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文档简介
专题专题 2 2 细胞工程细胞工程 一 植物细胞工程 1 理论基础 原理 全能性表达的难易程度 2 植物组织培养技术 1 过程 离体离体的植物器官 组织或细胞 愈伤组织愈伤组织 试管苗 植物体 2 用途 3 地位 是培育 培育植物新品种的最后一道 工序 3 植物体细胞杂交技术 1 过程 2 诱导融合的方法 物理法包括 等 化学法一般是用 作为诱导剂 3 意义 二 动物细胞工程 1 动物细胞培养 1 概念 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 将它分散成 然后放在适宜的 中 让这些细胞 2 动物细胞培养的流程 取动物组织块 动物胚胎或幼龄动物的器官或组织动物胚胎或幼龄动物的器官或组织 剪碎 用 处理分散成 制成 转入培养瓶中进行 培养 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养 3 细胞贴壁和接触抑制 悬液中分散的细胞很快就 称为 细胞数目不 断增多 当贴壁细胞分裂生长到表面 时 细胞就会 这种 现象称为 4 动物细胞培养需要满足以下条件 培养液应进行 处理 通常还要在培养液中添加一 定量的 以防培养过程中的污染 此外 应定期更换培养液 防止 合成培养基成分 糖 氨基酸 促生长因子 无机盐 微量元素等 通常需加入 等天然成分 适宜温度 哺乳动物多是 pH 95 5 O2是 所必需的 CO2的主要作用是 5 动物细胞培养技术的应用 2 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1 哺乳动物核移植可以分为 核移植 比较容易 和 核移植 比较难 2 选用去核卵卵 母母 细胞细胞的原因 卵 母 细胞 卵 母 细胞 3 体细胞核移植的大致过程是 下图 下图 4 体细胞核移植技术的应用 5 体细胞核移植技术存在的问题 克隆动物存在着 问题 表现出 缺陷等 3 动物细胞融合 1 动物细胞融合也称 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核细胞 称为 2 动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同 诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体 融合的方法类似 常用的诱导因素有 等 3 动物细胞融合的意义 克服了 成为研究 的重要手段 4 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法 植物体细 胞杂交 细胞膜的流动性去除细胞壁后诱 导原生质体融合 离心 电刺激 振动 聚乙二 醇等试剂诱导 克服了远缘杂交 的不亲和性 获 得杂种植株 动物细胞 融合 细胞膜的流动性使细胞分散后诱 导细胞融合 除应用植物细胞 杂交手段外 再 加灭活的病毒诱 导 制备单克隆抗体 的技术之一 4 单克隆抗体 1 抗体 一个 B 淋巴细胞只分泌一种 从血清中分离出的抗体 2 单克隆抗体的制备过程 注入小鼠注入小鼠 细胞融合细胞融合 分离分离 抗原注入小鼠体内抗原注入小鼠体内 B 淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 细胞培养细胞培养 选择培养细胞选择培养细胞 培养基培养基 体内培养体内培养体外培养体外培养 从腹水提取从腹水提取从培养液提取从培养液提取 单克隆抗体单克隆抗体 核移植 胚胎移植 3 杂交瘤细胞的特点 既能大量 又能产生 4 单克隆抗体的优点 5 单克隆抗体的作用 准确识别各种 物质的细微差异 并跟 发生特 异性结合 具有 的优点 主要用于治疗 可制成 也有少量用于 治疗其它疾病 专题专题 2 2 细胞工程细胞工程 一 植物细胞工程 1 细胞全能性细胞全能性 受精卵 生殖细胞 干细胞 体细胞受精卵 生殖细胞 干细胞 体细胞 植物细胞 动物细胞植物细胞 动物细胞 2 2 微型繁殖 作物脱毒 制造人工种子 单倍体育种 细胞产物的工厂化生产微型繁殖 作物脱毒 制造人工种子 单倍体育种 细胞产物的工厂化生产 3 转基因植物转基因植物 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 3 离心 振动 电刺激离心 振动 电刺激 聚乙二醇 聚乙二醇 PEGPEG 克服了远缘杂交不亲和的障碍 克服了远缘杂交不亲和的障碍 二 动物细胞工程 1 组织组织 单个细胞单个细胞 培养基培养基 生长和繁殖生长和繁殖 2 胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶 单个细胞单个细胞 细胞悬液细胞悬液 原代原代 传代传代 3 贴附在瓶壁上贴附在瓶壁上 细胞贴壁细胞贴壁 相互抑制相互抑制 停止分裂增殖停止分裂增殖 细胞的接触抑制细胞的接触抑制 4 无菌 无毒的环境无菌 无毒的环境 无菌无菌 抗生素抗生素 代谢产物积累对细胞自身造成危害代谢产物积累对细胞自身造成危害 营养营养 血清 血浆血清 血浆 温度温度 36 5 36 5 0 5 0 5 pH 7 27 2 7 47 4 气体环境气体环境 空空气气 C CO O2 2 细细胞胞代代谢谢 维维持持培培养养液液的的p pH H 5 制备病毒疫苗 制备单克隆抗体 检测有毒物质 培养医学研究的各种细胞 制备病毒疫苗 制备单克隆抗体 检测有毒物质 培养医学研究的各种细胞 2 1 胚胎细胞胚胎细胞 体细胞体细胞 2 比较大 容易操作比较大 容易操作 细胞质多 营养丰富细胞质多 营养丰富 4 加速家畜遗传改良进程 促进良畜群繁育 加速家畜遗传改良进程 促进良畜群繁育 保护濒危物种 增大存活数量 保护濒危物种 增大存活数量 生产珍贵的医用蛋白 生产珍贵的医用蛋白 作为异种移植的供体 作为异种移植的供体 用于组织器官的移植等用于组织器官的移植等 5 健康健康 遗传和生理遗传和生理 3 1 细胞杂交细胞杂交 两个或多个两个或多个 杂交细胞杂交细胞 2 聚乙二醇 灭活的病毒 电刺激聚乙二醇 灭活的病毒 电刺激 3 远缘杂交的不亲和性远缘杂交的不亲和性 细胞遗传 细胞免疫 肿瘤和生物生物新品种培育细胞遗传 细胞免疫 肿瘤和生物生物新品种培育 4 1 特异性抗体特异性抗体 产量低 纯度低 特异性差产量低 纯度低 特异性差 3 繁殖繁殖 专一的抗体专一的抗体
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