综合实习实验(酱油)

感官检查感官检查 25ml具塞比色管 50ml烧杯 1 取2 mL试样于25 mL具塞比色管中 加水至刻度 振摇观察色泽 澄明度 应不浑浊 无沉淀物 2 取30 mL试样于50 mL烧杯中 观察应无霉味 无霉花浮膜 3 用玻璃棒搅拌烧杯中试样后 尝其味不得有酸 苦 涩等异味 氨基态氮 甲醛法 氨基态氮 甲醛法 原理 原理 利用氨基酸的两性作用 加人甲醛以固定氨基的碱性 使梭基显示出酸性 用氢 氧化钠标准溶液滴定后定量 以酸度计测定终点 试剂试剂 甲醛 36 应不含有聚合物 氢氧化钠标准滴定溶液c NaOH 0 050 mol L 仪器仪器 酸度计 磁力搅拌器 微量滴定管 5ml移液管一支 100ml容量瓶 10ml移液管2支 250ml烧杯 100ml烧杯 100ml量筒 碱式滴定管 1L烧杯1个 分析步骤 分析步骤 1 吸取5 0m L试样 置于100mL容量瓶中 加水至刻度 混匀后吸取20 0 m L 置于 200ml烧杯中 加60ml水 开动磁力搅拌器 用氢氧化钠标准溶液 c NaOH 0 050 mol L 滴定至酸度计指示pH8 2 记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液 0 05mol L 的 毫升数 可计算总酸含量 2 加入10 0 m L甲醛溶液 混匀 再用氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 继续 滴定至pH9 2 记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 的毫升数 3 同时取 80mL水 先用氢氧化钠溶液 0 05mol L 调节至pH为8 2 再加入10 0ml 甲醛溶液 用氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 滴定至pH9 2 同时做试剂空白试 验 结果计算 结果计算 试样中氨基酸态氮的含量按如下式进行计算 精密度 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 总酸总酸 原理 酱油中含有多种有机酸 用氢氧化钠标准溶液滴定 以酸度计测定终点 结果以乳 酸表示 试剂 试剂 氢氧化钠标准滴定溶液 C Na 0 05mol L 仪器仪器 酸度计 磁力搅拌器 微量滴定管 5ml移液管一支 100ml容量瓶 10ml移液管2支 250ml烧杯 100ml烧杯 100ml量筒 碱式滴定管 1L烧杯 分析步骤 分析步骤 同氨基酸态氮的步骤 量取80ML水 同时做试剂空白实验 1 吸取5 0m L试样 置于100mL容量瓶中 加水至刻度 混匀后吸取20 0 m L 置于 200ml烧杯中 加60ml水 开动磁力搅拌器 用氢氧化钠标准溶液 c NaOH 0 050 mol L 滴定至酸度计指示pH8 2 记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液 0 05mol L 的 毫升数 可计算总酸含量 2 加入10 0 m L甲醛溶液 混匀 再用氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 继续 滴定至pH9 2 记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 的毫升数 3 同时取 80mL水 先用氢氧化钠溶液 0 05mol L 调节至pH为8 2 再加入10 0ml 甲醛溶液 用氢氧化钠标准滴定溶液 0 05 mol L 滴定至pH9 2 同时做试剂空白试 验 结果计算 结果计算 精确度 精确度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 苯甲酸及其钠盐苯甲酸及其钠盐 10ml比色管 8个 100ml 5个 1 l 1个 容量瓶 移液管1ml 2 ml 5 ml 50 ml 100ml量筒 100 ml 1个 500 ml 3个 烧杯 一 实验原理 苯甲酸钠在 225nm 处有最大吸收波长 吸光度与浓度关系符合比尔定律 二 实验仪器 紫外分光光度计 蒸馏设备 三 实验试剂 酚酞溶液 1g 酚酞溶于 100ml95 乙醇中 85 正磷酸 重铬酸钾 溶解 4 9g 重铬酸钾于水中 稀释至 500ml 硫酸 稀释 66 5ml 浓硫酸至 500ml 苯甲酸钠贮备液 100ppm 称量 经干燥的苯甲酸钠 100ml 105 干 燥 2h 于 1000ml 容量瓶中 加 100ml 0 1nNaOH 及适量水溶解 然后以水定容 苯甲酸钠工作液 20ppm 稀释 20ml 贮备液至 100ml 四 测定方法 1 标曲 移苯甲酸钠工作液 1 2 3 4 5ml 于 5 个 10ml 容量瓶中各加入 1ml 0 1N NaOH 溶液并用水定容后 在 225ml 处测吸光度 以吸光度对浓度 ppm 制成标曲 2 样液中苯甲酸钠测定 样液制备 准确称取 5g 左右酱油于 100ml 容量瓶中 加 50ml 水以酚酞为指示剂 以 0 1N NaOH 调整至呈粉红色 再以水定容 空白液制备 移 20ml 上述中性样液 应含苯甲酸钠在 200 1000 g 间 于 250ml 蒸馏瓶中 加 20g 无水硫酸钠及 30ml 水 连接蒸馏设备 以 50ml 容量瓶内置 5ml 0 1N NaOH 溶液为吸收瓶 以大火加热 调节火力使馏液为 10ml 时所需时间为 10min 收 集馏液 35ml 后停止蒸馏以水洗净冷凝器 然后以水定容此接收瓶 比色液的制备 方法与空白液制取相同 只在加 20g 无水硫酸钠以前 要加 1ml 正磷酸 样液比色 以空白为对照 于 225ml 处测吸光度 以标准曲线可得苯甲酸钠浓度 五 计算 设 W 样品重量 g V 用水萃取 Wg 样品所得溶液体积 ml Y 比色用的溶液体积 ml X Vml 中含苯甲酸钠的重量 g 标曲中查得 苯甲酸钠 食品中山梨酸钾含量的测定 需脱色 食品中山梨酸钾含量的测定 需脱色 1 实验原理 山梨酸及其盐类 在硫酸 重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛 丙二醛与硫代巴比 妥酸作用产生红色化合物 其红色深浅与丙二醛浓度成正比 并于波长 530nm 处有最大吸 收 实验器材 100ml 容量瓶 3 个 10ml 移液管 3 支 250ml 容量瓶 50ml 烧杯 1ml 移液管 4 个 2ml 移液管 1 个 25ml 比色管 9 个 2 实验试剂 硫代巴比妥酸溶液 准确称取 0 5g 硫代巴比妥酸于 100mL 容量瓶中 加入 20mL 蒸馏水 然后再加入 10mLNaOH 溶液 1mol L 充分摇匀 使之完全溶解后再加入 11mLHCl 1mol L 用水稀释至刻度 此溶液要在临用前再配制 配制后在 6h 内使用 重铬酸钾 硫酸混合液 以 0 1mol L 重铬酸钾和 0 15mol L 硫酸以 1 1 的比例混合 山梨酸钾标准溶液 准确称取 250mg 山梨酸钾于 250mL 容量瓶中 用蒸馏水溶解并定 容 此溶液 1mL 相当于 1mg 山梨酸钾 山梨酸钾使用液 准确移取山梨酸钾标准液 25mL 于 100mL 容量瓶中 用蒸馏水定容至 刻度线 此溶液 1mL 相当于 10ug 山梨酸钾 3 实验步骤 1 样品的处理 量取 0 5mL 酱油于 50mL 烧杯中 加入 5g 活性炭和 40mL 的蒸馏水 在电炉上加热至 80 左右 保持半小时后过滤至 100mL 容量瓶中 用蒸馏水将滤渣清洗 数遍后转移容量瓶中 定容至刻度线备用 2 测定 分别吸取 0 0 2 0 4 0 6 0 8 1 0mL 山梨酸钾标准使用液于 25mL 比色管 中 加 1mL 样品于另一比色管中 将所有比色管加水至 2mL 再分别加入 1mL 重铬酸钾 溶液 1mL 硫酸溶液 沸水浴 7min 取出后立即加入 2mL 硫代巴比妥酸溶液 继续沸水 浴 10min 取出用冷水冷却 于 532nm 处比色测定 3 结果计算 X1 1 34 X2 X1 山梨酸钾的含量 X2 山梨酸的含量 酱油可溶性无盐固形物的测定酱油可溶性无盐固形物的测定 重量法 需脱色 重量法 需脱色 100ml 200ml 量筒 称量瓶 250ml 锥形瓶 1ml 2ml 5ml 10ml 移液管 酸性滴定管 1 范围 本方法采用重量法测定酱油中可溶性无盐固形物的含量 适用于各种类型 酱油中可溶性无盐固形物含量的测定 以 g 100mL 报告其结果 测定值保留两 位小数 2 原理 利用重量法得出样品中可溶性总固形物含量 减去样品中氯化钠的含量 就是样品中可溶性无盐固形物含量 而样品中氯化钠用硝酸银标准溶液滴定 生成氯化银沉淀 待全部氯化银沉淀后 多滴加的硝酸银与铬酸钾指示剂生成 铬酸银使溶液呈桔红色即为终点 由硝酸银标准滴定溶液消耗量计算氯化钠的 含量 3 试剂 3 1 硝酸银标准滴定溶液 c AgNO3 0 1mol L 3 1 1 配制 称取 17 5g 硝酸银 溶于 1000mL 水中 摇匀 溶液保存于棕色瓶中 3 1 2 标定 称取 0 2g 于 500 600 灼烧至恒重的基准氯化钠 精确至 0 0001g 溶于 70mL 水中 加入 10mL 淀粉溶液 10g L 用配制好的硝酸银溶液 c AgNO3 0 1mol L 滴定 用 216 型银电极作指示电极 用 217 型双盐桥饱和甘汞电极 作参比电极 按 GB9725 中二级微商法之规定确定终点 3 1 3 计算 按下式计算硝酸银标准滴定溶液的浓度 式中 C AgNO3 硝酸银标准滴定溶液的浓度 mol L m 基准氯化钠的质量 g V 滴定时所消耗硝酸银标准溶液的体积 mL 0 05844 与 1 00mL 硝酸银标准溶液 c AgNO3 1 000mol L 相当的 以 克表示的氯化钠的质量 3 2 铬酸钾溶液 50 g L 称取铬酸钾 5g 用少量水溶解后 加水定容至 100mL 3 3 淀粉溶液指示液 10g L 称取淀粉 1g 用少量水溶解后 加水定容至 100mL 4 仪器 4 1 分析天平 感量 0 1mg 4 2 电位计 精确度 2mV 指示电极 216 型银电极 参比电极 217 型双盐桥饱和甘汞电极 4 3 电热恒温干燥箱 103 2 4 4 称量瓶 直径 25mm 5 操作步骤 5 1 样品中可溶性总固形物含量的测定 将酱油样品充分振摇后 用干滤纸滤入干燥的 250mL 锥形瓶中 吸取滤液 10 00mL 于 100mL 容量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 吸取稀释液 5 00mL 置 于已烘至恒重的称量瓶中 移入 103 2 电热恒温干燥箱中 将瓶盖斜置于 瓶边 4 小时后 将瓶盖盖好 取出 移入干燥器内 冷却至室温 约需 0 5h 称量 再烘 0 5h 冷却 称量 直至两次称量差不超过 1mg 即为恒量 5 2 样品中氯化钠含量的测定 吸取 5 0mL 酱油样品 置于 200mL 容量瓶中 加水至刻度 摇匀 再吸取 2 00mL 稀释液于 250mL 锥形瓶中 加 100mL 水及 1mL 铬酸钾溶液 50 g L 混匀 在白色瓷砖的背景下用 0 1mol L 硝酸银标准滴定溶液滴定至初显桔红色 同时做空白试验 6 结果计算 6 1 氯化钠的含量按下式计算 式中 X1 样品中氯化钠的含量 g 100mL V 滴定样品稀释液时所消耗 0 1mol L 硝酸银标准溶液的体积 mL V0 空白试验所消耗 0 1mol L 硝酸银标准溶液的体积 mL c1 硝酸银标准滴定溶液的浓度 mol L 0 05844 与 1 00mL 硝酸银标准溶液 c AgNO3 1 000mol L 相当的 以 克表示的氯化钠的质量 6 2 样品中可溶性总固形物含量计算方式为 式中 X2 样品中可溶性总固形物含量 g 100mL m2 恒重后可溶性总固形物和称量瓶的质量 g m1 称量瓶的质量 g 6 3 样品中可溶性无盐固形物含量计算方式为 X X2 X1 式中 X 样品中可溶性无盐固形物含量 g 100mL X2 样品中可溶性总固形物含量 g 100mL X1 样品中氯化钠的含量 g 100mL 6 精密度 同一样品氯化钠的含量两次平行测定值之差 不得超过 0 1g 100mL 同一 样品可溶性总固形物含量两次平行测定值之差 不得超过 0 3g 100mL 7 参考文献 GB T18186 2000 酿造酱油 中 6 2 可溶性无盐固形物 全氮 需脱色 全氮 需脱色 500ml 凯氏烧瓶 冷凝器 25ml 酸式滴定管 2ml10ml 移液管 50ml100ml 量筒 锥形瓶 3 个 仪器仪器 a 凯氏烧瓶 500m L b 冷凝器 c 电热恒温干燥箱 d 氮球 e 分析天平 感量0 1mg f 酸式滴定管 25mL 9 移液管 试剂试剂 a 混合指示液 1份0 2 甲基红乙醇溶液与5份0 2 澳钾酚绿乙醇溶液配合 b 混合试剂 3份硫酸铜与50份硫酸钾混合 c 硫酸 95 一98 d 2 硼酸溶液 称取2g硼酸 加水溶解定容至100m L e 锌粒 f 40 氢氧化钠溶液 称取40g 氢氧化钠 溶于60m L水中 g 0 1mol L 盐酸标准滴定溶液 按 GB T601 规定的方法配制和标定 分析步骤分析步骤 吸取试样2 00 m L于干燥的凯氏烧瓶中 加入4g硫酸铜一硫酸钾混合试剂 10m L硫酸 在通风橱内加热 烧瓶口放一个小漏斗 将烧瓶45 斜置于电炉上 待内 容物全部炭化 泡沫完全停止后 保持瓶内溶液微沸 至炭粒全部消失 消化液呈 澄清的浅绿色 继续加热15 min 取下 冷却至室温 缓慢加水120 mL 将冷 凝管下端的导管浸入盛有30 mL2 硼酸溶液及2 3滴混合指示液的锥形瓶的液面 下 沿凯氏烧瓶瓶壁缓慢加入40m L40 氢氧化钠溶液 2粒锌粒 迅速连接蒸馏装置 整个装置应严密不漏气 接通冷凝水 振摇凯氏烧瓶 加热蒸馏至馏出液约120 mL 降低锥形瓶的位置 使冷凝管下端离开液面 再蒸馏1 min 停止加热 用少量水 冲洗冷凝管下端的外部 取下锥形瓶 用0 1mol L盐酸标准滴定溶液滴定收集液至紫 红色为终点 记录消耗0 1mol L盐酸标准滴定溶液的毫升数 同时做空白试验 计算计算 样品中全氮的含量按式 4 计算 允许差允许差 同一样品平行试验的测定差不得超过0 03g 100mL 铵盐 半微量定氮法 铵盐 半微量定氮法 2ml10ml移液管 500ml蒸馏瓶 100ml量筒 冷凝器 酸性滴定管 锥形瓶 3个 原理 原理 试样在碱性溶液中加热蒸馏 使氨游离蒸出 被硼酸溶液吸收 然后用盐酸标 准溶液滴定计算含量 试剂试剂 氧化镁 硼酸溶液 20g l 盐酸标准滴定溶液 c HCL 0 100mol l 混合指示液 甲基红 乙醇溶液 2g l 一份与溴甲酚绿 乙醇溶液 2g l 5份 临用时混匀 分析步骤分析步骤 吸取2ml试样 置于500ml蒸馏瓶中 加约150ml水及约1g氧化镁 连接好蒸馏装 置 并使冷凝管下端连接弯管伸入接受瓶液面下 接受瓶内盛有10ml硼酸溶液 20g l 及2滴 3滴混合指示液 加热蒸馏 由沸腾开始计算约蒸30min即可 用少量水冲洗弯管 以盐酸标准溶液 0 100mol l 滴至终点 取同量水 氧 化镁 硼酸溶液按同一方法做试剂空白试验 结果计算 结果计算 试样中的铵盐的含量 以氨计 按下式进行计算 精密度精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的10 附录附录1 1 需配制试剂 需配制试剂 一 氨基态氮 甲醛法 试剂试剂 甲醛 36 应不含有聚合物 氢氧化钠标准滴定溶液 c NaOH 0 050 mol L 二 总酸 试剂 试剂 氢氧化钠标准滴定溶液 C Na 0 05mol L 三 苯甲酸及其钠盐 酚酞溶液 1g 酚酞溶于 100ml95 乙醇中 85 正磷酸 重铬酸钾 溶解 4 9g 重铬酸钾于水中 稀释至 500ml 硫酸 稀释 66 5ml 浓硫酸至 500ml 苯甲酸钠贮备液 100ppm 称量 经干燥的苯甲酸钠 100ml 105 干燥 2h 于 1000ml 容量瓶中 加 100ml 0 1nNaOH 及适量水溶解 然后以水定容 苯甲酸钠工作液 20ppm 稀释 20ml 贮备液至 100ml 四 食品中山梨酸钾含量的测定 实验试剂 硫代巴比妥酸溶液 准确称取0 5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中 加入 20mL蒸馏水 然后再加入10mLNaOH溶液 1mol L 充分摇匀 使之完全溶 解后再加入11mLHCl 1mol L 用水稀释至刻度 此溶液要在临用前再配制 配制后在6h内使用 重铬酸钾 硫酸混合液 以0 1mol L重铬酸钾和0 15mol L硫酸以1 1的比例混合 山梨酸钾标准溶液 准确称取250mg山梨酸钾于250mL容量瓶中 用蒸馏水 溶解并定容 此溶液1mL相当于1mg山梨酸钾 山梨酸钾使用