细胞冻存方法及步骤_第1页
细胞冻存方法及步骤_第2页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

冻存细胞注意事项冻存细胞注意事项 购买的细胞经过传代后 实验时一般要求先冻存起来一些细胞 一次全部用掉有些太浪费 冻存的细胞除了能够重复试验外 还能作为备用细胞 是实验室的一种资源 为了最大限度保存细胞活力 冻存细胞的时候要慢冻 由于甘油 或二甲基亚砜 DMSO 能提高细胞膜对水的通透性 不仅可使细胞 内的水分渗出细胞 还能减少细胞内形成得冰晶损伤细胞 所以冻 存细胞常用他们做保护剂 冻存细胞的时候需要对细胞做一定的处理 那么处理细胞时应该 注意哪些事项呢 冻存细胞注意事项 冻存细胞注意事项 1 冻存细胞前 12 24h 换新鲜培养基 使细胞一直处于对数生 长期 2 待细胞长至 80 汇合时胰酶消化 用新鲜培养基吹打后制成 细胞悬液 1000rpm 离心 10min 悬浮细胞则直接离心 3 弃上清 加入冻存液重悬细胞沉淀 调整细胞浓度为 3 106 1 107 cells mL 将细胞悬液分至冻存管内 每管 1 1 5mL 拧紧盖子 在管壁上做好标记 标明细胞名称 冻存日期 等 冻存细胞液配方可为胎牛血清 培养基 DMSO 4 6 1 或胎 牛血清 培养基 DMSO 1 9 1 或胎牛血清 DMSO 9 1 可根据 各实验室实际条件调整 4 按下列顺序依次降温 室温 4 20min 20 30min 80 过夜 液氮保存 也可使用程序降温盒更为方便 细胞冻存管 放入程序降温盒内可直接放入 80 过夜 再转至液氮罐内 注意程 序降温盒内异丙醇的量必须高于最低刻度线 冻存 5 次后异丙醇需 要跟换一次 以免影响冻存效果 5 冻存细胞后应取出一管复苏 检测细胞的存活率 理论上细 胞可在液氮内长
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 事务文书

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论