手工检测计数 1000 个细胞 而自动网织分析法分析 30000 个细胞 大大提高了检 测的准确度 第二篇 DIFF 血球分析仪 49 什么是 ACV 技术 如何进行工作的 A 指吸光率 C 指细胞化学染色 V 指体积 对白细胞分类的过程就是 在 DIFF 分类池中 25ul 的全血与 1000ul 的固定剂混合 12 秒 后 然后再在 1000ul 的稀释剂中稳定 3 秒钟 该反应过程将红细胞溶解 保持白细胞原 始 大小 同时对中性粒细胞 淋巴细胞 嗜酸 单核细胞进行差别染色 其中嗜酸性粒细染 色最深 本仪器可将试剂及反应保持在 35 受控温度下 中性粒细胞 淋巴 单核 嗜 酸 各自有不同的细胞核 形态结构和染色深度 根据其吸光性不同进行分类 每个染色的细 胞 分别由双聚焦流 DFF 系统聚焦 利用样品压力和鞘流穿过流动室 在流动室内检测细胞 体积和吸光率 50 什么是 DFF Dual Focus Flow DFF 双聚焦流 就是利用鞘流液来包绕和推动稀释剂悬浮的细胞 从而使每次只能有一 个细胞通过流动室中心 内侧的鞘流将样品聚焦通过阻抗微孔 外侧的鞘流在细胞离开微 孔 进入光学流动室时 将维持细胞的聚焦流 51 什么是流动室 对细胞的体积 阻抗 和吸光率的连续分析是在流动室中进行的 总量 72ul 的样品注 入 流动室的需要 15 秒 流动室带有一个 60um 的微孔 用于分析细胞体积 还有个 42um 的微 孔用于测定吸光率 52 5DIFF 的各种试剂的作用是什么 Diluent Diluent 稀释液稀释液 稀释全血标本 稳定细胞膜 以获得准确的计数和大小 传导微孔电流 同时在分析 间隙对仪器部件进行清洗 Fix Fix 白细胞分类试剂白细胞分类试剂 溶解红细胞 固定白细胞 对单核 中性粒 嗜酸性粒细胞的颗粒进行差别染色 WBCWBC Lyse Lyse 白细胞溶血剂白细胞溶血剂 WBC 溶解剂的作用 溶解红细胞以获得 WBC 计数 也可用于区别多形核嗜碱性粒细胞 HgbHgb Lyse Lyse 血红蛋白溶血剂血红蛋白溶血剂 溶解红血细胞 确定血红蛋白的浓度 Rinse Rinse 清洗剂清洗剂 由一种溶解蛋白的酶溶液组成 作为清洗剂 53 HCT 是测出来的还是算出来的 DIFF 检测的 HCT 是检测出来的 MCV 通过检测 HCT 是算出来的 54 中性粒细胞和嗜酸细胞的阈值的作用是什么 这是个唯一可移动的阈值 其它的均是固定的 阈值的移动以适应嗜酸细胞吸光率的变化 中性粒细胞的阈值移动用以确认嗜酸和 嗜中两细胞间的峰谷 如果找不到峰谷 中性粒细胞便移动至默认位置即图中间 此时 中性粒细胞的旗 标可出现 图如下 中性粒中性粒 嗜酸细胞阈值嗜酸细胞阈值 Absorbance Volume Neu t Eo s IM M Ch 127 55 MICRO MACRO 旗标分别代表什么意思 Micro 和 Macro 旗标 当在小红细胞区域和 或大红细胞区域内的细胞百分比大于限定 值时产生 其限定值为 小红细胞 5 大红细胞 7 5 56 血小板检测的正常直方图的特点 25fL 30fL18f L 绿色的虚线为一浮动界标在 18fl 到 25fl 之间移动 确定红细胞和血小板之间的最低点 如果在 25fl 处无红细胞被检测到 则仪器无旗标报警 57 在做血小板检测时出现 MIC 代表什么意思 MIC 旗标 如果在 18fl 到 25fl 检测到最低点 则产生 MIC 旗标 注意 这时血小板结果是可以接受的 如图所示 18fl 25fl 30fl 如果浮动界标寻找到的最低点在 18fl 以下 则浮动界标停留在 18fl 同时触发 MIC 报警 注意 这时血小板的结果是不可信的 需要复核 18fl 25fl 30fl 58 SCH 代表什么意思 SCH 旗标 如果浮动界标在 18fl 到 25fl 之间不能找到最低点 则界标自动停留在 18fl 同时触发 SCH 报警 注意 这时血小板结果是不可信的 需要使用其他方法复核 可能异常的因素 细胞碎片 血小板聚集 如图所示 18fl 25